[发明专利]一种药物组合物注射液的质量检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种注射液的质量检测方法，特别涉及本发明药物组合物注射液的指纹图谱质量检测方法及其注射液中总皂苷和9，10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定方法。

背景技术

本发明药物组合物注射液是由黄芪、人参、苦参素3味药物组成、采用现代提取分离技术精制而成的中药注射剂，具有益气扶正，增强机体免疫功能的功效，在临床上用于原发性肝癌、直肠癌、恶性淋巴瘤、妇科肿瘤以及各种原因引起的白细胞低下及减少症和慢性乙型肝炎的治疗。

高效液相色谱(HPLC)技术是构建中药指纹图谱主要的方法，在中药的质量控制中发挥着重要的作用；但目前中药指纹图谱研究尚处于研究阶段，还存在一些问题需要不断探索，如指纹图谱研究的规范化、标准化有待加强，由于受所用仪器、色谱柱等影响，指纹图谱的重现性问题尚需提高，指纹图谱分析评价方法还有待完善等。

超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography，UPLC)色谱理论认为提高色谱柱的效能(efficiency)就能增加仪器的解析度(resolution)，而运用粒径低于2μm的小颗粒无疑是增加效能的好方法；但减小固定相的粒度以增加色谱柱效能一直的色谱仪器科学的瓶颈，因为小颗粒不仅要求系统能承受高于目前极限压力(比如6000psi/400bar)，需要更小的系统体积(死体积)，并且需要能适应可能只有几秒峰宽的高速检测器；与传统的高效液相色谱(HPLC)相比，UPLC具有高分离度(ultra resolution)、高速度(ultra speed)、灵敏度(sensitivity)等优势；目前，UPLC多应用于代谢组学分析及其他一些生化领域，在天然产物的分析方面运用也逐渐兴起，因为在这些领域深入研究需要更高的分析精度。

发明内容

本发明目的在于提供一种注射液的质量检测方法。

本发明目的是通过如下技术方案实现：

本发明药物组合物注射液的质量检测方法，包括如下含量测定和/或指纹图谱检测方法：

A 药物组合物注射液中总皂苷成分的含量测定方法为：对照品溶液制备，精密称取人参皂苷Rg1标准品，置于容量瓶中，甲醇溶解并定容，配制成0.98～1.10mg/ml的人参皂苷储备溶液；精密称取黄芪甲苷标准品，置于容量瓶中，甲醇溶解并定容，配制成1.0～1.2mg/ml的黄芪甲苷储备溶液，将以上两种储备溶液按照1∶1(V/V)的比例混合，制成浓度为1.0～1.1mg/ml对照品溶液；供试品溶液制备，精密量取本发明药物组合物注射液2～3ml，注入活化后的C18 SPE柱，依次采用水10ml，1％乙酸-水15ml，水15ml，10％甲醇-水10ml，80％甲醇-水15ml，洗脱，将80％甲醇-水洗脱部分蒸干，取甲醇适量定容于2ml容量瓶，制成供试品溶液；精密吸取供试品溶液200μL，置于试管中，氮气吹干，加入香草醛0.2ml，高氯酸0.8ml混匀，于60℃进行显色反应15min，加入冰醋酸5ml混匀，冰浴冷却1min，以空白溶液作参比，在552nm波长下，测定吸光度，代入标准曲线计算总皂苷的量，即得；

B 药物组合物注射液中9，10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定方法为：对照品溶液制备，称取9，10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷对照品，配制为15.0～16.5μg/ml的对照品溶液；供试品溶液制备，精密量取本发明药物组合物注射液10ml，水浴蒸干，残渣加入1％冰醋酸水溶液1～3ml使溶解，上C-18，500mg固相萃取柱，使用前先用无水甲醇5ml、再用5ml双蒸水冲洗分离，以15ml 1％冰醋酸水溶液洗脱，再以10ml水洗脱，然后以10％甲醇水溶液15ml洗脱，弃去上述洗脱液，再以80％甲醇18ml溶液洗脱，收集80％甲醇洗脱液，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至2ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，进样10μL分析；液相条件：Agilent Eclipse XDB-C18(150×4.6mm，5μm)，流动相：以乙腈为流动相A，以水为流动相B，进行梯度洗脱：15％A(0min)，25％A(30min)，40％A(40min)，检测波长207nm，柱温30℃，流速0.8ml/min；精密吸取供试品溶液200μL，置于试管中，氮气吹干，加入香草醛0.2ml，高氯酸0.8ml混匀，于60℃进行显色反应15min，加入冰醋酸5ml混匀，冰浴冷却1min，以空白溶液作参比，在552nm波长下，测定吸光度，代入标准曲线计算总皂苷的量，即得；