[发明专利]基于五邻体蛋白的FAVI抗体间接ELISA检测试剂盒

权利要求书

1.一种基于五邻体蛋白的FAVI抗体间接ELISA检测试剂盒，包括包被酶标板、阴性标准血清、阳性标准血清、羊抗鸡IgG酶标二抗、洗涤液、稀释液、底物液和终止液，其特征在于：所述包被酶标板以I群禽腺病毒五邻体重组蛋白作为包被抗原。

2.根据权利要求1所述的基于五邻体蛋白的FAVI抗体间接ELISA检测试剂盒，其特征在于：所述I群禽腺病毒五邻体蛋白由序列表SEQ.ID.No.1的截短的五邻体基因编码。

3.根据权利要求1所述的基于五邻体蛋白的FAVI抗体间接ELISA检测试剂盒，其特征在于：所述I群禽腺病毒五邻体重组蛋白来自大肠杆菌原核表达。

4.根据权利要求1所述的基于五邻体蛋白的FAVI抗体间接ELISA检测试剂盒，其特征在于：所述包被酶标板是用包被液将包被抗原稀释至1～30μg/mL，加入96孔酶标板，100μL/孔，置于37℃温育1h后，4℃过夜；用PBST洗板3次，拍干，用封闭液封闭酶标板，37℃温育1h，用PBST洗板3次，拍干制得；所述封闭液为5％脱脂奶；所述包被液为pH 9.6的碳酸盐缓冲液。

5.根据权利要求1所述的基于五邻体蛋白的FAVI抗体间接ELISA检测试剂盒，其特征在于：所述羊抗鸡IgG酶标二抗是以辣根过氧化物酶标记的羊抗鸡IgG。

6.根据权利要求1所述的基于五邻体蛋白的FAVI抗体间接ELISA检测试剂盒，其特征在于：

所述阴性标准血清是SPF鸡胚孵育所产2～5日龄雏鸡的血清；

所述阳性标准血清是经I群禽腺病毒模拟自然感染的方式滴鼻、点眼两次后的SPF鸡血清；

所述洗涤液是含有0.05％吐温-20的磷酸盐缓冲液，pH为7.4；

所述稀释液是1％BSA；

所述底物液是TMB-H₂O₂溶液；

所述终止液是2M H₂SO₄。

7.根据权利要求4所述的基于五邻体蛋白的FAVI抗体间接ELISA检测试剂盒，其特征在于：所述磷酸盐缓冲液由NaCl 8.0g，KCl 0.2g，KH₂PO₄ 0.2g，Na2HPO₄.12H₂O2.9g，吐温-20 500uL，加蒸馏水定容至1000mL，调PH值到7.4制成。

8.根据权利要求4所述的基于五邻体蛋白的FAVI抗体间接ELISA检测试剂盒，其特征在于：所述TMB-H₂O₂溶液由TMB缓冲液10ml、TMB溶液0.5ml、H₂O₂ 32ul组成；所述TMB缓冲由Na₂HPO₄ 18.27g，柠檬酸4.665g，用900mL溶解，调PH至5.5，加水至1000mL制成；所述TMB溶液由5mL无水乙醇溶解TMB 10mg制成。