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[发明专利]一种细胞外囊泡主动载药方法-CN202010518740.X有效
发明人：陈超翔;孙梦迪;林俊杰;林晓洁;李玉梅 -专利权人：集美大学
申请日： 2020-06-09 - 公布日： 2022-11-18 - 主分类号： A61K47/46 文献下载
摘要：本发明涉及一种细胞外囊泡主动载药方法，其包括以下步骤：细胞外囊泡用硫酸铵溶液重悬后进行低频探头超声处理，并于4℃孵育1h；将孵育后的细胞外囊泡通过聚碳酸酯膜多次挤出处理，再用PBS透析过夜以建立硫酸铵梯度；将透析过夜后的细胞外囊泡与药物孵育，以便获得载药细胞外囊泡。根据本发明实施例，该方法基于低频探头超声和聚碳酸酯膜挤出的细胞外囊泡主动载药方法能有效地提高细胞外囊泡的载药率和药物稳定性，且应用范围广泛。
一种细胞外囊泡主动药方

[发明专利]一种分离组织特异来源细胞外囊泡的方法及其试剂盒-CN201911330494.9有效
发明人：渠香云;董肇楠;贾云莉;马雪情;李若晨;蒋晓旭;王弢 -专利权人：江苏为真生物医药技术股份有限公司
申请日： 2019-12-20 - 公布日： 2022-06-28 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本申请提供了一种分离组织特异来源细胞外囊泡的方法及其试剂盒。具体而言，提供了一种从生物体液中分离甲状腺转录因子1阳性的细胞外囊泡，尤其是外泌体的方法，包括任选地通过物理方法分离总细胞外囊泡，并任选地通过结合剂去除红细胞和/或白细胞源细胞外囊泡，并用结合甲状腺转录因子1的结合剂正向捕获目标细胞外囊泡或外泌体的步骤。本申请还提供了结合甲状腺转录因子1的结合剂用于制备细胞外囊泡或外泌体分离或检测试剂的用途，以及一种从生物体液中分离甲状腺转录因子阳性的细胞外囊泡或外泌体的试剂盒。
一种分离组织特异来源细胞外囊泡方法及其试剂盒

[发明专利]利用体外冲击波的向细胞外囊泡内靶物质传递方法-CN201880036643.8在审
发明人：权起焕;郑智化;金暻花 -专利权人：艾科索伦斯生物科技
申请日： 2018-05-30 - 公布日： 2020-03-06 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明涉及包括将靶物质及细胞外囊泡暴露在体外冲击波的步骤的向细胞外囊泡内传递靶物质的方法、导入靶物质的细胞外囊泡的制备方法、通过上述方法制备的细胞外囊泡、包含上述细胞外囊泡的药物载体以及向细胞内传递靶物质的方法在本发明的方法中，不仅在细胞外将包括动物细胞、植物细胞、病菌及真核细菌的微生物等来源于自然界生物的细胞外囊泡暴露在体外冲击波，还在细胞外将人为制备的细胞外囊泡暴露在体外冲击波，可使用强力的能量强度的体外冲击波，可有效地向体外囊泡内传递靶物质，并且，若以体外冲击波进行处理，则导入靶物质的上述细胞外囊泡向目的细胞的掺入能力也增加，通过本发明的方法能够以高效率向细胞内传递靶物质，从而可利用于各种领域。
利用体外冲击波细胞外囊泡内靶物质传递方法

[发明专利]衔接多肽及其使用方法-CN202180068299.2在审
发明人：李利;江季霖;马一帆 -专利权人：俄亥俄州国家创新基金会;鉴识生物系统有限公司
申请日： 2021-08-04 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： A61K39/395 文献下载
摘要：本文描述了胞外囊泡的组合物，以及产生胞外囊泡的方法和系统。本文还描述了使用胞外囊泡的方法。
衔接多肽及其使用方法

