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[发明专利]一种人体未成熟卵体外成熟培养方法-CN200510062111.6无效
发明人：朱小明;黄荷凤;朱依敏;徐晨明;钱羽力;金帆 -专利权人：浙江大学
申请日： 2005-12-19 - 公布日： 2006-07-12 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：本发明公开了一种人体未成熟卵体外成熟培养方法，未成熟卵是指卵巢刺激周期卵丘冠颗粒细胞剥除的未成熟卵，该方法包括配置和预温标准的人类体外成熟培养液，在所述人类体外成熟培养液中按照9∶1的体积比加入自体成熟卵泡液制成培养液A，将第一次减数分裂中期的未成熟卵置于所述培养液A的微滴中进行培养；在所述培养液A中加入分离、纯化的自体卵丘冠颗粒细胞沉淀，悬浮成自体卵丘冠颗粒细胞密度在1～5×10⁵/ml的培养液B，将第一次减数分裂前期的未成熟卵置于所述培养液B的微滴中进行培养。本发明的人体未成熟卵体外成熟培养方法，培养成熟率、且能提高成熟卵其后发育能力。
一种人体未成熟体外成熟培养方法

[发明专利]促树突状细胞成熟的体外培养方法及专用培养基-CN201110180449.7无效
发明人：王贵强;吴学杰;刘永哲;任媛媛;李世红 -专利权人：北京大学第一医院
申请日： 2011-06-30 - 公布日： 2013-01-02 - 主分类号： C12N5/0784 文献下载
摘要：本发明公开了一种促树突状细胞成熟的体外培养方法及专用培养基。本发明提供一种由离体未成熟树突状细胞制备树突状细胞的促成熟培养基。本发明提供的由离体未成熟树突状细胞制备树突状细胞的促成熟培养基，按照如下方法制备：将R848、PGE2和无血清AIM-V培养基混合，得到培养基，所述R848在所述促成熟培养基中的浓度为(1-10)μg/mL；所述PGE2在促成熟培养基2中的浓度为1μg/mL。本发明的实验证明，本发明的促成熟培养基要优于对照标准培养基，本发明的促成熟培养基使用的刺激因子少，促DC成熟的能力强，并且促成熟后DC存活率高。
树突细胞成熟体外培养方法专用培养基

[发明专利]小卵泡卵母细胞的体外成熟培养液及其应用-CN201610291108.X有效
发明人：夏国良;张延浩;王超 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2016-05-04 - 公布日： 2021-05-14 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明涉及细胞培养，具体公开了一种小卵泡卵母细胞的体外成熟培养液，其含有100nM的E2和100ng/mL的CNP/BNP。本发明还提供了所述体外成熟培养液在促进小卵泡卵母细胞体外成熟或抑制小卵泡卵母细胞减数分裂中的应用及一种促进卵母细胞体外成熟的培养方法，具体为：采集动物的卵母细胞，按卵泡直径大小分类：将小卵泡卵母细胞置于前述的体外成熟培养液中进行前成熟培养，培养时间为20h，然后在成熟液内培养46±2h；将大卵泡卵母细胞直接在成熟液中培养46±2h。本发明采用两段体外成熟培养方法，应用CNP/BNP和E2前成熟处理小卵泡卵母细胞，促进核成熟和胞质成熟同步，提高了体外发育能力，能够成为新型的减数分裂抑制药物在畜牧业成产上推广应用。
卵泡细胞体外成熟培养液及其应用

