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[发明专利]选择性封闭肿瘤STAT3的新型溶瘤腺病毒构建体的获得及用途-CN200710187842.2有效
发明人：马丁;周剑峰;王世宣;卢运萍;韩志强 -专利权人：深圳市奥尼克斯基因技术有限公司
申请日： 2007-11-20 - 公布日： 2009-05-27 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明公开了一种通过人工改造人类5型腺病毒(Ad5)而获得选择性封闭肿瘤STAT3的新型溶瘤腺病毒的构建方案，以及用该方案获取的重组腺病毒构建体在肿瘤治疗中的具体用途，属于医学基因工程技术领域。用PCR扩增定点缺失、酶切、连接、克隆、同源重组、转染、腺病毒单克隆纯化等技术，获得的一种重组腺病毒构建体，其技术特征在于：Ad5基因组E1A保守序列2(CR2)区缺失27个碱基；E3区ADP基因的29477该构建体是一种具有更高的肿瘤选择性复制能力的新型溶瘤腺病毒载体。该构建体在肿瘤的生物治疗中具有独特的实用价值，也为肿瘤基因治疗提供了理想的基因靶点特异性治疗模式。
选择性封闭肿瘤 stat3 新型溶瘤腺病毒构建获得用途

[发明专利]一种腺病毒抗原制备方法及利用该抗原制备的检测腺病毒抗体的快速检测试剂盒-CN201610310993.1在审
发明人：李克生;杜惠芬;曾潮宁;许菲菲;范丽赟 -专利权人：兰州雅华生物技术有限公司
申请日： 2016-05-12 - 公布日： 2017-11-21 - 主分类号： C07K14/075 文献下载
摘要：本发明涉及一种腺病毒基因工程表达人工抗原；制备该抗原的方法，该方法包括人工合成优化的腺病毒五邻体基因序列，构建原核表达载体，大肠杆菌表达腺病毒五邻体抗原，采用透析法、梯度稀释法和凝胶层析法复性包涵体，获得具有三维结构和免疫活性的重组腺病毒五邻体抗原；一种检测腺病毒抗体的快速检测方法，该方法包括应用腺病毒五邻体抗原；一种用于腺病毒抗体检测的快速检测试剂盒，该试剂盒包含腺病毒五邻体抗原，包括检测装置上具备滤血膜，可以直接用来全血检测。本发明提供了一种腺病毒抗原，该抗原具有高度的特异性；本发明提供了制备该抗原的方法，快速测定腺病毒抗体的方法，以及用于快速测定腺病毒抗体的试剂盒。
一种病毒抗原制备方法利用检测抗体快速试剂盒

[发明专利]一种腺病毒颗粒获得方法-CN201910534638.6在审
发明人：秦晓东;何祥一;曾飒;张志东 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2019-06-20 - 公布日： 2019-09-13 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明公开了一种腺病毒颗粒获得方法，具体涉及腺病毒获取领域，具体操作步骤如下：S1、pshuttle‑cmv‑hTERT穿梭质粒的构建；S2、BJ5183/p超级感受态的制备；S3、同源重组腺病毒质粒构建；S4、腺病毒颗粒收集。本发明通过pshuttle‑cmv‑hTERT穿梭质粒的构建、BJ5183/p超级感受态的制备、同源重组腺病毒质粒构建以及腺病毒颗粒收集共四个步骤，能够稳定的获取腺病毒，且每次获取的腺病毒颗粒数都能够保持稳定，相比于现有技术中腺病毒的获取，获取效率以及稳定性都得到了很大的提高。
腺病毒颗粒构建腺病毒腺病毒质粒穿梭质粒同源重组感受态制备

