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[发明专利]表达因子IX的慢病毒载体的用途-CN201980090827.7在审
发明人：刘彤瑶;S·帕塔罗育-怀特;D·德尔格;A·康托尔;L·纳迪尼 -专利权人：比奥维拉迪维治疗股份有限公司
申请日： 2019-12-05 - 公布日： 2021-09-14 - 主分类号： C12N15/86 文献下载
摘要：本公开文本提供了包含编码具有因子IX(FIX)活性的多肽的核酸序列的慢病毒载体及使用此类慢病毒载体的方法。本文公开的靶向肝的慢病毒载体可以用于基因疗法，其中所述慢病毒基因递送使得能够将转基因表达盒稳定整合到儿科(例如，新生儿)或成年受试者的所靶向细胞(例如，肝细胞)的基因组中，从而实现在低慢病毒载体剂量下FIX表达的改善。本公开文本还提供了治疗出血性障碍如血友病(例如，血友病B)的方法，所述方法包括向有需要的受试者以低剂量给予靶向肝的慢病毒载体，所述慢病毒载体包含编码具有FIX活性序列的多肽的核酸序列。
表达因子 ix 病毒载体用途

[发明专利]一种针对悬浮细胞的慢病毒载体及其应用-CN202110737586.X有效
发明人：黄河清涛;王德鹏;胡清云;刘彩云;许澎 -专利权人：湖南丰晖生物科技有限公司
申请日： 2021-06-30 - 公布日： 2023-05-12 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种针对悬浮细胞的慢病毒载体及其应用，属于生物技术领域。本发明中的慢病毒载体是以pLVX‑EGFP‑IRES‑Puro为框架，插入了Ubi启动子和Cbh启动子。该慢病毒载体普遍适用于悬浮细胞的表达，表达效率高效、稳定，能够极大程度地提升悬浮细胞中的过表达效果，且表达过程简单易行，易于推广。
一种针对悬浮细胞病毒载体及其应用

[发明专利]一种金属硫蛋白基因慢病毒表达载体的构建方法-CN202310428226.0在审
发明人：崔大祥;崔明青;周园园 -专利权人：国纳之星（上海）纳米科技发展有限公司;上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司
申请日： 2023-04-20 - 公布日： 2023-06-30 - 主分类号： C12N15/64 文献下载
摘要：本发明属于生物化学技术领域，涉及一种金属硫蛋白基因慢病毒表达载体的构建方法。所述的构建方法包括以下步骤：S1，获得含有编码金属硫蛋白的基因片段，含有Mlu1和Nde1的酶切位点；S2，获得慢病毒表达载体；S3，将步骤S1获得的含有编码金属硫蛋白的基因片段的质粒插入至步骤S2获得的慢病毒表达载体，使该载体表达金属硫蛋白；S4，获得金属硫蛋白基因的慢病毒表达载体。本发明克服了传统金属硫蛋白制备方法产量低、污染高的缺点，有效促进金属硫蛋白的表达并提高表达量，为金属硫蛋白的生产提供了新技术。
一种金属蛋白基因病毒表达载体构建方法

[发明专利]递送外源RNP的慢病毒载体及其制备方法-CN201910979334.0有效
发明人：蔡宇伽;凌思凯 -专利权人：上海本导基因技术有限公司
申请日： 2019-10-15 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种递送外源RNP的慢病毒载体及其制备方法；通过将含有慢病毒载体基因组序列的质粒转染入病毒生产细胞，制备而得；所述基因组序列分别位于表达膜蛋白的质粒、表达含RNA结合蛋白的慢病毒GagPol长链蛋白的质粒、表达慢病毒GagPol长链蛋白的质粒、表达形成RNP所需蛋白质的质粒和表达含RNA结合蛋白所识别的RNA茎环结构的外源目的RNA的质粒上。在包装含RNP的慢病毒颗粒的过程中，补充慢病毒GagPol长链蛋白，减少了改造后的慢病毒GagPol长链蛋白所包含的外源RNA结合蛋白对病毒颗粒正常形态的负面影响，保证了慢病毒颗粒外壳的完整性和细胞感染活性的稳定性
递送 rnp 病毒载体及其制备方法

