[发明专利]一种铅离子荧光DNA探针及铅离子浓度的荧光测定方法无效
申请号: | 201210018334.2 | 申请日: | 2012-01-20 |
公开(公告)号: | CN102586429A | 公开(公告)日: | 2012-07-18 |
发明(设计)人: | 卫碧文;吴继魁;林莉;高欢;张俊玲 | 申请(专利权)人: | 上海出入境检验检疫局机电产品检测技术中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙) 31257 | 代理人: | 董红曼 |
地址: | 200135 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 离子 荧光 dna 探针 浓度 测定 方法 | ||
1.一种铅离子荧光DNA探针,其特征在于,所述探针包括17E脱氧核酶以及底物链杂交组成的双链,所述底物链的5'末端以FAM荧光素修饰;
其中,所述17E脱氧核酶的序列为:
5'-CATCTCTTCTCCGAGCCGGTCGAAATAGTGAGT -3';
所述底物链的序列为:
5'-FAM-ACTCACTATrAGGAAGAGATG-3';
所述FAM荧光素如以下结构式(II)所示。
2.如权利要求1所述的铅离子荧光DNA探针,其特征在于,所述探针如以下结构式(I)所示。
3.一种利用如权利要求1所述铅离子荧光DNA探针进行铅离子浓度的荧光测定方法,其特征在于,以17E脱氧核酶及底物链杂交组成的铅离子荧光DNA探针作为铅离子的识别元件,以底物链5'末端修饰的FAM荧光素作为荧光信号分子,以纳米金胶作为荧光猝灭剂,利用FAM荧光素与所述铅离子荧光DNA探针单双链结合时的荧光信号差异,对待测样品中的铅离子浓度进行荧光检测。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述铅离子荧光DNA探针是由所述17E脱氧核酶及底物链在95℃、15min的退火条件下杂交组成。
5.如权利要求3所述的方法,其特征在于,在铅离子存在的情况下,所述铅离子荧光DNA探针中的底物链的第九及第十个核苷酸之间打开,所述铅离子荧光DNA探针解链。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述解链后的铅离子荧光DNA探针中的底物链与所述纳米金胶结合,所述FAM荧光素猝灭。
7.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述荧光检测在激发波长为494nm,发射波长520nm处进行。
8.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述铅离子浓度的检出限为2n mol/L。
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