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[发明专利]一种脐带血单核细胞的制备方法-CN201510707804.X在审
发明人：苏量 -专利权人：上海百众源生物科技有限公司
申请日： 2015-10-27 - 公布日： 2016-01-13 - 主分类号： C12N5/0786 文献下载
摘要：本发明公开了一种脐带血单核细胞的制备方法：步骤一、脐带血筛选与保存：采集、筛选健康足月产妇志愿者脐带血，置于低温下保存；步骤二、脐带血分离：对所述保存后的脐带血进行离心，得血浆；步骤三、加液：向所述血浆中加入淋巴细胞分离液，离心，得单核细胞层；步骤四、收集单核细胞：取所述单核细胞层，离心，即得单核细胞；步骤五、细胞培养：取所述单核细胞进行培养，调整细胞密度至设定值；步骤六、单核细胞冻存：向培养后的单核细胞中加入冷冻保护液本发明拟从原料采集开始直至细胞制备完成的全过程进行统一、系统监控，以实现脐带血单核细胞分离、冷冻的标准产品。
一种脐带血单核细胞制备方法

[发明专利]一种临床用脐血单核细胞的制备方法-CN201711447483.X在审
发明人：赵翔;李国焱;唐玲;熊华强 -专利权人：重庆斯德姆生物技术有限公司
申请日： 2017-12-27 - 公布日： 2018-06-22 - 主分类号： C12N5/0786 文献下载
摘要：本发明公开了一种脐带血单核细胞的制备方法：步骤一、脐带血初步筛选与保存；步骤二、培育；步骤三、吸取；步骤四、收集；步骤五、细胞培养；步骤六、单核细胞冻存和检测；步骤七；单核细胞的使用。本发明拟从原料采集开始直至细胞制备完成的全过程进行统一、系统监控，以实现脐带血单核细胞分离、冷冻的标准产品。
单核细胞脐带血单核细胞制备细胞培养标准产品初步筛选系统监控细胞制备原料采集脐带血冻存脐血冷冻保存检测培育统一

[发明专利]人β-防御素1的应用-CN201810569885.5在审
发明人：田月秋 -专利权人：田月秋
申请日： 2018-06-05 - 公布日： 2018-10-26 - 主分类号： A61K38/17 文献下载
摘要：以促进CM‑CSF和IL‑4诱导的新生儿脐带血单核细胞(Monocyte,Mo)向未成熟树突状细胞(Dendritic cell,DC)的分化，并能够促进LPS诱导的脐带血单核细胞来源的未成熟DC的成熟，以及抑制脐带血单核细胞来源的DC的凋亡，促进脐带血来源CD4+T细胞的增殖和活化，以及促进脐带血来源CD19+B细胞的活化。
脐带血单核细胞防御素脐带血活化诱导未成熟树突状细胞新生儿脐带血新生儿免疫单核细胞调节物未成熟凋亡应答制备成熟增殖应用分化

[发明专利]一种造血干细胞用的脐带血单核细胞培养方法-CN201711411147.X在审
发明人：王玉婷;吴闪;吴新明;吴旋 -专利权人：淮北智淮科技有限公司
申请日： 2017-12-23 - 公布日： 2018-06-15 - 主分类号： C12N5/0789 文献下载
摘要：本发明公开了一种造血干细胞用的脐带血单核细胞培养方法，包括如下步骤：取适量分离法获得的脐带血，经过筛选的检测项目包括携带病毒或遗传家族史，得到的原代培养物消化下来，在室温为35‑39℃，3‑7％CO2，无菌条件下用培养液进行传代培养，培养4‑5代得到造血干细胞，本发明步骤简单，操作方便，提高造血干细胞的培养效率，安全稳定，适用范围广，可将脐带血单核细胞定向分化培养以及传代培养得到纯度较高的造血干细胞。一方面取材方便，所述脐带血单核细胞可取自采集健康足月产妇志愿者脐带血液，且无数量限制，可避免道德争议。 1
造血干细胞脐带血单核细胞传代培养培养液原代培养物安全稳定定向分化脐带血液数量限制无菌条件分离法家族史脐带血产妇取材遗传病毒采集筛选消化携带检测健康

[发明专利]分离和培养来自脐带血的间充质干细胞的方法-CN200480033035.X无效
发明人：金成焕;韩薰 -专利权人：韩薰
申请日： 2004-10-25 - 公布日： 2006-12-13 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：本发明涉及利用对细胞治疗而言最为理想的脐带血来分离和培养间充质干细胞的方法。该方法包括在体积为大于45ml/单位的脐带血中添加抗凝剂，所述脐带血是在分娩后24小时内获得的脐带血；以αMEM(α－极限必需培养基)稀释所得的抗凝剂和脐带血的混合物，随后通过离心收集单核细胞；以及将获得的单核细胞在αMEM中进行悬浮培养，培养基中含有干细胞因子、GM－CSF(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)、G－CSF(粒细胞集落刺激因子)、IL－3(白细胞介素－3)和IL－6(白细胞介素－6)。
分离培养来自脐带血间充质干细胞方法