[发明专利]一个表达乳头瘤病毒HPV16的E6和E7自剪切慢病毒载体-CN201711060943.3在审
发明人：刘宽灿;田黎明;肖章武;林宝顺;谢富安;洪笑迁;高安定;张蕊 -专利权人：中国人民解放军南京军区福州总医院
申请日： 2017-11-02 - 公布日： 2018-03-09 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种表达HPV16的E6蛋白和E7蛋白的自剪切慢病毒载体及其制备与应用，本发明构建的慢病毒载体系统能协同表达自剪切的HPV16病毒E6蛋白和E7蛋白以及绿色荧光蛋白，驱动HPV16病毒E6基因和E7基因在细胞中高效表达，荧光蛋白的表达可对所表达的HPV16病毒E6蛋白和E7蛋白进行准确定位，同时，荧光蛋白的表达还可用于准确监测慢病毒包装效果。本发明构建的慢病毒载体系统表达的HPV16病毒E6蛋白和E7蛋白可以在细胞内发生自剪切，不影响其蛋白的功能，可用于HPV16病毒关键蛋白致癌发生的分子机制研究。
一个表达乳头病毒 hpv16 e6 e7 剪切载体

[发明专利]靶向GRP78基因RNA干扰重组慢病毒载体及其构建方法-CN201610254023.4在审
发明人：郭佳;蒋明;于丽华;蒋韵;徐月 -专利权人：同济大学苏州研究院
申请日： 2016-04-23 - 公布日： 2016-09-14 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明涉及靶向GRP78基因RNA干扰重组慢病毒载体的构建、筛选及其用途。本发明利用RNA干扰技术，针对GRP78基因的不同靶序列，构建了四个能在293细胞中表达siRNA的慢病毒真核表达载体，干扰慢病毒是由pLv‑GRP78shRNA、pMD2.G和pSPAX2载体共转染293T本发明靶向GRP78基因RNA干扰重组慢病毒载体能高效特异性的抑制GRP78基因表达，可用于制备治肿瘤相关性基因药物。
靶向 grp78 基因 rna 干扰重组病毒载体及其构建方法

[发明专利]慢病毒载体在制备治疗β-地中海贫血药物中的应用-CN202210373730.0有效
发明人：董文吉;张艳君;刘子瑾;董祖伊;赵忠亮;程谟斌 -专利权人：中吉智药（南京）生物技术有限公司
申请日： 2022-04-11 - 公布日： 2022-08-12 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了慢病毒载体在制备治疗β‑地中海贫血药物中的应用，所述慢病毒载体由pCCL‑SIN‑cPPT‑MCS‑RbPA骨架、A调控序列、B启动子序列、C增强子序列和D基因序列构成。本发明慢病毒可增强基因的特异性表达，降低载体大小从而提高病毒包装效率，降低病毒载体对受试细胞潜在致癌风险，将慢病毒载体感染β‑地中海贫血患者造血干细胞（CD34+细胞），用高效液相色谱定量含有第87位氨基酸突变的外源β珠蛋白（HbβA‑T87Q）表达水平，可与内源基因表达的或输血来源的野生型β‑珠蛋白区分开，观察到HbβA‑T87Q高表达。
病毒载体制备治疗地中海贫血药物中的应用