[发明专利]腺病毒核心蛋白遗传标记载体的构建方法-CN201010214774.6无效
发明人：夏海滨;赵俊丽 -专利权人：陕西师范大学
申请日： 2010-06-30 - 公布日： 2011-01-05 - 主分类号： C12N15/65 文献下载
摘要：一种腺病毒核心蛋白遗传标记载体的构建方法，由构建向腺病毒基因组核心蛋白DNA序列3’端引入一个酶切位点的穿梭载体、引入一个酶切位点的腺病毒骨架载体、构建标记基因标记核心蛋白穿梭载体、构建标记基因标记核心蛋白腺病毒质粒载体、标记基因标记核心蛋白腺病毒的包装及纯化组成。本发明采用一种新的标记腺病毒核心蛋白的方法，该方法实现了对腺病毒核心蛋白真正意义的遗传水平上的荧光标记，这种标记方法删除了腺病毒基因组中的原有的核心蛋白基因，因此采用本发明的方法标记腺病毒核心蛋白，可以获得的100％被荧光蛋白标记的病毒颗粒。
病毒核心蛋白遗传标记载体构建方法

[发明专利]病毒载体与人肿瘤抑制基因的重组体及其应用-CN02115228.4在审
发明人：彭朝晖;张晓志 -专利权人：彭朝晖;张晓志
申请日： 2002-05-08 - 公布日： 2003-03-12 - 主分类号： C12N15/86 文献下载
摘要：一种病毒载体与人肿瘤抑制基因的重组体及其应用，该重组体是将由DNA克隆技术构建的病毒载体与人肿瘤抑制基因表达盒相结合，构建成一个能在基因工程改造过的特定细胞中扩增、繁殖，也能在真核细胞中表达肿瘤抑制蛋白的融合序列本发明将腺病毒载体与人p53基因在原核细胞(E.coli)中同源重组，获得腺病毒载体与人p53基因表达盒构建的重组p53腺病毒体。使用本发明的重组p53腺病毒体，可制备成临床级基因治疗制品，用于治疗和预防人类各种恶性肿瘤。
病毒载体肿瘤抑制基因重组及其应用

[发明专利]人PEX外泌型重组腺病毒的构建方法和应用-CN200710008447.3无效
发明人：吕文清 -专利权人：厦门大学
申请日： 2007-01-11 - 公布日： 2007-07-25 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：人PEX外泌型重组腺病毒的构建方法和应用，涉及一种人PEX外泌型重组腺病毒构建方法。提供一种带Myc标签的人PEX外泌型重组腺病毒构建方法，步骤为质粒pSecTag A/PEX的构建：pGEX－4T－3/PEX215质粒的构建；PCR技术扩增人MMP2 C端片段PEX cDNA；真核表达质粒pSecTag A/PEX的构建。腺病毒穿梭载体pShuttle－CMV－PEX的构建。大肠杆菌中腺病毒的同源重组。阳性pAdEasy－pShuttle－CMV－PEX(Ad－PEX)重组子的扩增。重组腺病毒Ad－PEX在HEK293细胞包装成完整的腺病毒。可用于治疗肿瘤等血管生成相关疾病的基因治疗药物。
pex 外泌型重组病毒构建方法应用

[发明专利]一种联合缺失19Kda、55KDAE1B编码序列重组腺病毒构建体的构建及用途-CN01144629.3有效
发明人：周剑锋;马丁;卢运萍;王世宣;徐钢;王世安;李震中 -专利权人：周剑锋
申请日： 2001-12-21 - 公布日： 2003-07-02 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明公开了一种在人类5型腺病毒(Humanadenovirustype5)的基因组中定点缺失(delete)19kDaE1B、55kDaE1B编码序列的构建方案，以及获得的重组腺病毒构建体在肿瘤治疗、用PCR扩增、酶切、连接、亚克隆、转染、重组腺病毒单克隆纯化等技术，缺失19kDaE1B的编码区(1713－2243nt)和E1B55kDa(2018－3328nt)序列，筛选出不能表达19kDaE1B与E1B55kDa功能蛋白的重组腺病毒构建体。该构建体能选择性地在携带p53基因突变表型的肿瘤细胞内复制增殖，从而特异性裂解杀灭肿瘤细胞，但对正常细胞却无毒性效应。该重组腺病毒构建体在用于肿瘤治疗药物、诊断试剂的制备中具有良好的实用价值，同时也是一种良好的基因治疗载体。
一种联合缺失 19 kda 55 kdae1b 编码序列重组病毒构建用途