[发明专利]细胞外囊泡的分离方法、以及检测细胞外囊泡表面标志物的方法和试剂盒-CN201910033097.9在审
发明人：周明;范松;李劲松 -专利权人：周明;马英淙;范松;李劲松
申请日： 2019-01-14 - 公布日： 2019-04-05 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明提供了一种细胞外囊泡的分离方法、以及检测细胞外囊泡表面标志物的方法和试剂盒，该分离方法包括：将预处理后的生物样品与磷脂酰丝氨酸捕获分子‑亲和标签融合蛋白混合孵育后，再加入固相载体，形成载体‑细胞外囊泡复合物；再将载体‑细胞外囊泡复合物从生物样品中分离。该检测方法包括：将上述所得的载体‑细胞外囊泡复合物与标志物抗体混合孵育，得到载体‑细胞外囊泡‑荧光素酶复合物；裂解载体‑细胞外囊泡‑荧光素酶复合物，进行发光检测。该方法对细胞外囊泡的分离效率高、特异性强，且检测时的灵敏度高。此外，通过选择不同底物或不同波长的荧光素酶，实现两种及以上标志物的同时检测。
外囊细胞复合物检测荧光素酶复合物表面标志物混合孵育生物样品标志物试剂盒磷脂酰丝氨酸预处理捕获分子发光检测分离效率固相载体亲和标签融合蛋白特异性强荧光素酶灵敏度波长底物抗体裂解

[发明专利]一种细胞外囊泡载药系统及其制备方法和应用-CN202310104849.2在审
发明人：徐军发;皮江;黄依凡;黄焕绍 -专利权人：东莞市东南部中心医院
申请日： 2023-02-09 - 公布日： 2023-05-26 - 主分类号： A61K9/50 文献下载
摘要：本发明涉及生物医学技术领域，具体涉及一种细胞外囊泡载药系统及其制备方法和应用。所述细胞外囊泡载药系统包括细胞外囊泡以及负载于细胞外囊泡内的CircRNA和抗结核药物。本发明以细胞外囊泡作为CircRNA和抗结核药物的共载体，高效装载抗结核免疫调控功能CircRNA和抗结核药物，再通过对细胞外囊泡进行表面靶向修饰能够进一步增强该细胞外囊泡载药系统的靶向性。该细胞外囊泡载药系统通过结合CircRNA的抗结核免疫调控功能和抗结核药物的结核分歧杆菌抑制作用，更加有效杀伤和清除宿主细胞内的结核分歧杆菌，从而有望为安全高效的抗结核药物开发提供新策略。
一种细胞外囊泡载药系统及其制备方法应用

[发明专利]一种刺五加细胞外囊泡的提取方法-CN202311001129.X在审
发明人：刘旭杰;叶慧玲;何燕;唐钧泽;曾耀勋;袁炯鹏;叶钊仪;李玉姗 -专利权人：广东工业大学
申请日： 2023-08-09 - 公布日： 2023-09-15 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种刺五加细胞外囊泡的提取方法，属于细胞外囊泡提取技术领域；其提取方法包括以下步骤：1)将刺五加整株搅拌，收集汁液，进行三步低速离心后取上清；2)上清经过两级微孔滤膜抽滤，获得抽滤后的滤液，加入8％的PEG8000，过夜后离心取沉淀即可得到粗提的细胞外囊泡；3)使用蔗糖梯度离心结合超速离心纯化细胞外囊泡；本发明提供的技术方案使用PEG8000聚合物沉淀法初步提取刺五加细胞外囊泡，操作简便，重现性强；在加入PEG8000沉淀细胞外囊泡前，采用两级微孔滤膜过滤，尽可能保证细胞外囊泡的提取纯度；适合大规模提取刺五加细胞外囊泡。
一种刺五加细胞外囊泡提取方法