[发明专利]一种小鼠卵巢组织液的提取方法及其应用-CN201110009661.7无效
发明人：周冬梅;刘丽均;徐平;芮荣;郁丽丽;朱权凤 -专利权人：上海斯莱克实验动物有限责任公司
申请日： 2011-01-14 - 公布日： 2011-09-07 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明提供一种小鼠卵巢组织液的提取方法，将小鼠的卵巢置于基础培养液中捣碎，使卵巢组织液溶于基础培养液中形成预培养液。本发明还提供一种小鼠卵母细胞体外成熟的培养方法，包括将小鼠的未成熟卵母细胞移入成熟培养液中进行体外培养，所述成熟培养液由所述预培养液添加到卵母细胞基础培养液中形成。此外，本发明还提供一种胚胎移植获得试管小鼠的方法，包括将根据上述体外成熟的培养方法培养成熟的卵母细胞进行体外受精和胚胎移植。通过本发明所提供的卵巢组织液在小鼠卵母细胞体外成熟中的应用，有效提高了体外成熟卵子受精后的卵裂率，使其与体内成熟卵子的卵裂率无显著差异，最终通过胚胎移植获得试管小鼠。
一种小鼠卵巢组织液提取方法及其应用

[发明专利]水牛卵母细胞体外成熟培养方法-CN201610208646.8在审
发明人：苏雷 -专利权人：云南中科胚胎工程生物技术有限公司
申请日： 2016-04-06 - 公布日： 2016-06-01 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明的水牛卵母细胞体外成熟培养方法，其特征在于包括卵母细胞准备、IVM培养小滴制备以及体外成熟培养三个步骤，其采用的体外成熟培养液由TCM199、FBS、oFSH、17β-E₂、本发明的水牛卵母细胞体外成熟培养方法，能显著促进卵母细胞的细胞质成熟，解决了目前水牛体外成熟的卵母细胞受精后胚胎体外发育率低的问题；本发明的成熟培养液能促进水牛卵母细胞成熟发育，且对维持卵母细胞和早期胚胎形态有良好作用
水牛细胞体外成熟培养方法

[发明专利]卵母细胞体外成熟培养液及其制备方法和应用-CN201910326404.2有效
发明人：胡敏华;周治东;杜志国;龙海斌;何嘉欣;石观稳;刘运忠;倪庆纯 -专利权人：广州医药研究总院有限公司
申请日： 2019-04-23 - 公布日： 2020-11-17 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明涉及一种卵母细胞体外成熟培养液及其制备方法和应用，卵母细胞体外成熟培养液包括发情母犬血清、发情母犬卵泡液和基础培养液。该卵母细胞体外成熟培养液可使犬COCs体外核成熟至MI‑MII阶段的比例稳定在45％左右，显著提高了犬COCs体外核成熟率，为犬卵母细胞体外成熟培养提供了新的思路。
细胞体外成熟培养液及其制备方法应用

[发明专利]利用体外成熟犬卵母细胞制备体外受精犬的方法-CN201810927109.8有效
发明人：郑敏;米继东;赵建平 -专利权人：北京希诺谷生物科技有限公司;公安部南昌警犬基地
申请日： 2018-08-14 - 公布日： 2022-06-14 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明涉及利用体外成熟犬卵母细胞制备体外受精犬的方法，所述方法包括：收集犬卵母细胞，用成熟培养液培养收集的犬卵母细胞进行体外成熟培养，其中成熟培养液是添加10～100μg/ml孕酮的TCM199培养液。
利用体外成熟犬卵母细胞制备体外受精方法

[发明专利]促进牛体外胚胎培养卵母细胞体外成熟的方法-CN201910421475.0在审
发明人：王小武;郭晶;王娜;郝少强;赵明礼;张月桥;杨尚斌;何伟;马毅;郭春明 -专利权人：天津博裕力牧科技有限公司;天津中科博雅生物育种研究有限公司;天津力牧鼎丰生物技术有限公司
申请日： 2019-05-21 - 公布日： 2019-07-30 - 主分类号： C12N5/073 文献下载
摘要：本发明涉及促进牛体外胚胎培养卵母细胞体外成熟的方法。其中牛体外受精胚胎培养的方法包括如下步骤：(1)卵母细胞的采集和体外成熟，在进行体外成熟操作时，将离体采集或者活体采集所得COCs在卵母细胞成熟培养液中洗涤1次，再转移到新的成熟培养液中培养22‑24h，培养条件为38.8℃、5.5‑6.5％CO2、饱和湿度；(2)体外受精；(3)胚胎体外培养及保存，保存时可以置入液氮中冷冻保存。特别地，采用本发明方法尤其是其中的成熟液可以有效提高卵母细胞体外成熟率。
卵母牛体胚胎培养体外成熟采集培养液成熟卵母细胞成熟胚胎体外培养成熟培养液冷冻保存卵母细胞培养条件受精胚胎体外受精保存成熟液活体离体液氮置入洗涤饱和

