[发明专利]一种多肽——突触蛋白－9.57和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——突触蛋白-9.57，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

突触蛋白属于接合的囊泡磷蛋白，它被认为控制了神经传递素的释放。突触蛋白家族一般都包括了高度联会的突触蛋白I，II。两者都呈现出两种可选择的接合变量：IA和IB；IIA和IIB。唯一的不同仅是它们的羧基末端。

在结构上突触蛋白IA和IB由一个小的N末端区域(称为“A”区)组成，它包括了一个丝氨酸的残基，这个残基能作为用于AMP依赖性蛋白质激酶和Ca²⁺，以及依赖型调钙蛋白致活酶I的循环性磷酸化作用的位置。“A”区的后面是一个由80个残基组成的连接器(“B”区)。第三个区域“C”，它包含了300个氨基酸，和肌动蛋白及突触蛋白囊装订有关。第四个区域“D”是脯氨酸富集并包括250个残基。C末端的终点接合领域是称为“E”(在IA)或“F”(在IB)。突触蛋白IIA和IIB结构同样也由A，B，C区组成，只是“D”区被较小的脯氨酸富集区“G”取代。突触蛋白IIB以一个较小的“I”区结束。而较大的突触蛋白IIA的C端由“H”和“E”组成[Sudhof T.C.，Czernik A.J.，1989，Science 245：1474-1480]。

研究发现，突触蛋白的两种保存区域作为信号模型。第一个是在“A”区保存的八肽，它包含了磷酸化的丝氨酸残基，第二个模型是一种位于“C”末端的11个残基的延伸，它是完全保存。该结构域含有以下两个保守的一致性序列片段：L-R-R-R-L-S-D-S(第一个S是磷酸化的)；G-H-A-H-S-G-M-G-K-V-K[Bahler M.，BenfenatiF.，1990，BioEssays，12：259-263]。突触蛋白是最重要的神经传递素的释放和接合功能中心。它存储神经传递素，并随着血浆膜释放他们的成分。通过胞内分泌融合，并通过胞外分泌来循环。

本发明的新的多肽的氨基酸序列中亦含有如上所属的突触蛋白家族保守的特征性序列片段，由此推断其是突触蛋白家族中的新成员。该蛋白在体内亦参与调控多种重要的物质转运及代谢过程，其突变或表达异常将导致体内神经传递素失调，进而引发各种神经系统紊乱的疾病。

由于如上所述突触蛋白-9.57蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的突触蛋白-9.57蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新突触蛋白-9.57蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——突触蛋白-9.57以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码突触蛋白-9.57的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码突触蛋白-9.57的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产突触蛋白-9.57的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——突触蛋白-9.57的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——突触蛋白-9.57的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与突触蛋白-9.57异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中169-432位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1831位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。