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[发明专利]一种固定化酶膜、制备方法以及在制备稀少糖中的应用-CN202211172066.X在审
发明人：孙世鹏;洪兰;刘美玲;朱玥明;孙媛霞;石婷;蒋尚昆;邢卫红 -专利权人：南京工业大学;中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2022-10-25 - 公布日： 2023-03-24 - 主分类号： C12N11/098 文献下载
摘要：本发明涉及一种固定化酶膜、制备方法以及在制备稀少糖中的应用，属于酶催化技术领域。本发明通过调控膜表面电荷后利用RDPE与TMC交联，制备了固定化酶膜，正电膜更有利于负电RDPE的负载，该固定化酶膜极大地提高了酶的稳定性并且实现了酶的重复利用和回收，在正渗透模式下测试了游离酶膜与固定化酶膜，固定化酶膜能够实现产物的原位分离，固定化酶膜能够打破反应平衡的限制。
一种固定化酶膜制备方法以及稀少中的应用

[发明专利]PVA膜固定化酶及其制备方法-CN202110490789.3在审
发明人：洪浩;詹姆斯·盖吉;肖毅;张娜;罗杰斯卡·维亚撒·威廉姆斯;崔瑜霞;赵佳东;高妍妍 -专利权人：凯莱英生命科学技术（天津）有限公司
申请日： 2020-07-16 - 公布日： 2021-09-03 - 主分类号： C12N11/084 文献下载
摘要：本发明提供了一种PVA膜固定化酶及其制备方法。该PVA膜固定化酶包括PVA多孔膜和包埋在PVA多孔膜上的酶，PVA多孔膜为三维结构化PVA多孔膜，酶选自转氨酶、D‑乳酸脱氢酶、环己酮单加氧酶、酮还原酶、烯还原酶、腈水解酶、氨裂解酶、氨基酸脱氢酶、亚胺还原酶、醇脱氢酶、甲酸铵脱氢酶、葡萄糖1‑脱氢酶及它们的突变体中的任意一种。采用三维结构化PVA多孔膜作为载体将酶以包埋的方式固定化，包埋固定化的流程简单、条件温和、比表面积大，酶被包埋固定化在PVA多孔膜中后比较稳定，不容易在使用过程中浸出；所采用的PVA多孔膜的多孔结构能够更好地传递反应物和产物，适用于连续流动生化催化中使用，对酶具有广适性。
pva 固定及其制备方法

[发明专利]PVA膜固定化酶及其制备方法-CN202010683476.5有效
发明人：洪浩;詹姆斯·盖吉;肖毅;张娜;罗杰斯卡·维亚撒·威廉姆斯;崔瑜霞;赵佳东;高妍妍 -专利权人：凯莱英生命科学技术（天津）有限公司
申请日： 2020-07-16 - 公布日： 2021-04-23 - 主分类号： C12N11/084 文献下载
摘要：本发明提供了一种PVA膜固定化酶及其制备方法。该PVA膜固定化酶包括PVA多孔膜和包埋在PVA多孔膜上的酶，PVA多孔膜为三维结构化PVA多孔膜，酶选自转氨酶、D‑乳酸脱氢酶、环己酮单加氧酶、酮还原酶、烯还原酶、腈水解酶、氨裂解酶、氨基酸脱氢酶、亚胺还原酶、醇脱氢酶、甲酸铵脱氢酶、葡萄糖1‑脱氢酶及它们的突变体中的任意一种。采用三维结构化PVA多孔膜作为载体将酶以包埋的方式固定化，包埋固定化的流程简单、条件温和、比表面积大，酶被包埋固定化在PVA多孔膜中后比较稳定，不容易在使用过程中浸出；所采用的PVA多孔膜的多孔结构能够更好地传递反应物和产物，适用于连续流动生化催化中使用，对酶具有广适性。
pva 固定及其制备方法

[发明专利]固定化酶膜的制备方法-CN201010300675.X无效
发明人：马永强;石彦国;杨春华;张毅方;刘颖 -专利权人：哈尔滨商业大学
申请日： 2010-01-25 - 公布日： 2010-07-21 - 主分类号： C12N11/08 文献下载
摘要：固定化酶膜的制备方法，它涉及一种固定化酶的制备方法。本发明解决了现有方法制作得到的固定化酶膜的酶蛋白承载量低以及催化活性低的问题。方法：一、制备甲基丙烯酸甲酯接枝膜；二、制备吸附有己二胺的甲基丙烯酸甲酯接枝膜；三、将吸附有己二胺的甲基丙烯酸甲酯接枝膜浸入到地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶溶液或转谷氨酰胺酶溶液中进行处理即得到固定化酶膜。本发明制作得到的固定化酶膜的酶蛋白承载量好，本发明制作得到的固定化酶膜的地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶的承载量大于35mg/g膜，谷氨酰胺酶的承载量大于20mg/g膜。本发明方法制作得到的固定化酶膜的吸附能力、催化活性以及热稳定性好。
固定化酶膜制备方法

