[发明专利]内切葡聚糖酶STCE和含有内切葡聚糖酶的纤维素酶配制品

说明书

本申请为分案申请，原申请的申请日为2004年10月22日，申请号为200480036105.7(PCT/JP2004/015733)，发明名称为“内切葡聚糖酶STCE和含有内切葡聚糖酶的纤维素酶配制品”。

技术领域

本发明关于内切葡聚糖酶STCE(Endoglucanases STCE)和含有内切葡聚糖酶的纤维素配制品，以及利用它们对含有纤维素的纤维进行处理的方法。

背景技术

以往，对于含有纤维素的纤维，为赋予纤维所期望的特性，采用纤维素酶对其进行处理。例如，在纤维产业中，为改善含有纤维素的纤维与皮肤的触感和外观，或者为使染色后的含有纤维素的纤维具有色泽局部性变化的“石磨”外观，采用纤维素酶进行处理【欧洲专利第307,564号说明书(专利文献1)】。

此外已知，染色后的含有纤维素的纤维，在反复清洗后，会起毛，染色布料的色泽也变得不鲜明。因此，通过在洗涤剂中含有纤维素酶，除毛或者使其不再起毛，可使得染色布料的色泽鲜明，即，使其澄澈化【欧洲专利第220,016号说明书(专利文献2)、国际公开第95/02675号小册子(专利文献3)、国际公开第97/30143号小册子(专利文献4)、国际公开第98/08926号小册子(专利文献5)】，含有纤维素酶的洗涤剂主要在欧洲销售。

对于洗涤中使用的纤维素酶，已知在洗涤剂中，腐质霉属(Humicola)来源的纯化的43kD内切葡聚糖酶成分(EGV)的澄澈化活性(除去布料中起的毛，使布料色泽鲜明的活性)是以往的由多种纤维素成分混合而成的纤维素配制品的约30倍【国际公开第91/17243号小册子(专利文献6)】。此外已知，通过使来源于腐质霉属的内切葡聚糖酶NCE5(以下有时简称为NCE5)在洗涤剂中发生反应，也可达到染色布料澄澈化的效果【国际公开第01/90375号小册子(专利文献7)】。进而已知，在洗涤剂中，根霉属(Rhizopus)来源的内切葡聚糖酶RCEI(以下有时简称为RCEI)表达增强的Humicola insolens培养液的澄澈化活性是RCEI表达未增强的Humicola insolens培养液的20倍以上【国际公开第00/24879号小册子(专利文献8)】。

像这样，尽管已知有多种内切葡聚糖酶具有使染色布料澄澈化活性，然而实际和欧美洗涤剂配合使用时，能够充分发挥活性的内切葡聚糖酶却很少。这被认为是由于欧美洗涤剂中含有大量阴离子表面活性剂、增效组分等，抑制了酶的活性。

此外，欧美洗涤用自来水一般硬度较高，含有大量的Ca²⁺、Mg²⁺等2价阳离子。这些2价阳离子可显著降低洗涤剂中的表面活性剂的洗涤能力，因而，为吸附这些2价阳离子，洗涤剂中配合有增效组分【Fragrance Journal，1995年，11卷，p.33-55(非专利文献1)】。此外，由于自来水的硬度因地域而差别很大，在洗涤剂中配合的增效组分的种类和添加量上，也根据地域不同颇费工夫。此外，已知不仅洗涤剂的洗涤能力，而且纤维素酶的活性也受到这些2价阳离子的影响【Mansfield，S.D.等人，Enzyme Microb.Technol.，23，1998年，p133-140(非专利文献)、Jenkins，C.C.AND Suberkropp，K.，Freshwater Biology，33卷第2号，1995年，p245-253(非专利文献3)】。因而，产生了纤维素酶的活性因水的硬度受到抑制，无法取得满意的澄澈化效果的问题，反之会出现纤维素酶活性增强使布料的强度降低的问题。

由于增效组分本身会影响纤维素酶的活性，因而，通过添加增效组分来缓和水的硬度对纤维素酶澄澈化活性的影响是很难的。所以人们需要不易受到自来水硬度的影响，并且具有稳定的澄澈化活性的纤维素酶。

以往，尽管可以使用多种纤维素酶成分的混合物处理含有纤维素的纤维，但对于含有纤维素的纤维而言，为取得满意的效果需要配合使用大量纤维素酶，因而其实用性受到限制。因此，大多数情况下，提供的纤维素酶配制物中含有大量高活性内切葡聚糖酶。其制造方法已知有，采用基因重组技术，在宿主细胞中大量表达高活性的目的内切葡聚糖酶成分的方法【国际公开第91/17243号小册子(专利文献6)、国际公开第98/03667号小册子(专利文献9)、国际公开第98/11239号小册子(专利文献10)】。