[发明专利]分离和培养来自冻存脐带血的间充质干细胞的方法-CN200480033036.4无效
发明人：韩薰;金成焕 -专利权人：韩薰
申请日： 2004-10-25 - 公布日： 2006-12-13 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：本发明涉及使用冻存的脐带血分离和培养最适合用于细胞治疗的间充质干细胞的方法。该方法包括将冻存的脐带血的解冻并向其中加入αMEM(α－极限必需培养基)，随后离心收集单核细胞；自获得的单核细胞中分离CD133阳性细胞；并将分离的细胞在αMEM中进行悬浮培养，培养基中含有干细胞因子、GM－CSF(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)、G－CSF(粒细胞集落刺激因子)、IL－3(白细胞介素－3)和IL－6(白细胞介素－6)。
分离培养来自脐带血间充质干细胞方法

[发明专利]用于离体扩增自然杀伤细胞的方法及其用途-CN201980089617.6在审
发明人： E·施帕尔;K·雷兹瓦尼 -专利权人：得克萨斯大学体系董事会
申请日： 2019-11-21 - 公布日： 2021-08-27 - 主分类号： A61K35/17 文献下载
摘要：本发明提供用于扩增脐带血来源的自然杀伤细胞的离体方法以及其使用方法。实施方案的实例包括：在抗原呈递细胞(APC)和IL‑2存在下刺激来自脐带血的单核细胞，并用APC再刺激该所述细胞以产生经扩增的NK细胞。在特定实施方案中，该方法不使用人白细胞抗原(HLA)配型。
用于扩增自然杀伤细胞方法及其用途

[发明专利]一种高效分离和扩增人脐带血间充质干细胞的方法-CN201210437524.8有效
发明人：孙博;肖忠党 -专利权人：东南大学
申请日： 2012-11-05 - 公布日： 2013-01-16 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及对在细胞治疗中最为理想的脐带血间充质干细胞进行高效分离扩增的方法。已经证明脐带血中含有分化能力较高，免疫排斥反应较小的间充质干细胞。脐带血银行的建立为实现自体细胞移植提供基础。但是，由于脐带血中间充质干细胞含量极低（1×108个单核细胞中仅含有0.5-30个），因此如何高效分离和扩增这些细胞成为了阻碍脐带血间充质干细胞向临床转化的难题。目前，多利用该细胞在培养皿的吸附能力，对脐带血间充质干细胞进行分离，但是成功率低，并且在扩增过程中难以保持干细胞特性。本发明包括利用蛋白成分对培养皿进行包被，配合添加多种生长因子的培养基，构建脐带血间充质干细胞扩增环境，实现了该细胞的高效扩增和分离。
一种高效分离扩增脐带血间充质干细胞方法

[发明专利]从脐带血中分离并扩大培养间充质干细胞 /祖细胞及将脐带血来源的间充质干细胞 /祖细胞分化成各种间充质组织的方法-CN03803606.1有效
发明人：河哲原;梁允渲;梁成银 -专利权人：美迪宝斯特有限公司
申请日： 2003-02-19 - 公布日： 2005-06-22 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：本发明涉及从脐带血中分离和培养间充质干细胞/祖细胞的方法，还涉及将脐带血来源的间充质干细胞/祖细胞分化成各种间充质组织的方法。所述方法包括如下步骤：将脐带血覆盖在Ficoll－Hypaque溶液上；将Ficoll－Hypaque溶液上的脐带血离心，获得单核细胞层；使通过单核细胞单层培养获得的细胞与针对间充质干细胞/祖细胞特异性抗原的抗体反应预定的孵育期；使用细胞分选仪仅分离与其相应抗体相结合的细胞；将分离的细胞培养，从而获得具有高纯度和极好生存能力的间充质干细胞/祖细胞。本发明的间充质干细胞/祖细胞能够分化成包括软骨细胞和成骨细胞在内的各种间充质组织。因此，根据本发明的细胞分离和培养方法能够实现间充质干细胞/祖细胞的大规模生产，本发明获得的细胞在受损间充质组织的再生和治疗上是有用的。
脐带血分离扩大培养间充质干细胞细胞来源化成各种组织方法

[发明专利]通过降低T细胞区室中的自身反应性来治疗免疫病症相关疾病的方法-CN201780066845.2在审
发明人：赵勇;R.科恩戈德;M.多纳托 -专利权人：哈肯萨克大学医学中心
申请日： 2017-08-29 - 公布日： 2019-06-04 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：所述发明提供了包含治疗量的驯化的单核细胞产物的药物组合物、用于制备驯化的单核细胞产物的方法以及治疗以淋巴细胞自身反应性为特征的疾病的方法。将来自患病主体的单核细胞与至少80％汇合的活的贴壁脐带血干细胞的群体共培养，以形成驯化的单核细胞产物。通过血管内输注至主体，返回治疗量的驯化的单核细胞产物。所述治疗量有效调节主体的T细胞区室中的自身反应性并减少以淋巴细胞自身反应性为特征的疾病的症状。
单核细胞自身反应性驯化淋巴细胞区室疾病脐带血干细胞药物组合物免疫病症有效调节输注贴壁制备治疗汇合血管返回群体