[发明专利]一种用醋酸纤维素/聚四氟乙烯复合膜固定化脂肪酶的方法-CN201110290420.4无效
发明人：于殿宇;胡立志;王立琦;江连洲;周晓丹;李越;张佳宁;时敏;陈晓慧;李志平;王雪;王妍;刘鑫;宋云花;周璇;张春艳 -专利权人：东北农业大学
申请日： 2011-09-20 - 公布日： 2012-01-04 - 主分类号： C12N11/12 文献下载
摘要：本发明提供一种以醋酸纤维素和聚四氟乙烯膜为材料制备了醋酸纤维素/聚四氟乙烯复合膜，采用吸附-交联相结合的固定化方法，用该复合膜来固定化脂肪酶。研究了温度、吸附时间、酶液浓度、交联时间和交联剂浓度等不同固定化条件对脂肪酶固定化效率和催化效果的影响，并对固定化酶膜的酶学性质进行了讨论。通过固定化酶膜的SEM图像进一步解释利用醋酸纤维素/聚四氟乙烯复合膜固定化脂肪酶的优势。根据本发明中复合膜的吸附特性固定化脂肪酶，提高了酶在反应体系中的活性和稳定性，调节和控制酶的活性与选择性，从而有利于酶的回收和产品的生产，最终得到的固定化酶活为17.2U/cm2，明显高于文献中单膜法固定化脂肪酶的活力
一种醋酸纤维素聚四氟乙烯复合固定脂肪酶方法

[发明专利]一种实现酶解反应与产物纯化同步的固定化酶纳米纤维膜及制备和应用-CN202011645220.1有效
发明人：叶勇;叶传珍;唐小月 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2020-12-31 - 公布日： 2023-09-26 - 主分类号： C12N11/14 文献下载
摘要：本发明属于固定化酶的技术领域，公开了一种实现酶解反应与产物纯化同步的固定化酶纳米纤维膜及制备和应用。方法：1)将酶与带有氨基的MOFs材料反应，获得固定化酶的NH2‑MOFs；所述酶为蛋白酶和/或淀粉酶；2)将固定化酶的NH2‑MOFs与高分子聚合物配成静电纺丝溶液；3)将静电纺丝溶液进行静电纺丝，获得固定化酶纳米纤维膜。本发明的纳米纤维膜具有稳定的固定化酶，酶活回收率高，多孔、强度高、操作简便高效等优点。本发明的纳米纤维膜在酶解反应时，酶解产物通过膜即实现了产物的分离纯化，因此酶解反应与产物纯化同步进行。本发明的固定化酶纳米纤维膜用于制备多肽和/或低聚糖。
一种实现反应产物纯化同步固定纳米纤维制备应用

[发明专利]一种用醋酸纤维素/聚丙烯复合膜固定化磷脂酶的方法-CN201110276701.4无效
发明人：于殿宇;杜晶;王立琦;梁单琼;王妍;王雪;李越;张佳宁;时敏;陈晓慧;李志平;奚会松;宋云花;周旋 -专利权人：东北农业大学
申请日： 2011-09-19 - 公布日： 2011-12-21 - 主分类号： C12N11/12 文献下载
摘要：本发明提供一种以醋酸纤维素和聚丙烯膜为材料制备了醋酸纤维素/聚丙烯复合膜，采用吸附-交联相结合的固定化方法，用该复合膜来固定化磷脂酶。研究了吸附时间、酶液浓度、交联剂浓度、交联时间和交联温度等不同固定化条件对磷脂酶固定化效率和催化效果的影响，并对固定化酶膜的酶学性质进行了讨论。通过固定化酶膜的SEM图像进一步解释利用醋酸纤维素/聚丙烯复合膜固定化磷脂酶的优势。根据本发明中复合膜的吸附特性固定化磷脂酶，提高了酶在反应体系中的活性和稳定性，调节和控制酶的活性与选择性，从而有利于酶的回收和产品的生产，最终得到的固定化酶活为4.6U/cm2。
一种醋酸纤维素聚丙烯复合固定磷脂酶方法

