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[发明专利]一种分离培养脐带间充质干细胞的方法-CN201810737804.8在审
发明人：高戎戎;佟艳辉 -专利权人：上海中溢精准医疗科技有限公司
申请日： 2018-07-06 - 公布日： 2020-01-14 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及细胞工程领域，特别涉及一种利用混合消化酶分离培养脐带间充质干细胞的方法，该方法采用以下步骤：(1)用含有中性蛋白酶II、胰蛋白酶和胶原蛋白酶的混合消化酶处理脐带组织；(2)培养消化后得到的脐带间充质干细胞；该方法通过含有中性蛋白酶II、胰蛋白酶和胶原蛋白酶的混合消化酶，大大缩短了消化时间，能够有效减少对脐带间充质干细胞的损伤，提高细胞得率。
脐带间充质干细胞混合消化酶胰蛋白酶胶原蛋白酶中性蛋白酶消化分离培养脐带组织细胞工程有效减少得率损伤细胞

[发明专利]一种生长猪胃-小肠-大肠仿生消化方法及对饲料有效能值估测的应用-CN202110598619.7有效
发明人：赵峰;王钰明;张虎;杜中原;解竞静;萨仁娜 -专利权人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
申请日： 2021-05-31 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： G01N31/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种模拟生长猪胃‑小肠‑大肠消化过程并应用于测定饲料有效能值的方法。该方法包括如下步骤：将饲料样品粉碎过筛；制备胃缓冲液、小肠缓冲液、大肠缓冲液、模拟胃液(含胃蛋白酶)、浓缩模拟小肠液(含淀粉酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶)、浓缩模拟大肠液(含淀粉酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶和纤维素酶)；将粉碎好的饲料样品装入单胃动物仿生消化系统的模拟消化管中，通过电脑程控按顺序分别加入模拟胃液进行胃模拟消化；加入浓缩模拟小肠液进行小肠模拟消化；加入浓缩模拟大肠液进行大肠模拟消化；消化结束后进行清洗，获得未消化残渣后，测定残渣及饲料样品的总能值，计算饲料有效能值。该方法克服了传统体外模拟消化方法中大肠消化阶段只含有纤维素酶而缺乏猪体内大肠液中含有一定活性浓度的淀粉酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶的弊端，使测值与动物试验法的消化能、代谢能测值更加接近，且相关性更高、估测偏差更低的优势
一种生长小肠大肠仿生消化方法饲料效能估测应用

[发明专利]一种即用型胃蛋白酶工作液及其制备方法和应用-CN202210983406.0在审
发明人：杨德刚;倪冰洁;赵伟;刘明坤;叶锋 -专利权人：北京思尔成生物技术有限公司
申请日： 2022-08-16 - 公布日： 2022-11-01 - 主分类号： C12N9/96 文献下载
摘要：本发明提供了一种即用型胃蛋白酶工作液及其制备方法和应用，即用型胃蛋白酶工作液由缓冲剂、有机溶剂、通透分散剂、防腐剂和胃蛋白酶配制而成。本发明的即用型胃蛋白酶工作液应用于荧光原位杂交FFPE样本的预处理酶消化。本发明的即用型胃蛋白酶工作液配制后于2℃‑8℃储存，并可在长达8个月内随时取用，因此无需复杂且耗时的配制和预热过程，消化操作简单；同时工作液体系最大力度的激发了胃蛋白酶的活性，提高了消化力度，缩短了消化时间
一种即用型胃蛋白酶工作液及其制备方法应用