[发明专利]一种新型溶瘤腺病毒-胸苷激酶基因构建体的获得及用途-CN201010621084.2无效
发明人：马丁;周剑峰;韩志强;卢运萍;王世宣 -专利权人：马丁
申请日： 2010-12-26 - 公布日： 2011-12-21 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明公开了一种人工改造人类5型腺病毒(Ad5)的构建方案，以及用该方案获取的一种新型溶瘤腺病毒构建体在肿瘤治疗中的具体用途，属于医学基因工程技术领域。用PCR扩增定点缺失、酶切、连接、克隆、同源重组、转染、腺病毒单克隆纯化等技术，获得的一种重组腺病毒构建体，其技术特征在于：Ad5基因组E1A保守序列2(CR2)区缺失27个碱基；E3区ADP基因的29477该构建体是一种具有更高的肿瘤选择性复制能力的新型溶瘤腺病毒载体，其利用HSV-TK的自杀基因作用和溶瘤病毒溶解肿瘤细胞的双重杀伤效应在肿瘤的生物治疗中具有独特的实用价值。
一种新型溶瘤腺病毒激酶基因构建获得用途

[发明专利]肿瘤选择性复制型腺病毒-胸苷激酶基因构建体的获得及用途-CN201010621092.7无效
发明人：周剑峰;马丁;韩志强;卢运萍;王世宣 -专利权人：周剑峰
申请日： 2010-12-26 - 公布日： 2011-10-05 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明公开了一种人工改造人类5型腺病毒(Ad5)的构建方案，以及用该方案获取的一种肿瘤选择性复制型腺病毒构建体在肿瘤治疗中的具体用途，属于医学基因工程技术领域。用PCR扩增定点缺失、酶切、连接、克隆、同源重组、转染、腺病毒单克隆纯化等技术，获得的一种重组腺病毒构建体，其技术特征在于：Ad5基因组E1A保守序列2(CR2)区缺失27个碱基；E3区6.7k/gp19k该构建体是一种具有高度的肿瘤选择性复制能力的新型溶瘤腺病毒载体，其利用HSV-TK的自杀基因作用和溶瘤病毒溶解肿瘤细胞的双重杀伤效应在肿瘤的生物治疗中具有独特的实用价值。
肿瘤选择性复制病毒激酶基因构建获得用途

[发明专利]一种优化的猪圆环病毒2型重组腺病毒的构建方法-CN201610316381.3在审
发明人：童德文;黄勇;李德龙;赵晓民 -专利权人：西北农林科技大学
申请日： 2016-05-12 - 公布日： 2017-02-15 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明涉及一种优化的猪圆环病毒2型重组腺病毒的构建方法，将人巨细胞病毒第一内含子(Intron A)和土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)克隆到腺病毒穿梭载体中，完成重组腺病毒的构建。本发明的优点体现在提高Cap表达量，从而降低腺病毒使用剂量和腺病毒自身蛋白免疫反应，提高猪圆环病毒2型重组腺病毒的制备效率。
一种优化圆环病毒重组构建方法

[发明专利]一种基于重组腺病毒的猫冠状病毒感染动物模型的构建方法及应用-CN202210516519.X有效
发明人：黄耀伟;陈楚;徐令东;王斌;杨永乐 -专利权人：岭南现代农业科学与技术广东省实验室
申请日： 2022-05-11 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于重组腺病毒的猫冠状病毒感染动物模型的构建方法及应用。所述构建方法包括：构建用于表达猫氨基肽酶N的重组腺病毒载体，转导到工程细胞中包装获得重组腺病毒；用获得的重组腺病毒感染实验动物，获得对猫冠状病毒易感的实验动物；使用猫冠状病毒感染获得的对猫冠状病毒易感的实验动物，获得猫冠状病毒感染实验动物模型。本发明的构建方法通过包装出了表达fAPN的重组腺病毒，体外证明其能够使293细胞表达fAPN，使其对猫冠状病毒易感。体内将重组腺病毒转导小鼠后，使小鼠能够被FCoV感染，验证了重组芽孢枯草杆菌对小鼠感染模型的免疫保护效果，证明构建的重组腺病毒小鼠感染模型可以用于药物治疗与疫苗评价。
一种基于重组病毒冠状病毒感染动物模型构建方法应用