[发明专利]利用亲水/疏水复合膜中的微结构固定化脂肪酶的方法-CN200510126363.0有效
发明人：王玉军;徐坚;骆广生;戴猷元 -专利权人：清华大学
申请日： 2005-12-09 - 公布日： 2006-07-12 - 主分类号： C12N1/00 文献下载
摘要：一种利用亲水/疏水复合膜中的微结构固定化脂肪酶的方法，属于生物工程中的酶固定化领域。本发明先将亲水性膜材料醋酸纤维素溶解在二甲基甲酰胺中，制成亲水性膜液，再将疏水性聚四氟乙烯膜平铺在玻璃板上，将亲水性膜液刮涂在其表面，利用干－湿相转换法制备得到由致密亲水层和多孔疏水层组成的复合膜，并通过过滤的方法，利用其微结构实现脂肪酶的固定化。本发明与现有的脂肪酶膜固定化方法相比，具有以下优点：利用物理的方法实现了脂肪酶的固定化，方法简单，成本低；脂肪酶在固定化过程中活力损失小，制备得到的固定化脂肪酶膜活力及其活力回收率高；酶的负载量容易控制；固定化酶膜的使用稳定性较好；载体可以再生重复使用，降低了成本。
利用疏水复合中的微结构固定脂肪酶方法

[发明专利]一种固定化酶材料及其制备方法和应用-CN202111552631.0在审
发明人：王德强;黄哲伦;卡格罗·琳玛丽-瓦扎奈 -专利权人：安徽工业大学
申请日： 2021-12-17 - 公布日： 2022-03-22 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：本发明属于固定化酶技术领域，具体涉及一种固定化酶材料及其制备方法和应用，该固定化酶材料包括：脂肪酶载体；锚定在脂肪酶载体表面的膜骨架结构，所述膜骨架结构为多聚电解质纳米膜；以及固定在膜骨架结构上的脂肪酶本发明首先制备核壳式微球，并使得壳聚糖和聚丙烯酰胺形成了包封石蜡的纳米膜，而脂肪酶则在纳米膜包封下被固定于石蜡微球的核壳式结构中，通过这种方式既实现了酶的固定化，又避免了其他共价交联的方式带来的酶失活问题；制备的固定化酶材料其亲脂性高，有利于增强脂肪酶和地沟油的接触，而其表面的多聚电解质膜具有负载水膜能力，在油脂界面上保持脂肪酶不易脱落、流失、失活。
一种固定材料及其制备方法应用

[发明专利]一种固定化脂肪酶催化油脂水解的工艺-CN200910098113.9无效
发明人：徐志康;黄赋;万灵书;黄小军 -专利权人：浙江大学
申请日： 2009-04-30 - 公布日： 2009-09-23 - 主分类号： C12P7/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种固定化脂肪酶催化油脂水解的工艺，将固定化脂肪酶的选择性透水膜膜组件组装成固定化脂肪酶-选择性透水膜生物反应器，油脂走膜组件的管程，水则以反方向走膜组件的壳程，水透过膜提供酶促反应所需要的水分，同时固定化脂肪酶催化油脂水解。本发明的方法为脂肪酶催化油脂水解提供了必要的水分，同时在线抑制产物甘油在酶表面的吸附，从而有效提高了固定化脂肪酶催化效率。而且，反应器集酶催化过程和膜分离过程于一体，同步实现反应催化和产物分离，简化了生产工艺，提高生产效率。
一种固定脂肪酶催化油脂水解工艺

[实用新型]一种提高催化效率的膜式反应器-CN202020454132.2有效
发明人：曹庆华 -专利权人：江苏永达药业有限公司
申请日： 2020-03-31 - 公布日： 2021-02-19 - 主分类号： C12M1/40 文献下载
摘要：本实用新型涉及酶反应器技术领域，具体公开了一种提高催化效率的膜式反应器，包括箱体和固定化酶膜，所述箱体上端为敞口结构，所述箱体一侧设置有回流管，所述回流管的一端与所述箱体一侧靠近底部的位置相连通，所述回流管的另一端水平设置在所述箱体上方，所述回流管朝向所述箱体敞口的一侧均匀设置有出液口，所述回流管上设置有压力泵，所述固定化酶膜设置在所述箱体内，所述固定化酶膜呈向下凹的半球状，所述固定化酶膜上设置有多个突出，所述固定化酶膜上方设置有搅拌装置，所述搅拌装置用于搅拌反应物料，本实用新型不仅增大了固定化酶膜与反应物料的接触面积，提高反应物料与固定化酶膜的反应速度，而且反应更加成分，催化效率高。
一种提高催化效率反应器

