本发明公开了一种抗杨尺蠖害虫的转基因欧美杂交杨,用下述方法获得:以杂交杨(Populus trichocarpa×Populus deltoides)叶片的总RNA为模板,以SEQ ID No.2、3为引物E.coli菌株TOP10,筛选阳性克隆,筛选含有抗性质粒的菌落,提取质粒进行PCR验证、双酶切验证,挑选正确的重组子,命名为pBI121-WIN4并转入根癌农杆菌,进行菌落PCR鉴定;获得的菌株转化欧美杂交杨,得到抗杨尺蠖害虫的转基因欧美杂交杨。本发明的抗杨尺蠖害虫的转基因欧美杂交杨对杨尺蠖害虫的抗虫能力强。