[发明专利]小麦6VS专性RAPD分子标记

权利要求书

1.小麦6VS专性RAPD分子标记，其特征在于所述的分子标记OPK08₉₁₀，是采用RAPD分子标记技术得到的：首先用苯酚-氯仿方法提取带有簇毛麦V染色体的代换系(6A/6V)、易位系(6AL/6VS)、易位系(6DL/6VS)、簇毛麦(VV)和不带簇毛麦V染色体的普通栽培小麦(AABBDD)和硬粒小麦(AABB)幼苗DNA，然后用100个10碱基随机引物进行与小麦6VS染色体专性特异片段的筛选，发现引物OPK08扩增分子量约为910bp的特异带，该特异带存在于所有含6V染色体和6VS的4份材料中；其中所用RAPD引物序列为：5’GAACACTGGG3’。

2.如权利要求1所述的小麦6VS专性RAPD分子标记，其中所述OPK08₉₁₀的PCR扩增反应体系为：20ng/μl小麦基因组DNA1μl，10×PCR Buffer2.5μl，25mM MgCl₂2.5μl，10mM dNTP0.5μl，50μM引物0.5μl，5U/μl TaqDNA聚合酶0.25μl，ddH₂O 17.75μl，总体系25μl，反应程序：96℃变性1分钟、35℃退火1分钟、72℃延伸2分钟、4个循环，94℃变性45秒、36℃退火1分钟、72℃延伸90秒、45个循环，72℃补齐10分钟；产物在含有0.5％μg/μl EB的1.0％的琼脂糖凝胶电泳分离，紫外灯下观察并照相记录结果。

3.如权利要求1所述小麦6VS专性RAPD分子标记OPK08₉₁₀的碱基序列为：

gaacactgggacctcgtggcacagcaagtcctctggcacttgggactccaaagaccccctcatggcggctta

taggcgagaggtggatgctatcgcagctcacttcaatggagatcatgtggaccggaggaagaaggcagctg

atgctttaagccggctgggatctcaaacaacgcctcagatgcaggtacgacagagtttggataatcacgctgg

ggacgctcaggagctgcagtagtatgacgaggaggccgtttctatgttacctatccggacgatcagtagttgg

gattctaggctgacaagggagatccgggtgcagttggtggttatctttctagatccggagtcggataactatgag

attgtaataattattgctataatgctatattatattctggggcatgtgtttgcctggctttgtacttctgtatcctttcttat

gttgtatgcgtgtatgattatcccctctgattgatcgaaccgtttgaacttgctttactgttgactgcaggtggttgat

gctttcgtgccggagttctagaaaagttttgagtccttagtttcacgtcactcttatatcatctcagttccgaatacca

cggccgactgaggatcgaaaataggaatcacgcgggtattttcgatgatctggtatgatgtttatgtgacggga

cctctgtctcaaaattagccccagtagggcgtggtggtccacgcctgtaatcccagtgactcaggaggctgag

gcaggagaatcacctgaatccgggaggcagatgcagtgagccaagactgcgctactgcattccagcctggg

agacagagtgcagactccgtccagacaacatagcagaggccacagctgcagaaggacccaggtgaggaca

ggagtaccccagtgttc。