本发明提供了用于检测雌激素类化合物的重组MDA‑MB‑231细胞株及其制备方法和应用。构建重组MDA‑MB‑231细胞株的方法包括：(a)提供ERβ编码序列(SEQ ID NO:1)和3×ERE基因序列(SEQ ID NO:2)；(b)将ERβ基因片段构建到pCMV6‑mGFP载体质粒中pCMV‑ESR2(SEQ ID NO:3)，将ERE基因片段构建到荧光素酶报告基因质粒pGL4.21中，得到过表达质粒pGL‑ERE(SEQ ID NO:4)；(c)将所述pCMV‑ESR2转染MDA‑MB‑231细胞，获得过表达ERβ基因及GFP荧光蛋白的细胞株MDA‑MB‑231‑ESR2；(d)待所述MDA‑MB‑231‑ESR2细胞株性状稳定后，将过表达质粒pGL‑ERE转染细胞株，获得稳定表达ERβ和ERE基因的细胞株MDA‑MB‑231‑ESR2‑ERE。