[发明专利]一种富含造血干细胞的临床用脐血单核细胞的制备方法-CN201510875945.2在审
发明人：朱兵锐;江晔;刘朋程 -专利权人：上海华颜医药科技有限公司
申请日： 2015-12-02 - 公布日： 2016-03-23 - 主分类号： C12N5/0786 文献下载
摘要：本发明提供一种临床用脐血单核细胞的制备方法，包括如下步骤：取适量分离获得的脐带血，置于脐血保存袋中冷藏保存；进行脐血单核分离处理，获得脐血单核细胞，进行冷冻处理；冷冻细胞复苏后用生理盐水洗涤，后再次计数和活率，并留样进行内毒素和细菌检测，根据计数结果按临床需要将细胞和复方电解质溶液混匀待用。该方法从原料采集开始直至细胞制备完成的全过程进行临床级监控，以实现脐血单核细胞的临床标准产品。
一种富含造血干细胞临床用脐血单核细胞制备方法

[发明专利]来自脐带血的表达ZNF281的万能干细胞的分离方法-CN201080016872.7有效
发明人：康景宣;庐暻焕 -专利权人：首尔大学校产学协力团
申请日： 2010-03-03 - 公布日： 2012-03-28 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明涉及一种来自脐带血的万能干细胞的分离方法，其特征在于，在含有纤维粘连蛋白的培养皿中培养从脐带血中分离得到的单核细胞，然后从培养物中收获干细胞，从而分离出来自脐带血的万能干细胞，以及涉及一种含有来自脐带血的万能干细胞或由其分化的细胞的细胞治疗剂此外，本发明涉及干细胞的新型培养基，一种干细胞的培养方法，其特征在于，在培养基中培养和增殖干细胞，以及一种以悬浮球培养或三维培养干细胞为特征的提高干细胞的干细胞特性的方法。
来自脐带血表达 znf281 万能干细胞分离方法

[发明专利]用于治疗脱髓鞘疾病的组合物和方法-CN201880016427.7在审
发明人： J·库特兹贝格;A·E·巴尔贝;A·萨哈;P·诺尔德内尔;P·斯科特兰德 -专利权人：杜克大学
申请日： 2018-01-12 - 公布日： 2019-12-13 - 主分类号： A61K35/14 文献下载
摘要：更具体地，本发明涉及包含DUOC‑01细胞产物的组合物，其源自保存的人脐带血(CB)单核细胞；制备这种组合物的方法；和使用这种组合物治疗脱髓鞘疾病的方法。
脱髓鞘疾病组合物治疗单核细胞人脐带血细胞产物制备保存治疗

[发明专利]用于治疗血液病症的富集和扩增的人脐带血干细胞-CN201911214820.X在审
发明人： P·查拉西亚;R·霍夫曼 -专利权人：位于西奈山的伊坎医学院
申请日： 2014-05-16 - 公布日： 2020-04-17 - 主分类号： C12N5/0789 文献下载
摘要：本发明涉及分离和扩增的人脐带血干细胞的富集群体以及产生分离和扩增的人脐带血干细胞的富集群体的方法。所述扩增的人脐带血干细胞是CD34+、CD90+、CD184+、CD117+、CD49f+、ALDH+、CD45RA‑并表达多能性基因SOX2、OCT4、NANOG和ZIC3。在一个实施方案中，本发明的所述富集群体中的所述干细胞对于醛脱氢酶活性呈阳性(ALDH+)。另外，在一个实施方案中，所述扩增的干细胞几乎不含T细胞和B细胞并且含有有限数量的单核细胞(CD14)。此外公开了使用本发明的所述干细胞治疗受试者的血液病症的方法和测定化合物对造血干细胞的作用的方法。
用于治疗血液病症富集扩增脐带血干细胞

[发明专利]用于治疗血液病症的富集和扩增的人脐带血干细胞-CN201480034563.0有效
发明人： P·查拉西亚;R·霍夫曼 -专利权人：位于西奈山的伊坎医学院
申请日： 2014-05-16 - 公布日： 2020-01-03 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明涉及分离和扩增的人脐带血干细胞的富集群体以及产生分离和扩增的人脐带血干细胞的富集群体的方法。所述扩增的人脐带血干细胞是CD34+、CD90+、CD184+、CD117+、CD49f+、ALDH+、CD45RA‑并表达多能性基因SOX2、OCT4、NANOG和ZIC3。在一个实施方案中，本发明的所述富集群体中的所述干细胞对于醛脱氢酶活性呈阳性(ALDH+)。另外，在一个实施方案中，所述扩增的干细胞几乎不含T细胞和B细胞并且含有有限数量的单核细胞(CD14)。此外公开了使用本发明的所述干细胞治疗受试者的血液病症的方法和测定化合物对造血干细胞的作用的方法。
用于治疗血液病症富集扩增脐带血干细胞

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