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[发明专利]质粒纯化-CN200580005978.6无效
发明人： J·范阿尔斯泰恩;J·贝里斯特伦;D·林德斯特伦;J·施塔德勒 -专利权人：通用电气健康护理生物科学股份公司
申请日： 2005-02-21 - 公布日： 2007-02-28 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及将至少一个质粒从液体的其它成分分离的方法，该方法包括以下步骤：提供包含一个或多个多孔载体的分离基质，该载体外表面以及孔表面上存在阴离子交换基团，且存在不允许质粒接近孔表面的孔径分布；使所述基质与液体接触以允许质粒吸附到分离基质上存在的配体；使洗脱液与分离基质接触以释放质粒和从所述洗脱液级分回收质粒。因此，本发明的方法允许质粒吸附于基质外表面，而其它成分如RNA被吸附于孔表面上。在一个实施方案中，基质呈现至少约270个碱基对的DNA排阻限，如至少约1,000个碱基对。
质粒纯化

[发明专利]一种重复使用的质粒提取试剂盒-CN201010222581.5有效
发明人：张敏莲;靳琳;陈然;江骏 -专利权人：清华大学
申请日： 2010-06-30 - 公布日： 2010-11-24 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：一种重复使用的质粒提取试剂盒，涉及一种核酸提取分离技术中使用的质粒提取试剂盒。该试剂盒包括质粒纯化柱、质粒纯化柱配有的系列溶液和菌体裂解液。本发明的主要技术特点是采用由聚合物形成的整体床型质粒纯化柱和与该质粒纯化柱配备的系列溶液。整体床型质粒纯化柱制备简单、传质性能好、耐污染能力强、质粒提取过程方便快捷，且多次提取质粒样品而纯化柱性能无明显改变。本发明有效克服了现有质粒提取试剂盒成本高、质粒提取纯化柱制备复杂、材料传质性能差、利用率有限、容量低、价格昂贵以及无法重复使用的缺陷。
一种重复使用质粒提取试剂盒

[发明专利]一种质粒DNA工业化分离纯化方法及其应用-CN202210911987.7在审
发明人：陈阳雪;梁笑荣;金百胜;朱建波 -专利权人：苏州纳微科技股份有限公司;常熟纳微生物科技有限公司
申请日： 2022-07-29 - 公布日： 2022-09-30 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明提供了一种质粒DNA工业化分离纯化方法及其应用，所述方法包括如下步骤：将含有质粒DNA的细菌裂解液依次进行离子交换层析和疏水层析处理得到纯化的质粒DNA。本发明将离子层析和疏水层析两步法纯化工艺用于质粒DNA产品的纯化，不仅操作简便易放大，减少了操作步骤，同时提高了纯化质粒的总回收率，并符合药用标准。本发明所述分离纯化方法纯化效果好，重复性强，操作简单，可满足工业上产业化纯化生产要求，大大降低了生产成本，所述方法在质粒DNA工业化分离纯化中具有重要应用价值。
一种质粒 dna 工业化分离纯化方法及其应用

[发明专利]一种快速质粒抽提纯化试剂盒及其应用-CN200410047132.6无效
发明人：李乐攻;李东屏;黄咏 -专利权人：李乐攻;李东屏;黄咏
申请日： 2004-12-31 - 公布日： 2005-08-17 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速质粒抽提纯化试剂盒及进行细菌质粒抽提纯化的方法，其试剂盒包括下列独立存在的液体：无碱含酶菌体裂解液，DNA结合柱前处理液，DNA质粒结合液，清洗液，洗脱液。使用本试剂盒进行细菌质粒抽提纯化的方法包括如下步骤：裂解菌体；前处理DNA结合柱；结合质粒DNA；清洗；洗脱。使用本发明试剂盒及质粒抽提纯化方法，可在3－5分钟内快速有效地完成质粒抽提纯化工作，大大缩短抽提时间；所得到的质粒DNA，经使用分光光度计检测，A₂₆₀/A₂₈₀值达1.7－2.0；还可以用于大批量样品抽提，在紧急情况下抽提纯化质粒；并为质粒抽提的自动化和大规模化奠定了技术基础。
一种快速质粒提纯试剂盒及其应用

[发明专利]一种质粒提取纯化柱的回收方法-CN201010149814.3无效
发明人：韩寒 -专利权人：韩寒
申请日： 2010-04-19 - 公布日： 2011-10-19 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种物品的回收方法，尤其涉及实验用的质粒提取纯化柱的回收方法。目前常见的质粒大量抽提方法有：PEG沉淀法、溴化乙锭-氯化铯梯度离心法以及试剂盒法，其中试剂盒法较前两种方法快速并且提取的纯度高。然而，因其是一次性产品，价格昂贵，这又成为人们不得不考虑的问题。本发明一种质粒提取纯化柱的回收方法，具体如下：步骤1，质粒DNA的制备。步骤2，质粒DNA的纯化。步骤3，纯化柱再生。步骤4，鉴定回收是否彻底。步骤5，质粒DNA的纯度、含量测定及鉴定。本发明实现了质粒提取纯化柱更彻底的回收方法，避免了由于再生不彻底所造成的质粒交叉污染现象。使质粒提取纯化柱得以再生至少10次，成本降低至原价的1/10。
一种质粒提取纯化回收方法