[发明专利]绵羊Noggin基因的克隆和慢病毒表达载体的构建-CN201010580022.1有效
发明人：刘明军;贺三刚;李文蓉;张雪梅;张宁 -专利权人：新疆维吾尔自治区畜牧科学院中国-澳大利亚绵羊育种研究中心
申请日： 2010-12-09 - 公布日： 2011-09-14 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明的绵羊Noggin基因的克隆和慢病毒表达载体的构建，确定绵羊Noggin基因编码区的全序列；设计克隆Noggin基因全长cDNA的PCR引物，上游引物N1：ATAGGATCCGGAGGCATGGAGCGCTGCCCCAG，下游引物N2：CGACTCGAGCTAGCACGAGCACTTGCACTC；其引物酶切位点外侧含有保护碱基ATA和CGA；将目的基因克隆于pET41a原核表达载体中，获得pET41a-Noggin重组载体；设计将目的基因定向克隆与慢病毒表达载体的引物：上游引物P1：ATAGGATCCGGAGGCATGGAGCGCTGCCCCAG，下游引物P2：CGACTCGAGCTAAGCGTAGTCTGGGACGTCGTATGGGTAGCACGAGCACTTGCACTC(包含HA抗体标签)；将目的基因定向克隆于pLEX慢病毒载体中，获得Noggin基因慢病毒载体，生产重组病毒，生产转Noggin基因绵羊；通过PCR方法鉴定其转基因羊。
绵羊 noggin 基因克隆病毒表达载体构建

[发明专利]一种慢病毒载体、重组慢病毒质粒、病毒及病毒的应用-CN201710031407.4在审
发明人：徐明;姜斌;袁海花;刘峰;龚玉芳 -专利权人：上海交通大学医学院附属第九人民医院
申请日： 2017-01-17 - 公布日： 2017-08-18 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明涉及细胞免疫治疗领域，具体公开了一种慢病毒载体、重组慢病毒质粒、病毒及病毒的应用。本发明在常规慢病毒载体pGreenPuro shRNA基础上，选择性插入EF1a启动子元件，获得pGreenPuro‑Dual质粒，进而获得一种表达CD19‑CAR协同沉默PD‑1的重组慢病毒载体。通过慢病毒包装程序获得表达CD19‑CAR‑plus‑shPD‑1的重组慢病毒，能够体外感染目的细胞并有效表达CD19‑CAR以及抑制PD‑1基因的表达。
一种病毒载体重组质粒应用

[发明专利]一种运用绝缘子组合构建的慢病毒多启动子稳定表达载体及构建方法-CN201910773560.3有效
发明人：孙逸武;卢绪章;王芳;周民 -专利权人：常州市第二人民医院
申请日： 2019-08-21 - 公布日： 2021-12-10 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明涉及一种运用绝缘子组合构建的慢病毒多启动子稳定表达载体及构建方法，属于生物医学工程技术领域。其将绝缘子IS22·3和绝缘子IS2整合入慢病毒载体；所述IS22·3的序列如SEQ ID No.1所示；所述绝缘子IS2的序列如SEQ ID No.2所示。所述慢病毒载体为用于RNA干扰实验的慢病毒载体。本发明针对现有慢病毒载体功能方面的某些空白，将绝缘子IS22·3和IS2整合入慢病毒载体，一方面可以隔离启动子间的相互干扰，另一方面可以防止基因沉默。这样既可以实现多基因表达又可以保障其表达的稳定性。
一种运用绝缘子组合构建病毒启动子稳定表达载体方法

[发明专利]用于艾滋病基因治疗的携带多靶点RNAi的慢病毒制备及应用-CN201110182785.5无效
发明人：朱焕章;周鑫;曲喜英;王鹏飞 -专利权人：复旦大学
申请日： 2011-06-30 - 公布日： 2013-01-02 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明属于医药及基因工程领域，涉及一种携带与HIV病毒生活周期相关基因的多靶点RNAi的慢病毒及其制备方法和应用。本发明提供了一种携带了特定RNAi核苷酸片段的重组慢病毒表达载体FattbC31UGWshRNA表达载体，是在FattbC31UGW载体中加入对重组慢病毒外壳内包囊携带的特定RNAi核苷酸片段进行转录表达调控元件构成本发明还提供了在此基础上构建的重组慢病毒载体系统及其制备方法和应用。本发明的慢病毒制备系统针对多个HIV-1靶标结合进行RNAi，可以使特定的目标基因表达量降低甚至不表达。
用于艾滋病基因治疗携带多靶点 rnai 病毒制备应用