[发明专利]一种固体培养获得针叶树种胚状体的方法及其培养基-CN200510090282.X有效
发明人：韩素英;齐力旺;张守攻;王建华 -专利权人：中国林业科学研究院林业研究所
申请日： 2005-08-12 - 公布日： 2006-02-15 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种固体培养获得针叶树种胚状体的方法及其培养基。本发明所提供的针叶树种胚状体固体培养基，包括诱导培养基、增殖培养基和成熟培养基，所述成熟培养基分为成熟培养基1或成熟培养基2。应用上述固体培养基，固体培养获得针叶树种胚状体的方法，包括如下步骤：诱导培养、增殖培养和成熟培养，得到所述胚状体。本发明通过对培养各阶段培养基组分的优化，提高了胚性愈伤组织质量，早期原胚质量大大改善，与现有技术相比，体细胞胚培养发生状况取得了重大突破。
一种固体培养获得针叶树种胚状体方法及其培养基

[发明专利]一种卵母细胞体外成熟培养液的制备方法-CN202110283271.2有效
发明人：包云;余柯达;柴娟;毛佳婷;师帅 -专利权人：金华市人民医院
申请日： 2021-03-17 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明公开了一种卵母细胞体外成熟培养液的制备方法，包括以下步骤：(1)用PBS制备200mmol/L的肌肽溶液；(2)将步骤(1)中的肌肽溶液加入IVM未成熟卵培养液中，形成体外成熟培养液；(3)将步骤(2)所得的体外成熟培养液通过20‑25μm的滤膜进行过滤，最终得卵母细胞体外成熟培养液。肌肽能够有效促进未成熟卵母细胞的体外成熟及提高卵母细胞的质量。
一种细胞体外成熟培养液制备方法

[发明专利]成熟树突状细胞的培养试剂及培养方法-CN201911020223.3在审
发明人：马艳玲;李欢欢;程旭东 -专利权人：中生康元生物科技(北京)有限公司
申请日： 2019-10-25 - 公布日： 2020-01-03 - 主分类号： C12N5/0784 文献下载
摘要：本发明公开了一种成熟树突状细胞的培养试剂及培养方法。本发明的DC培养试剂包括不成熟DC诱导剂、成熟DC诱导剂、不成熟DC活化剂、ICOS抗体、抗原。本发明通过不成熟DC诱导、不成熟DC活化、抗原和抗体负载、成熟DC诱导几个环节使得DC培养方案能够有效提高DC的得率和活性，刺激CTL以后可有效提高CTL细胞的杀伤活性。
成熟培养试剂诱导剂抗原抗体诱导成熟树突状细胞杀伤活性活化剂得率活化刺激环节

[发明专利]人成熟卵泡液在未成熟卵体外成熟技术中的应用-CN02112608.9无效
发明人：钱云;刘嘉茵;冒韵东;王淑玉;丁卫;杨乃明 -专利权人：南京医科大学第一附属医院
申请日： 2002-01-29 - 公布日： 2002-12-18 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：本发明所述的含人成熟卵泡液的培养液用于人未成熟卵的体外培养技术,其成分由Ham′sF－10或TCM199,人代血清SSS,rFSH,HCG,17β雌二醇,以及人成熟卵泡液组成。利用未成熟卵体外成熟技术(IVM),将卵子成熟障碍的不孕症妇女的未成熟卵取出,采用本发明技术制备的培养液将其培养成熟,并在体外受精和进行胚胎移植,帮助其妊娠。获得了65%的卵子成熟率和33.3%的妊娠率。本发明技术提供了一种高效、价廉、方便的人卵子体外成熟的培养液,并有可能将其制成商品化的制剂,用于人未成熟卵的体外成熟技术。
成熟卵泡未成熟体外技术中的应用