[发明专利]携带锌指核酸酶表达元件和供体DNA的腺病毒及其构建方法和应用-CN201310076298.X有效
发明人：夏海滨;张伟锋;刘思也 -专利权人：陕西师范大学
申请日： 2013-03-11 - 公布日： 2013-07-24 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：一种携带锌指核酸酶表达元件和供体DNA的腺病毒，缺失E1区和E3区，在缺失区插入了锌指核酸酶表达元件和供体DNA。构建方法由构建腺病毒骨架载体、构建携带锌指核酸酶表达元件的腺病毒E3区穿梭载体、构建携带供体DNA的腺病毒E1区穿梭载体、构建携带锌指核酸酶表达元件和供体DNA的腺病毒载体、包装和扩增以及纯化步骤组成，携带锌指核酸酶表达元件和供体DNA的腺病毒在制备治疗遗传性疾病药物中的用途。
携带核酸酶表达元件供体 dna 病毒及其构建方法应用

[发明专利]一种用于腺病毒载体构建的携带双顺反子的穿梭质粒及构建-CN202010975526.7在审
发明人：王家宁 -专利权人：十堰市人民医院（湖北医药学院附属人民医院）
申请日： 2020-09-16 - 公布日： 2020-12-22 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明提出了一种用于腺病毒载体构建的携带双顺反子的穿梭质粒及构建，利用腺病毒穿梭载体pShuttle为基础质粒，在多克隆位点上利用限制性核酸内切酶KpnI和Bgl II插入内部核糖体进入位点元件序列，从而构建了一个包含双顺反子序列并携带有两个并行的多克隆位点的用于腺病毒载体构建的真核表达穿梭载体通过PCR扩增和基因测序证实该载体构建成功；该载体可用于双基因或多基因的真核表达和相应腺病毒载体的构建等实验研究，为基因功能研究提供了便利。
一种用于病毒载体构建携带顺反子穿梭质粒

[发明专利]一种猪α干扰素重组腺病毒及其构建方法和应用-CN200610124194.1无效
发明人：宋长绪;季芳;蒋智勇 -专利权人：广东省农业科学院兽医研究所
申请日： 2006-12-13 - 公布日： 2007-05-30 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪α干扰素重组腺病毒及其构建方法，其构建方法步骤如下：猪α干扰素IFN－α基因的扩增、克隆；含有IFN－α基因的重组穿梭载体的构建；重组腺病毒质粒载体的构建；重组腺病毒的获得。本发明还公开了猪α干扰素重组腺病毒在制备抗病毒疫苗中的应用。该重组腺病毒能在体内有限生长并且不断表达IFN－α蛋白，使猪具有持久的抗病毒感染的保护力，在病毒的防治方面具有广阔的应用前景。
种猪干扰素重组病毒及其构建方法应用

[发明专利]灭活肿瘤CHK1基因抗癌重组腺病毒构建体的获得及用途-CN03126759.9在审
发明人：周剑峰;马丁;卢运萍;王世宣;陈刚;高庆蕾 -专利权人：深圳市奥尼克斯基因技术有限公司
申请日： 2003-06-05 - 公布日： 2004-12-08 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明公开了一种人工改造人类5型腺病毒(ADV5)的构建方案，以及用该方案获取的重组腺病毒构建体在肿瘤治疗中的具体用途。用PCR扩增定点缺失、同源重组、转染、腺病毒单克隆纯化等技术，获得一种重组腺病毒构建体，其特征在于：ADV5基因组E1A保守序列2(CR2)编码序列9个碱基缺失；ADV5 E3区28532－29360该重组腺病毒构建体能选择性地在肿瘤细胞内复制增殖；插入的反义CHK1 cDNA片段在肿瘤细胞内特异性表达；对肿瘤细胞具有强效旁观者效应。从而特异性杀灭肿瘤细胞，同时对正常细胞无杀灭效应。该构建体在肿瘤治疗药物、诊断试剂的制备中具有独特的实用价值，同时也为肿瘤基因治疗提供了理想的基因靶点特异性治疗应用途径。
肿瘤 chk1 基因抗癌重组病毒构建获得用途

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