[发明专利]由固定化脂肪酶－透水膜生物反应器制备生物柴油的方法-CN200810060314.5无效
发明人：万灵书;徐志康;刘振梅 -专利权人：浙江大学
申请日： 2008-04-03 - 公布日： 2008-09-03 - 主分类号： C10G3/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种采用选择性透水膜对脂肪酶主动提供必需水以保持酶活来制备生物柴油的方法。将固定化脂肪酶的选择性透水膜膜组件联入酶－膜生物反应器，油脂与低碳醇的混合物走膜组件的壳程，水则走膜组件的管程，水透过膜维持固定化脂肪酶的必需水，同时固定化脂肪酶催化油脂转化为生物柴油。由于本发明的方法能够主动维持固定化脂肪酶的必需水，同时在线抑制产物甘油在酶表面的吸附，从而有效提高了固定化脂肪酶的活性，可高效制备生物柴油。
固定脂肪酶透水生物反应器制备生物柴油方法

[发明专利]一种固定化酶膜层析纯化联用系统及其使用方法-CN202110995914.6在审
发明人：李笃信;王宝雷;周建芹;冯斌斌;宋伦;段翠翠 -专利权人：浙江肽达生物科技开发有限公司
申请日： 2021-08-27 - 公布日： 2021-11-09 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种固定化酶膜层析纯化联用系统及其使用方法，包括恒流输液泵、中空纤维柱、固定化酶、串联色谱柱、切换阀、检测器、收集器，按照以下步骤运行：1)酶的固定化：将胰蛋白酶固定到中空纤维内部，制成固定化酶膜；2)酶解：胶原蛋白在酶膜进行循环酶解，小分子肽透过膜，进入纯化系统；3)纯化：三柱串联连续纯化装置，依次切换进行上样和洗脱，实现蛋白肽的连续生产。本发明通过将固定化酶膜与连续色谱纯化系统联用，具有多个优点：1)蛋白酶解充分，原料利用率高；2)自动化程度高，多个操作步骤在线完成；3)产品污染少，回收率高的特点,在胶原蛋白肽、蚕丝蛋白肽等蛋白肽的生产中
一种固定化酶膜层析纯化联用系统及其使用方法

[发明专利]一种用醋酸纤维素/聚四氟乙烯复合膜固定化磷脂酶的方法-CN201110290429.5无效
发明人：江连洲;胡立志;于殿宇;王立琦;时敏;张佳宁;李越;王雪;李志平;陈晓慧;常云鹤;周晓丹;刘晶 -专利权人：东北农业大学
申请日： 2011-09-20 - 公布日： 2012-01-04 - 主分类号： C12N11/12 文献下载
摘要：本发明提供一种以醋酸纤维素和聚四氟乙烯膜为材料制备了醋酸纤维素/聚四氟乙烯复合膜，采用物理吸附固定化方法，用该复合膜来固定化磷脂酶。研究了酶液浓度、吸附时间、温度和搅拌速度等不同固定化条件对脂肪酶固定化效率和催化效果的影响，并采用响应面的分析方法。通过固定化酶膜的SEM图像进一步解释利用醋酸纤维素/聚四氟乙烯复合膜固定化磷脂酶的优势。根据本发明中复合膜的吸附特性固定化磷脂酶，提高了酶在反应体系中的活性和稳定性，调节和控制酶的活性与选择性，从而有利于酶的回收和产品的生产，最终得到的固定化酶活为4U/cm2，明显高于文献中单膜法固定化磷脂酶的活力
一种醋酸纤维素聚四氟乙烯复合固定磷脂酶方法

[发明专利]一种制备电纺纤维膜固定化漆酶的方法-CN200910180625.X无效
发明人：牛军峰;代云容;刘佳;殷立峰;沈珍瑶 -专利权人：北京师范大学
申请日： 2009-10-27 - 公布日： 2010-03-17 - 主分类号： C12N11/08 文献下载
摘要：本发明属于酶固定化领域，具体是涉及一种利用乳液静电纺丝技术制备电纺纤维膜固定化漆酶的方法。该方法是通过乳液电纺技术将漆酶原位包埋固定在电纺纤维中，其固定化漆酶的载体材料是具有良好生物相容性的聚乳酸—己内酯共聚物(P(LA/CL)，7/3，即合成时聚乳酸与聚己内酯用量比例为7∶3)。具体包括两个步骤：载酶电纺纤维膜的制备及对其进行交联固定。载酶电纺纤维膜的制备是先将聚合物溶液和漆酶溶液配制成均质的乳液，然后将乳液进行静电纺丝，几小时后可收获载酶电纺纤维膜。对载酶电纺纤维膜进行交联固定是将膜暴露于戊二醛饱和蒸气中交联后即得到电纺纤维膜固定化漆酶。本发明提供了一种新的简单高效的制备固定化漆酶的方法，该方法所得的固定化漆酶催化活性高、稳定性好，且制备成本低廉。
一种制备纤维固定化漆酶方法

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