[发明专利]改进牛卵母细胞体外成熟的方法-CN202010250266.7有效
发明人：郭晶;王小武;王娜;张月桥;郝少强;赵明礼;郭春明;许晓椿 -专利权人：天津力牧生物科技有限公司
申请日： 2020-04-01 - 公布日： 2022-06-03 - 主分类号： C12N5/075 文献下载
摘要：本发明涉及改进牛卵母细胞体外成熟的方法，具体地说，本发明涉及的牛卵母细胞体外成熟的方法包括如下步骤：(1)提供卵母细胞；(2)卵母细胞的体外成熟：使所述卵母细胞移入成熟培养液滴中，进行体外成熟培养，培养条件为100％湿度、38.5℃、5％CO2，体外成熟培养22～24h。所述成熟培养液包含：ECS、NaHCO3、EGCG、Hepe、雌二醇、BFF、黄体生成素、半胱氨酸、FSH(卵泡刺激素)、TCM‑199。本发明方法可以有效进发进牛卵母细胞体外成熟的性能。
改进牛卵母细胞体外成熟方法

[发明专利]含有成熟脂肪细胞的组合物的制造方法-CN202180031449.2在审
发明人：矢永博子;矢永茄津 -专利权人：医疗法人矢永诊所
申请日： 2021-01-14 - 公布日： 2022-12-16 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明的课题是提供一种血管再生能力高且引发炎症的可能性低的含有成熟脂肪细胞的组合物。本发明的解决手段是一种含有成熟脂肪细胞的组合物的制造方法，其包含：切割过滤工序，其将未进行酶处理的脂肪组织进行切割过滤，而获得微小脂肪；微小脂肪培养工序，其在切割过滤工序后，使用培养用培养基培养微小脂肪，而获得成熟脂肪细胞；以及含有成熟脂肪细胞的组合物取得工序，其获得含有成熟脂肪细胞的组合物，所述含有成熟脂肪细胞的组合物包含成熟脂肪细胞及经过微小脂肪培养工序所得到的条件培养基，并且，培养用培养基为包含自体血清的培养基，或为包含FBS、氢化可的松及FGF‑2的培养基。
含有成熟脂肪细胞组合制造方法

[发明专利]一种未成熟树突状细胞培养液及其未成熟树突状细胞的制备方法-CN201910504193.7有效
发明人：杨罕闻 -专利权人：蓝莲（杭州）生物科技有限公司
申请日： 2019-06-12 - 公布日： 2021-02-12 - 主分类号： C12N5/0784 文献下载
摘要：一种未成熟树突状细胞培养液及其未成熟树突状细胞的制备方法，属于细胞培养技术领域。细胞制备包括以下步骤：1)将血浆处理后收集白细胞；2)准备DC培养瓶，进行PBMCs培养；3)培养后，向瓶中加入DC培养液，培养3天；4)收获DC细胞。上述一种未成熟树突状细胞培养液及其未成熟树突状细胞的制备方法，其细胞培养液加入IL‑13白细胞介素，可诱导单核细胞分化，增强其MHCⅡ类分子的表达；加入抗CD83抗体，可以有效提高未成熟DC细胞的纯度；DC细胞收获时使用EDTA，解除细胞贴壁状态，提高细胞存活率；使用该方法DC细胞培养成熟时间快，只用3天即可成熟，且细胞数量以及纯度高。
一种未成熟树突细胞培养液及其制备方法

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