[发明专利]胰蛋白酶消化液、制备方法及即用型痰消化装置-CN201410783986.4有效
发明人：林军岳;徐建建;蒲建文 -专利权人：四川新健康成生物股份有限公司
申请日： 2014-12-16 - 公布日： 2018-05-22 - 主分类号： C12N9/96 文献下载
摘要：本发明公开了一种胰蛋白酶消化液、制备方法及即用型痰消化装置。所述胰蛋白酶消化液主要成分为胰蛋白酶与溶液稳定剂，其中，所述溶液稳定剂选自以下物质中的至少一种：糊精、海藻糖、牛血清白蛋白。本发明胰蛋白酶消化液不仅能在工作pH条件下稳定储存，还能在室温及工作浓度下稳定储存，大大减小了存储成本，即取即用，方便快捷。
胰蛋白酶消化液制备方法即用型痰消化装置

[发明专利]添加蛋白酶的中华鳖饲料-CN201310725927.7无效
发明人：袁康培;陆萍;彭彩娥;沈毅 -专利权人：浙江大学湖州市南太湖现代农业科技推广中心
申请日： 2013-12-25 - 公布日： 2014-04-16 - 主分类号： A23K1/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种添加蛋白酶的中华鳖饲料。针对中华鳖消化生理特点和营养要求，在饲料中添加适当的外源性蛋白酶，以补充内源蛋白酶的不足，提高蛋白质的消化吸收率，降低饲料系数，减轻水体污染，提高经济效益。对于中华鳖颗粒饲料，在原料混合阶段加入粉状蛋白酶，然后制粒；或在制粒后，在颗粒表面喷涂蛋白酶溶液。对于中华鳖粉状饲料，在原料混合阶段加入粉状蛋白酶。每克中华鳖颗粒饲料或粉状饲料成品中蛋白酶的活力为0.001-100.0U。
添加蛋白酶中华饲料

[发明专利]一种胃消化蛋白酶豆粉复合固体饮料的制备方法-CN202110398561.1在审
发明人：刘长平 -专利权人：还童（锦州）益健食品有限公司
申请日： 2021-04-14 - 公布日： 2021-08-10 - 主分类号： A23L11/65 文献下载
摘要：本发明公开了一种胃消化蛋白酶豆粉复合固体饮料的制备方法，取发芽好的质量分数为30%的糙米磨浆后打入发酵罐中，保持恒温35C°，往发酵罐中接种胃消化蛋白酶，接种的胃消化蛋白酶占总的质量分数的4%，再经过72小时的无氧发酵，经载体喷雾干燥，干燥的温度为45C°，便得到胃消化蛋白酶干粉，将大豆洗净除杂脱皮后，使用45C°温水将其泡开，时间为24小时，按照大豆重量与水重量的重量比为1:4将大豆磨粉，再用振动筛选机进行筛选之后，经载体喷雾干燥，得到豆粉，按照相关的重量分数，将得到的胃消化蛋白酶干粉和豆粉，按照质量份数分比为15份和95份的比例通过振动混合机进行混合，得到胃消化蛋白酶豆粉复合固体饮料的制备方法。
一种消化蛋白酶豆粉复合固体饮料制备方法

[发明专利]粘性生物样本消化剂及其制备方法-CN202011099347.8有效
发明人：农高惠;何林声 -专利权人：珠海市德灏生物科技有限公司
申请日： 2020-10-14 - 公布日： 2023-03-03 - 主分类号： C12N9/50 文献下载
摘要：本发明公开了一种粘性生物样本的消化剂组合物，包括蛋白酶、稳定剂、和增效剂；所述蛋白酶为木瓜蛋白酶、组织蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶或者蛋白酶K；所述稳定剂包括糖类、环糊精和生物缓冲剂；增效剂为焦磷酸钠、三乙醇胺本发明还提供了一种粘性生物样本的消化剂，包含前面任一消化剂组合物，还包含去离子水。本发明还提供了前述的粘性生物样本的消化剂的制备方法：取稳定剂、增效剂和高渗剂溶于去离子水中，调节pH值至7.2‑7.4，加入蛋白酶，搅拌溶解，即得。本发明的消化剂溶液，液态稳定、不需用户使用前复配、不损伤病原菌、可常温保存、在病原菌最适pH范围内起效、可通用于不同检测项目。
粘性生物样本消化及其制备方法

