本发明公开一组检测锥虫属原虫的特异性引物,其序列为:上游引物为:5’‑CCTGATGAAAGGTGCAATG(SEQ ID NO:1)或其互补序列;下游引物为:5’‑CGTTTTCGCCTTCTTGTGGA本发明还公开一种对锥虫属原虫进行特异性检测的方法,包括以下步骤:(1)提取目标样本的基因组DNA;(2)以步骤(1)中所提取的目标样本的基因组DNA作为模板,用本发明提供的特异性引物进行PCR扩增;(3本发明提供的检测锥虫属原虫的特异性引物及检测方法,能够快速准确的检测出目标样品中是否含有锥虫属原虫,该检测方法的属内通用性高,属间特异性强,可专门针对锥虫属原虫进行有效的检测。