本发明提供了一种具有立体选择性的酮还原酶和使用这种酮还原酶的一种(R)‑3‑羟基丁酸乙酯的不对称合成方法,包括:作为反应底物乙酰乙酸乙酯在具有立体选择性的酮还原酶的催化下生成目标产物(R)‑3‑羟基丁酸乙酯本发明巧妙利用具有立体选择性的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的酮还原酶,一步反应即成功合成了高浓度的(R)‑3‑羟基丁酸乙酯。总之,本发明所提供的(R)‑3‑羟基丁酸乙酯的不对称合成方法特别适合大规模工业化生产,应用前景广阔。
本发明公开了一种具有立体选择性的酮还原酶和使用这种酮还原酶的一种(S)‑3‑羟基丁酸乙酯的不对称合成方法,包括:作为反应底物乙酰乙酸乙酯在具有立体选择性的酮还原酶的催化下生成目标产物(S)‑3‑羟基丁酸乙酯本发明巧妙利用具有立体选择性的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的酮还原酶,一步反应即成功合成了高浓度的(S)‑3‑羟基丁酸乙酯。总之,本发明所提供的(S)‑3‑羟基丁酸乙酯的不对称合成方法特别适合大规模工业化生产,因此具有广阔的应用前景。
本发明公开了一种制备(2S,3R)‑2‑苯甲酰氨甲基‑3‑羟基丁酸甲酯的方法,该方法包括:制备含羰基还原酶基因的工程菌和含葡萄糖脱氢酶基因的工程菌;分别制备两种工程菌的静息细胞悬液;将两种静息细胞悬液混合后,再与底物外消旋2‑苯甲酰氨甲基‑3‑羰基丁酸甲酯、氢供体和辅因子混合,进行不对称还原反应,制得(2S,3R)‑2‑苯甲酰氨甲基‑3‑羟基丁酸甲酯;羰基还原酶基因的碱基序列如SEQ ID NO.1所示,该方法可催化底物外消旋2‑苯甲酰氨甲基‑3‑羰基丁酸甲酯反应生成(2S,3R)‑2‑苯甲酰氨甲基‑3‑羟基丁酸甲酯,提高了产物的转化率和纯度。