[发明专利]适用于大规模质粒DNA生产的纯化方法-CN202010856171.X在审
发明人：王戬;任秋雨 -专利权人：重庆精准生物技术有限公司
申请日： 2020-08-24 - 公布日： 2022-02-25 - 主分类号： B01D15/36 文献下载
摘要：本发明属于生物分离纯化领域，具体涉及一种适用于大规模质粒DNA生产的纯化方法。所述方法为以先以阴离子交换层析介质为固定相进行离子交换层析去除RNA、内毒素和大肠杆菌宿主蛋白等杂质，保留质粒；再进行亲和层析去除吸附超螺旋质粒和其他微量杂质得纯化DNA质粒。该方法将离子交换层析与亲和层析相结合用于质粒纯化，相较于传统纯化工艺时长短，成本低；无需凝胶过滤步骤，直接层析处理样品体积不受柱体积限制，仅与待纯化的质粒量有关，纯化同样体积的料液，层析介质用量仅为传统凝胶过滤层析介质的
适用于大规模质粒 dna 生产纯化方法

[发明专利]一种质粒DNA规模化纯化方法-CN201510673296.8在审
发明人：唐荣宏;李亚杰;杨保收;付旭彬;梁武 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2015-10-16 - 公布日： 2015-12-30 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明提供了一种质粒DNA规模化纯化方法，该方法采用三步纯化，第一步通过加入氯化钙使细菌基因组DNA和RNA以及大部分杂蛋白凝集后，通过纱网和囊式滤器过滤去除大块杂质，然后通过较大孔径的澄清纯化滤膜过滤质粒DNA裂解液，除去裂解液中小的碎片以及基因组DNA；第二步通过较小孔径的浓缩纯化滤膜浓缩洗滤质粒DNA，达到除去质粒DNA裂解液中的小分子化学物质、杂蛋白，RNA等杂质以及实现浓缩质粒DNA等目的；第三步通过加入表面活性剂以上方法依托于中空纤维超滤膜澄清纯化系统对质粒DNA进行纯化和浓缩，工艺合理有效，极大的提高了质粒DNA的生产效率，降低了纯化成本。
一种质粒 dna 规模化纯化方法

[发明专利]一种质粒DNA的产业化纯化方法及质粒DNA-CN202011466713.9有效
发明人：郭土敬;郭采平;王雪云;吴彦萍;梁富;黄致翔;吴灼斌;徐尔赞;叶才文;刘爱和 -专利权人：深圳市卫光生物制品股份有限公司
申请日： 2020-12-14 - 公布日： 2021-06-01 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种质粒DNA的产业化纯化方法及质粒DNA，所述纯化方法包括以下步骤：在质粒DNA超滤浓缩液中加入辛酸钠，混匀后，常温放置一段时间，接着低温静置一定时间，然后澄清处理；然后依次进行离子交换层析、疏水层析、超滤除盐浓缩和过滤除菌，完成纯化。本发明在低温条件下，将辛酸钠应用于质粒DNA产品的纯化，不仅操作简便易放大，减少了操作步骤，同时提高了纯化质粒的总回收率，并符合药用标准；而且大大减少了硫酸铵的使用，降低了对操作人员和环境的影响。本发明纯化方法纯化效果好而且纯化过程大大减少了硫酸铵试剂的使用，重复性强，操作简单，可满足工业产业化纯化生产要求。
一种质粒 dna 产业化纯化方法

[发明专利]Tagln功能研究相关质粒的大量制备方法-CN201710033142.1在审
发明人：杨献光;李帅洪;王棋文;朱琳;和春翠 -专利权人：河南师范大学
申请日： 2017-01-18 - 公布日： 2017-05-31 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种TAGLN功能研究相关质粒的大量制备方法，属于TAGLN功能研究相关质粒技术领域。本发明的技术方案要点为TAGLN功能研究相关质粒的大量制备方法，具体过程包括质粒的提取和质粒的纯化，并且具体公开了质粒的提取及质粒的纯化等步骤。本发明制备方法简单，方便控制且能够制得大量TAGLN功能研究相关质粒。
tagln 功能研究相关质粒大量制备方法

[发明专利]一种大规模快速纯化质粒DNA的方法-CN202010129401.2在审
发明人：石先灯;李进;吴健华 -专利权人：恒瑞源正（上海）生物科技有限公司;恒瑞源正（广州）生物科技有限公司;恒瑞源正（深圳）生物科技有限公司
申请日： 2020-02-28 - 公布日： 2020-06-19 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明属于生物领域，具体涉及一种大规模快速纯化质粒DNA的方法。该大规模快速纯化质粒DNA的方法，依次包括裂解步骤、过滤步骤、离子交换层析柱步骤、亲和层析介质柱步骤和超滤浓缩和换液步骤，得到药用级质粒DNA。本发明提供了一种用于大规模快速纯化质粒DNA的方法，该方法可采用离子交换膜层析和亲和层析相结合的方式，仅仅二步纯化工艺即可得到高纯度的质粒DNA，并符合生物制品药用标准。该纯化方法操作方便快捷、成本低廉、回收效率高，可满足工业化大生产需求。
一种大规模快速纯化质粒 dna 方法