[发明专利]基于LC-MS/MS的用于表征蛋白的方法-CN201880029876.5有效
发明人：苏珊·麦金托什;米歇尔·科尔格雷夫;克伦·伯恩;乔·凯恩;周学荣 -专利权人：纽希得私人有限公司;联邦科学与工业研究组织
申请日： 2018-03-08 - 公布日： 2021-08-13 - 主分类号： G01N33/483 文献下载
摘要：本文的实施方案提供了分析顽拗性蛋白或膜结合蛋白的体外稳定性的方法，所述方法在包含蛋白水解酶、胃蛋白酶的模拟胃液(SGF)中并且与新型胃蛋白酶‑胰蛋白酶测定组合，使用最先进的质谱方法诸如LC‑MS/MS来监测精确的降解产物蛋白消化的程度可以通过胃蛋白酶消化产物的出现和胰蛋白酶消化的肽产物的消失(作为完整蛋白的代表(proxy))来评价。本文的实施方案还提供了使用高灵敏度LC‑MRM‑MS定量的蛋白定量方法。本文实施的方法在表征转基因植物诸如被遗传工程化以产生长链ω‑3多不饱和脂肪酸的油菜中产生的蛋白时特别有用。
基于 lc ms 用于表征蛋白方法

[发明专利]基于液质联用技术分析蛋白-多糖复合体消化率的方法-CN201811240285.0有效
发明人：纪超凡;赵铁峰;胡静;税东宁;李胜杰;祁立波;林心萍;梁会朋;董秀萍 -专利权人：大连工业大学
申请日： 2018-10-23 - 公布日： 2020-08-04 - 主分类号： G01N30/88 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于液质联用技术分析蛋白‑多糖复合体消化率的方法。所述方法为：将蛋白溶液以及蛋白‑多糖复合体溶液在模拟胃液中体外消化；接着对消化后的蛋白以及蛋白‑多糖复合体变性处理、用超滤管去掉低分子量多肽碎片，截留在超滤管中的大片段多肽使用除胃蛋白酶之外第二种酶切位点明确的内切蛋白酶进一步完全水解根据第二种蛋白酶切和胃蛋白酶切肽段的多肽丰度，确定胃蛋白酶消化率。进一步根据两种肽段中蛋白‑多糖复合体组别中高丰度的多肽推断蛋白和多糖的结合位点。
基于联用技术分析蛋白多糖复合体消化率方法

[发明专利]大豆分离蛋白为原料生产酶活性免消化蛋白质的制备方法-CN201910883838.2在审
发明人：朱振伟;朱光 -专利权人：长春大学
申请日： 2019-09-19 - 公布日： 2019-12-13 - 主分类号： C12P21/06 文献下载
摘要：本发明公开了以大豆分离蛋白为原料生产酶活性免消化蛋白质的生产方法。免消化蛋白质是指分子量在500道尔顿以下的小分子蛋白质。该段蛋白质是不需要人体消化，可以通过人体小肠直接进入身体被吸收利用。工艺中还保留了蛋白酶的活性，生产出酶活性的免消化蛋白质。保留蛋白酶活性对人体肠道脱落的内源性细胞蛋白有消化作用，这一点对老年人蛋白质回收利用内源性蛋白有很好的价值。生产线上采用膜分离可以生产出高纯度免消化蛋白质产品，不采用提纯工艺，可生产出免消化分离蛋白产品，同时可保留了蛋白酶的活性是产品独特性。
消化蛋白质蛋白酶酶活性保留生产大豆分离蛋白小分子蛋白质蛋白酶活性蛋白质产品蛋白质回收内源性蛋白内源性细胞分离蛋白人体肠道人体小肠提纯工艺独特性高纯度膜分离蛋白吸收