[发明专利]一种磁靶向、装载肝细胞响应型mRNA的工程化细胞外囊泡及其构建方法和应用-CN202310876496.8在审
发明人：袁丽君;张亮;王辰;卜特;李者龙;孙汶齐;刘佳涵;王兰天;张彬 -专利权人：中国人民解放军空军军医大学
申请日： 2023-07-17 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： A61K9/50 文献下载
摘要：本发明提供了一种磁靶向、装载肝细胞响应型mRNA的工程化细胞外囊泡及其构建方法和应用，属于生物医药技术领域。一种工程化细胞外囊泡，包括基因工程改造的细胞外囊泡，细胞外囊泡表面偶联有转铁蛋白修饰的超顺磁性氧化铁纳米粒子和加载有促凋亡蛋白BAX的激动剂；细胞外囊泡膜上表达PTGFRN(Δ687)‑MCP融合蛋白，MCPRNA结合蛋白提高细胞外囊泡对含有miR‑122识别位点的iBaxmRNA的装载量；促凋亡蛋白BAX的激动剂嵌入细胞外囊泡的磷脂双分子层。本发明的工程化细胞外囊泡制备方法简单，有主动脉斑块磁靶向性、高效核酸药物装载、副作用低等优点，为动脉粥样硬化及其它年龄相关疾病的治疗提供参考。
一种靶向装载肝细胞响应 mrna 工程细胞外囊泡及其构建方法应用

[发明专利]包含基于靶向亲和域的膜蛋白的胞外囊泡-CN201980037533.8在审
发明人： J·N·伦纳德;D·M·斯特拉福德 -专利权人：西北大学
申请日： 2019-04-10 - 公布日： 2021-01-12 - 主分类号： A61K9/127 文献下载
摘要：公开了包含改造的靶向蛋白的胞外囊泡，其用于将胞外囊泡靶向到靶细胞。所述靶向蛋白是融合蛋白，所述融合蛋白包含(i)亲和剂，诸如抗体的单链可变片段(scFv)，所述亲和剂在所述胞外囊泡的表面上被表达和(ii)跨膜域，并且可以包含另外的结构域。示例性胞外囊泡可以包含但不限于外泌体或微囊泡。
包含基于靶向亲和膜蛋白胞外囊泡

[发明专利]一种用于提取细胞外囊泡或外泌体的培养基及其应用-CN202211403086.3在审
发明人：樊星亮 -专利权人：广东第二师范学院
申请日： 2022-11-10 - 公布日： 2023-01-31 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于提取细胞外囊泡或外泌体的培养基及其应用。所述用于提取细胞外囊泡或外泌体的培养基可支持包括干细胞在内的各种原代细胞和细胞系的生存，并可以促进细胞分泌细胞外囊泡或外泌体；其不含血清或蛋白质，并去除了以往培养基中所使用的动物成分及植物蛋白水解物，所有组分化学成分确定，有利于细胞外囊泡或外泌体的纯化、生产批次的稳定性，从而保证和提高了细胞外囊泡或外泌体质量；其应用于在体外培养和提取细胞外囊泡或外泌体可提高细胞外囊泡或外泌体密度并提高产量，降低整体生产成本。
一种用于提取细胞外囊泡外泌体培养基及其应用

[发明专利]抗炎剂及具有抗炎作用的细胞外囊泡的制造方法-CN202180009496.7在审
发明人：石止贵将;山根昌之 -专利权人：富士胶片株式会社
申请日： 2021-01-14 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： A61K35/545 文献下载
摘要：本发明的课题在于提供一种由治疗效果高的细胞外囊泡的群体构成的治疗用制剂、尤其抗炎剂。本发明涉及一种抗炎剂以及具有抗炎作用的细胞外囊泡的制造方法，所述抗炎剂将通过利用对磷脂酰丝氨酸具有亲和性的物质的方法从来源于间充质干细胞的细胞外囊泡获得的细胞外囊泡作为有效成分，所述具有抗炎作用的细胞外囊泡的制造方法包括通过使用对磷脂酰丝氨酸具有亲和性的物质的方法从间充质干细胞来源的细胞外囊泡获得细胞外囊泡的工序
抗炎剂具有作用细胞外囊泡制造方法

[发明专利]一种用于预防和治疗高原肺水肿的间充质干细胞杂化胞外囊泡的制备方法-CN202210149946.9在审
发明人：姜力群;印晓星;许亚;魏相荣;司苏佳 -专利权人：徐州医科大学
申请日： 2022-02-18 - 公布日： 2022-05-06 - 主分类号： A61K35/28 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于预防和治疗高原肺水肿的间充质干细胞杂化胞外囊泡的制备方法，包括提取间充质干细胞可溶性因子与胞外囊泡混合物，分离可溶性因子与胞外囊泡；浓缩可溶性因子；制备包载可溶性因子的脂质体；将包载间可溶性因子的脂质体与天然胞外囊泡进行膜融合，得到杂化胞外囊泡。本发明研究发现杂化囊泡保留了天然囊泡表面的特征抗原，并且同体积培养基中得到的蛋白和核酸量为天然囊泡的100倍左右，显著提高了对间充质干细胞分泌的活性组分的利用效率，部分解决了天然囊泡产率低、成产成本高的问题同时，杂化囊泡具有与天然囊泡相似的高原肺水肿干预效果，可用于预防和治疗其发生发展，具有良好的临床应用价值。
一种用于预防治疗高原肺水肿间充质干细胞杂化胞外囊泡制备方法

