本发明公开了一种无胶原蛋白水解活性的角蛋白酶突变体,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明提供了一种无胶原蛋白水解活性的角蛋白酶突变体,所述突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的角蛋白酶的第221位的甲硫氨酸突变为异亮氨酸,命名为KerZ1/M221I。通过酶活测定结果显示,角蛋白酶突变体KerZ1/M221I保留了59235U/mL的角蛋白水解活性,并且无胶原蛋白水解活性,因此该角蛋白酶突变体在应用时可以避免胶原蛋白酶的损伤,提高皮革的品质。
本发明公开一种角蛋白酶及其编码基因以及用于制备角蛋白水解物的应用,角蛋白酶是如下(a)或(b)所示的蛋白质:(a)由序列表SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)由序列表SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经过一个或多个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或插入得到的,具有角蛋白降解活性的蛋白质。所述角蛋白酶与酸性蛋白酶顺序分批使用,降解鸡毛、猪毛等废弃角蛋白,所制备的低分子量角蛋白水解物具有两个特征分子量分布,即:3‑6kDa与小于1kDa。利用本发明制备的角蛋白水解物具有更高的毛发结合稳定性,在温和表面活性剂存在条件下,不易从毛发表面洗脱。