[发明专利]一种质粒DNA提取和纯化方法及生产工艺-CN200310117157.4无效
发明人：王宾;俞庆龄 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2003-12-04 - 公布日： 2004-11-17 - 主分类号： C07H21/04 文献下载
摘要：一种从原核生物中提取和纯化质粒DNA的方法及其生产工艺，其方法含有原核生物菌液浓缩、菌体裂解、质粒DNA分离和质粒DNA纯化；其生产工艺是：过滤分离法菌体、在溶菌酶作用下热裂解菌体、膜过滤法分离和纯化质粒本发明的技术效果：利用本发明提供的方法及生产工艺不仅能够有效的提高质粒提取产量和质量，而且制备过程简单、易于实施。
一种质粒 dna 提取纯化方法生产工艺

[发明专利]一种纯化质粒的方法-CN202010948587.4在审
发明人：李彦林;陈明曦;任江涛;贺小宏;王延宾;韩露 -专利权人：江苏浦珠生物医药科技有限公司
申请日： 2020-09-10 - 公布日： 2022-03-11 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明提供一种通过固定柱层析纯化质粒的方法，其包括以下步骤：（1）裂解包含待提取质粒的大肠杆菌培养物，获得裂解液；（2）用第一固定柱进行层析，获得粗纯化液；（3）用第二固定柱对粗纯化液进行层析，获得纯化质粒本发明通过对工艺条件例如电导率、洗脱缓冲液的比例、固定柱的工作流速、样品的稀释倍数等的优化，提高了纯化效率。
一种纯化质粒方法

[发明专利]质粒DNA的纯化方法-CN200680003564.4有效
发明人： D·B·博伊德;A·J·克里斯托佩特;R·J·兰德;J·C·墨菲;M·A·温特斯 -专利权人：默克公司
申请日： 2006-01-27 - 公布日： 2008-11-19 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：公开从生产过程，包括大规模发酵方案中，来分离临床级质粒DNA的方法，所述方法包括了两个可供选择的均为质粒DNA纯化工艺中的核心单元操作。在此公开的新型上游和下游纯化工艺可降低产品成本并提高工艺稳定性。在此公开的纯化工艺中，任何一种或两种全部都可以与另外的本领域已知的与DNA质粒纯化技术相关的纯化步骤结合使用。
质粒 dna 纯化方法

[发明专利]利用DNA纹身免疫制备抗体的方法-CN201410857000.3在审
发明人：洪扬;刘明 -专利权人：广州吉赛生物科技有限公司
申请日： 2014-12-31 - 公布日： 2015-04-01 - 主分类号： C07K16/24 文献下载
摘要：本发明公开了利用DNA纹身免疫制备抗体的方法，该方法包括构建抗原蛋白表达载体：将目的基因的cDNA片断通过逆转录PCR扩增的方式从宿主细胞基因组中调出，然后克隆到表达载体中；制备纯化的质粒DNA：利用大肠杆菌大量制备纯化的质粒DNA；质粒DNA免疫：将质粒DNA纹身的方式注射入动物表皮内进行表达及免疫；分离和纯化抗体：杂交瘤筛选及单克隆抗体的分离，纯化和收集血清进行多克隆抗体提取及纯化。本发明所述的方法，采用DNA质粒免疫动物的方法取代传统的肽链及蛋白质免疫，解决传统抗体生产方法中存在的抗体滴度低，特异性差及不能识别天然抗原表位的缺陷。
利用 dna 纹身免疫制备抗体方法

[发明专利]一种大规模纯化质粒DNA的方法-CN201811600919.9有效
发明人：符美娟;丘力功;邱壮伟;李润明;倪世明 -专利权人：广州白云山拜迪生物医药有限公司
申请日： 2018-12-26 - 公布日： 2020-11-06 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种大规模纯化质粒DNA的方法，属于DNA疫苗、核酸疫苗、基因治疗等生物工程技术领域。本发明通过对碱裂解液加入硅藻土助滤澄清来获得简便、快速的分离效果，再经过澄清裂解液的浓缩超滤、分子筛层析、亲和层析、阴离子交换层析、终产品的置换浓缩、除菌过滤等纯化步骤，可生产出符合药用标准的质粒DNA本发明首次使用硅藻土助滤并应用于质粒DNA产品的纯化领域中，操作方法简便易放大；本发明提供的质粒DNA纯化方法操作性强、重复性好、纯化的质粒DNA总回收率高并符合药用标准，可满足工业化大生产要求。
一种大规模纯化质粒 dna 方法

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