[发明专利]一种循环细胞外囊泡原位标记和快速分离方法-CN202110806558.9在审
发明人：陈刚;余自力;刘海明;吴敏;赵怡芳 -专利权人：武汉大学
申请日： 2021-07-16 - 公布日： 2021-11-02 - 主分类号： C12N5/078 文献下载
摘要：本发明公开了一种循环细胞外囊泡原位标记和快速分离方法，将磷脂聚乙二醇或其衍生物修饰的物质注射到受试者的血液循环系统，磷脂聚乙二醇或其衍生物修饰的物质在游离状态下自行组装至循环细胞外囊泡的细胞膜磷脂双分子层上该标记方法可应用在循环细胞外囊泡代谢动力学监测和从活体中快速分离出循环细胞外囊泡等方面，将有助于循环细胞外囊泡的基础研究和临床应用。与现有的标记方法相比，本发明无需提前将循环细胞外囊泡从外周血中分离出来，可有效避免超速离心等方法对循环细胞外囊泡结构的破坏，最大限度地保持循环细胞外囊泡自身的理化性能，该方法具有普适性，适用于标记和快速分离多种动物、细胞来源的循环细胞外囊泡。
一种循环细胞外囊泡原位标记快速分离方法

[发明专利]一种基于金属离子络合剂的细胞外囊泡的分离方法-CN201811543314.0在审
发明人：贺川江 -专利权人：贺川江
申请日： 2018-12-17 - 公布日： 2019-04-05 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于金属离子络合剂的细胞外囊泡的分离方法，利用锚定分子‑金属离子络合剂分子复合物与含有细胞外囊泡的待分离液体共孵育，将所述的分子复合物锚定到细胞外囊泡上；再利用分选颗粒或金属离子的盐颗粒与连结有分子复合物的细胞外囊泡混合，孵育使细胞外囊泡与分选颗粒(盐颗粒)连结在一起；分离、重悬分离产物，加入洗脱剂使细胞外囊泡与分选颗粒(盐颗粒)分离；分离出分选颗粒(盐颗粒)，剩余溶液中即为分离得到的细胞外囊泡。本发明可以实现细胞外囊泡的高效分离；对设备无特殊要求，成本低廉；适用范围广，分离得到的外泌体纯度高，分离步骤中加入的试剂不影响后续的分析或应用。
外囊细胞盐颗粒分选金属离子络合剂分子复合物连结分离步骤分离产物分离液体高效分离金属离子锚定分子剩余溶液对设备共孵育洗脱剂再利用孵育锚定重悬应用分析

[发明专利]一种提高细胞外囊泡产量、治疗活性的生产方法-CN202310818449.8在审
发明人：陈刚;李晔;陈吟雪;吴敏;夏厚福;余自力 -专利权人：武汉大学;珈泌生物科技（武汉）有限责任公司
申请日： 2023-07-05 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高细胞外囊泡产量、治疗活性的生产方法，该生产方法包括以下步骤：将能产生目标细胞外囊泡的细胞置于含表皮生长因子(EGF)、肿瘤坏死因子(TNF‑α)的细胞培养基中培养，提供低氧刺激条件，收集细胞培养上清，获得目标细胞外囊泡。本发明采用EGF、TNF‑α和诱导细胞缺氧的三重刺激，能够通过同时促进干细胞增殖和促进干细胞分泌细胞外囊泡，从而提高细胞外囊泡的产量；并且，增产的细胞外囊泡具有增强的组织损伤治疗功能。
一种提高细胞外囊泡产量治疗活性生产方法