[发明专利]从非肿瘤样品中分离单细胞的方法-CN201811594138.3在审
发明人：吴文铭;彭俊雅;陈澔;黄丹;刘路路;洪夏飞;丛林;李冬晶;赵玉沛 -专利权人：中国医学科学院北京协和医院
申请日： 2018-12-25 - 公布日： 2019-04-12 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：所述方法包括：将非肿瘤样品与消化液混合进行消化，所述消化液含有VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶，其中，所述VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶的酶活力单位之间的比值为本发明能够在总消化时间较短的情况下实现单细胞的高收率和高活率提取，特别是胰腺组织，攻克了现有胰腺组织单细胞收率和活率较低的难题。
肿瘤样品脱氧核糖核酸酶胰蛋白酶抑制剂中性蛋白酶胰腺组织胶原酶消化液收率单细胞分离酶活力单位消化

[发明专利]从组织中分离单细胞的方法-CN201811595502.8在审
发明人：吴文铭;彭俊雅;陈澔;黄丹;刘路路;洪夏飞;丛林;李冬晶;赵玉沛 -专利权人：中国医学科学院北京协和医院
申请日： 2018-12-25 - 公布日： 2019-04-23 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：所述方法包括：将组织样品与消化液混合进行消化，所述消化液含有VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶，其中，所述VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶的酶活力单位之间的比值为本发明能够在总消化时间较短的情况下实现单细胞的高收率和高活率提取，特别是胰腺组织，攻克了现有胰腺组织单细胞收率和活率较低的难题。
脱氧核糖核酸酶胰蛋白酶抑制剂中性蛋白酶胰腺组织胶原酶消化液收率单细胞分离酶活力单位消化组织样品

[发明专利]从样品中分离单细胞的方法-CN201811595504.7在审
发明人：吴文铭;彭俊雅;陈澔;黄丹;刘路路;洪夏飞;丛林;李冬晶;赵玉沛 -专利权人：中国医学科学院北京协和医院
申请日： 2018-12-25 - 公布日： 2019-04-23 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：所述方法包括：将正常组织样品与消化液混合进行消化，所述消化液含有VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶，其中，所述VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶的酶活力单位之间的比值为本发明能够在总消化时间较短的情况下实现单细胞的高收率和高活率提取，特别是胰腺组织，攻克了现有胰腺组织单细胞收率和活率较低的难题。
脱氧核糖核酸酶胰蛋白酶抑制剂中性蛋白酶胰腺组织胶原酶消化液收率单细胞分离酶活力单位消化正常组织

[发明专利]从肿瘤样品中分离单细胞的方法-CN201811594160.8在审
发明人：吴文铭;彭俊雅;陈澔;黄丹;刘路路;洪夏飞;丛林;李冬晶;赵玉沛 -专利权人：中国医学科学院北京协和医院
申请日： 2018-12-25 - 公布日： 2019-04-23 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：所述方法包括：将肿瘤样品与消化液混合进行消化，所述消化液含有VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶，其中，所述VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶的酶活力单位之间的比值为本发明能够在总消化时间较短的情况下实现单细胞的高收率和高活率提取，特别是胰腺组织，攻克了现有胰腺组织单细胞收率和活率较低的难题。
肿瘤样品脱氧核糖核酸酶胰蛋白酶抑制剂中性蛋白酶胰腺组织胶原酶消化液收率单细胞分离酶活力单位消化

[发明专利]从异常组织中分离单细胞的方法-CN201811594148.7有效
发明人：吴文铭;彭俊雅;陈澔;黄丹;刘路路;洪夏飞;丛林;李冬晶;赵玉沛 -专利权人：中国医学科学院北京协和医院
申请日： 2018-12-25 - 公布日： 2021-01-19 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：所述方法包括：将异常组织样品与消化液混合进行消化，所述消化液含有VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶，其中，所述VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶的酶活力单位之间的比值为本发明能够在总消化时间较短的情况下实现单细胞的高收率和高活率提取，特别是胰腺组织，攻克了现有胰腺组织单细胞收率和活率较低的难题。
异常组织分离单细胞方法

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