[发明专利]用于鉴定肿瘤细胞或肿瘤组织的CREPT抗体有效
申请号: | 201210009890.3 | 申请日: | 2012-01-13 |
公开(公告)号: | CN102559601A | 公开(公告)日: | 2012-07-11 |
发明(设计)人: | 常智杰;胡建祥;韩斌;任芳丽;王银银;苏富琴;张衍泉 | 申请(专利权)人: | 清华大学 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C07K16/18;G01N33/577;G01N33/574;C12R1/91 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100084 北京市海淀区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 鉴定 肿瘤 细胞 组织 crept 抗体 | ||
技术领域
本发明涉及一种用于鉴定肿瘤细胞或肿瘤组织的CREPT抗体。
背景技术
癌症,医学术语亦称恶性肿瘤,为由控制细胞生长增殖机制失常而引起的疾病。癌细胞除了生长失控外,还会局部侵入周遭正常组织甚至经由体内循环系统或淋巴系统转移到身体其他部分。
癌细胞的特点是无限制、无止境地增生,使患者体内的营养物质被大量消耗;癌细胞释放出多种毒素,使人体产生一系列症状;癌细胞还可转移到全身各处生长繁殖,导致人体消瘦、无力、贫血、食欲不振、发热以及严重的脏器功能受损等等。与之相对的有良性肿瘤,良性肿瘤则容易清除干净,一般不转移、不复发,对器官、组织只有挤压和阻塞作用,但癌症(恶性肿瘤)还可破坏组织、器官的结构和功能,引起坏死出血合并感染,患者最终由于器官功能衰竭而死亡。
癌症发生初期很难发现,等出现各种临床表征后病人才到医院就诊,但通常已经是中晚期,很难治疗。一般治疗后,也很难预测患者的愈后情况。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于鉴定肿瘤细胞或肿瘤组织的CREPT抗体。
本发明提供的杂交瘤细胞CREPT-Ab-4H1,已于2011年11月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC,地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号),保藏号为CGMCC No.5477。
杂交瘤细胞CREPT-Ab-4H1分泌的单克隆抗体也属于本发明的保护范围。
本发明还保护所述单克隆抗体在制备试剂盒中的应用;所述试剂盒的功能为如下(a)或(b)或(c)或(d):(a)辅助鉴定肿瘤细胞;(b)辅助鉴定肿瘤组织;(c)辅助鉴定肿瘤患者;(d)辅助检测序列表的序列1所示的CREPT蛋白。
含有所述单克隆抗体的试剂盒也属于本发明的保护范围;所述试剂盒的功能为如下(a)或(b)或(c)或(d):(a)辅助鉴定肿瘤细胞;(b)辅助鉴定肿瘤组织;(c)辅助鉴定肿瘤患者;(d)辅助检测序列表的序列1所示的CREPT蛋白。
所述试剂盒还可含有以所述CREPT蛋白为免疫原获得的多克隆抗体。所述多克隆抗体具体可为将所述CREPT蛋白免疫兔子得到的多克隆抗体。
本发明还保护所述单克隆抗体在检测CREPT蛋白中的应用;所述CREPT蛋白为序列表的序列1所示的蛋白质。
本发明还保护用于检测CREPT蛋白的试剂在在制备试剂盒中的应用;所述试剂盒的功能为如下(a)或(b)或(c)或(d):(a)辅助鉴定肿瘤细胞;(b)辅助鉴定肿瘤组织;(c)辅助鉴定肿瘤患者;(d)辅助检测序列表的序列1所示的CREPT蛋白。所述用于检测CREPT蛋白的试剂为针对CREPT蛋白的抗体,如单克隆抗体或多克隆抗体。
本发明还保护一种试剂盒,包括用于检测CREPT蛋白的试剂;所述试剂盒的功能为如下(a)或(b)或(c)或(d):(a)辅助鉴定肿瘤细胞;(b)辅助鉴定肿瘤组织;(c)辅助鉴定肿瘤患者;(d)辅助检测序列表的序列1所示的CREPT蛋白。所述用于检测CREPT蛋白的试剂为针对CREPT蛋白的抗体,如单克隆抗体或多克隆抗体。
以上任一所述的肿瘤细胞可为HeLa细胞(人宫颈癌细胞)、HepG2细胞(人肝癌细胞)、PC12细胞(大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞)、MCF7细胞(人乳腺癌细胞)或B16细胞(人黑色素瘤细胞)。
以上任一所述的肿瘤组织可为肺癌组织、乳腺癌组织、胃癌组织、肾癌组织、前列腺癌组织或结肠癌组织。
以上任一所述的肿瘤患者的肿瘤可为HeLa细胞(人宫颈癌细胞)引起的肿瘤、HepG2细胞(人肝癌细胞)引起的肿瘤、PC12细胞(大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞)引起的肿瘤、MCF7细胞(人乳腺癌细胞)引起的肿瘤或B16细胞(人黑色素瘤细胞)引起的肿瘤。以上任一所述的肿瘤患者的肿瘤可为肺癌、乳腺癌、胃癌、肾癌、前列腺癌或结肠癌。
本发明发现CREPT基因在肿瘤细胞系的表达水平远远高于正常细胞中的表达水平,在肿瘤组织中的表达水平远远高于癌旁组织和/或正常组织中的表达水平。所以应用本发明提供的抗体可以辅助鉴定肿瘤细胞、肿瘤组织或肿瘤患者,具有操作简便、成本低廉、准确率高、预测愈后等优点。本发明提供的抗体(特别是单克隆抗体)灵敏度高、特异性强。
附图说明
图1为实施例2的步骤二中,步骤3的上清和7次的洗脱液的电泳图。
图2为实施例2的步骤六中,单克隆抗体的效价测定结果。
图3为实施例2的步骤七中,多克隆抗体的灵敏度测定结果。
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