[发明专利]用于COVID-19药物筛选的慢病毒表达载体及其构建方法-CN202010700324.1在审
发明人：林彬;林泽斌;林先明;吴志明;王萍;孔维维;麦锦连;周丽诗 -专利权人：广东源心再生医学有限公司
申请日： 2020-07-17 - 公布日： 2020-10-20 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于COVID‑19药物筛选的慢病毒表达载体的构建方法，其是以pCW‑Cas9‑Blast为骨架载体，将nCoVN cDNA亚克隆到所述骨架载体中，构成新型冠状病毒核衣壳蛋白的慢病毒表达载体本发明所构建的用于COVID‑19药物筛选的慢病毒表达载体对实验环境要求低，常规实验室即可操作，可高通量操作，仅需2天即可构建载体并大量获得。
用于 covid 19 药物筛选病毒表达载体及其构建方法

[发明专利]用于神经母瘤基因治疗的慢病毒及其制备方法和应用-CN202310432854.6在审
发明人：王飞飞 -专利权人：上海懿贝瑞生物医药科技有限公司
申请日： 2023-04-20 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明涉及IPC分类号C12N15/86下的病毒载体领域，具体涉及一种用于神经母瘤基因治疗的慢病毒及其制备方法和应用。本发明选择在神经母瘤细胞中活跃表达的ENPP6基因作为作用靶点，设计出针对ENPP6进行RNA干扰的RNAi‑11100、RNAi‑11101、RNAi‑11102靶序列，与慢病毒载体质粒BR‑V108相连接构建BR‑V108重组慢病毒载体，并包装成含有该重组慢病毒载体的慢病毒，含有BR‑V108重组慢病毒载体的慢病毒能够有效敲减ENPP6基因的转录和表达，并显著抑制神经母细胞瘤细胞的增殖和迁移，对神经母细胞瘤的基因治疗有重要的临床意义
用于神经基因治疗病毒及其制备方法应用

[发明专利]一种慢病毒载体及其介导的分泌脑源性神经营养因子的骨髓间充质干细胞系的制备方法-CN201110026535.2无效
发明人：张琰;李筱荣;王飞;孙国玲 -专利权人：天津医科大学眼科中心
申请日： 2011-01-25 - 公布日： 2011-09-07 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种慢病毒载体及其介导的分泌脑源性神经营养因子(BDNF)的骨髓间充质干细胞系的制备方法，包括以下步骤：(1)慢病毒表达载体的构建：利用PCR的方法，扩增人BDNF的cDNA序列，扩增后的人BDNF克隆入慢病毒表达载体，重组慢病毒表达载体命名为lenti-BDNF；(2)用优化参数的磷酸钙转染法包装慢病毒，并用超速离心法浓缩病毒颗粒，测定包装病毒的滴度；(3)用包装后的慢病毒颗粒，用逆转染法转导人骨髓间充质干细胞本发明通过优化转染前细胞密度，2X转染缓冲液的pH值，转染后换液时间，以及CaCl2浓度，摸索出高效、低成本磷酸钙转染并包装病毒的方法。转导后的人骨髓间充质干细胞可以高效、持续分泌BDNF。
一种病毒载体及其分泌脑源性神经营养因子骨髓间充质干细胞系制备方法

[发明专利]一种安全性慢病毒载体及其应用-CN201110385219.4有效
发明人：曾溢滔;方彧聃;张敬之 -专利权人：上海市儿童医院
申请日： 2011-11-25 - 公布日： 2012-05-09 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种安全性慢病毒载体及其应用。本慢病毒载体携带了整合酶Cre基因表达盒，并且在3’LTR的U3区含有LoxP位点序列，在U3区中并在LoxP位点的下游含有用于导入外源基因的限制性酶切位点。本慢病毒载体介导基因转移，所产生的假病毒在整合后发生“自杀效应”，将大部分慢病毒基本骨架删除，消除了发生重组相适应性病毒(LCV)存在的可能性。并且本发明的慢病毒载体通读率降低，进一步提高了安全性。本安全性慢病毒载体可以应用于基因克隆或表达，特别是在基因治疗，由本发明的慢病毒载体介导转基因具有更高的安全性。
一种安全性病毒载体及其应用