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[发明专利]基于IGF2降解细胞膜表面或细胞膜外蛋白的方法及融合蛋白-CN202310831737.7在审
发明人：葛璟燕;张蓓;冯嘉毅;胡诗琪 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2023-07-07 - 公布日： 2023-10-10 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于IGF2降解细胞膜表面或细胞膜外蛋白的方法及融合蛋白，所述方法是将IGF2与细胞膜表面或细胞膜外靶蛋白的结合分子融合形成融合蛋白；再将融合蛋白与细胞共培养，利用融合蛋白的IGF2与细胞表面的溶酶体靶向受体IGF2R的结合，将靶蛋白内吞进入溶酶体中，从而实现细胞膜表面或细胞膜外靶标蛋白的降解。本发明方法可以快速降解细胞表面或细胞外靶标蛋白，12小时处理可以降解58％的表皮生长因子受体蛋白EGFR。本发明融合蛋白削弱了连接子长度和组成的影响，无需多步骤化学合成、可以在大肠杆菌中稳定高效表达，产量高，并针对不同靶点可订制、可模块化构建。
基于 igf2 降解细胞膜表面蛋白方法融合

[发明专利]一种细胞表面蛋白的分离纯化方法及应用-CN202111319985.0在审
发明人：张亮;刘国攀;马海英 -专利权人：香港城市大学深圳研究院
申请日： 2021-11-09 - 公布日： 2023-05-12 - 主分类号： C07K1/14 文献下载
摘要：本发明提供一种细胞表面蛋白的分离纯化方法及应用。该方法包括：培养获得待分离的细胞，向细胞中加入叠氮化物溶液进行孵育反应，接着加入Tris‑HCl缓冲液终止反应，实现细胞表面蛋白叠氮化物的标记；接着加入TNTE缓冲液和蛋白酶抑制剂裂解细胞，离心后得到叠氮化物标记的细胞裂解物；叠氮化物标记的细胞裂解物与膦‑生物素‑链霉亲和素磁珠进行孵育，富集出叠氮化物标记的细胞表面蛋白，得到含有细胞表面蛋白的磁珠。本发明的方法能够有效分离细胞表面蛋白，具有低背景、高效率和良好的重复性；能够应用于定量分析细胞表面蛋白质组。
一种细胞表面蛋白分离纯化方法应用

[发明专利]细胞表面糖蛋白-CN200580034426.8无效
发明人： S·菲兹杰拉德;R·法根;J·比恩科沃斯卡;C·鲍尔;M·优克－史密斯 -专利权人：阿雷斯贸易股份有限公司
申请日： 2005-08-11 - 公布日： 2007-09-19 - 主分类号： C07K14/435 文献下载
摘要：本发明涉及一种称为INSP201的新型蛋白质，在本文中将其鉴定为细胞表面糖蛋白，还涉及该蛋白质和源自其编码基因的核酸序列在诊断、预防和治疗疾病中的应用。
细胞表面糖蛋白

[发明专利]三特异性抗原结合蛋白-CN201980016065.6在审
发明人：莱昂纳多·博拉斯;多米尼克·埃舍尔;克里斯蒂安·瓦尔德马·温格·莱斯纳;法比安·沙伊费勒;托马斯·施莱尔;菲利普·罗伯特·瑞克雷 -专利权人： CDR-生物科技股份有限公司
申请日： 2019-03-01 - 公布日： 2020-12-22 - 主分类号： C07K16/46 文献下载
摘要：提供了包含以下的三特异性抗原结合蛋白：能够结合肿瘤细胞的细胞表面蛋白的第一结合结构域；能够结合该肿瘤细胞的细胞表面免疫检查点蛋白的第二结合结构域；以及能够结合免疫细胞的细胞表面蛋白的第三结合结构域。提供了制备三特异性抗原结合蛋白的方法。
特异性抗原结合蛋白

[发明专利]一种用人微血管内表皮细胞ICAM-1蛋白表达量检测凉茶抗炎活性的方法-CN201610953662.X在审
发明人：胡学博;王嘉男 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2016-11-03 - 公布日： 2018-05-11 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种用人微血管内表皮细胞ICAM‑1蛋白表达量检测凉茶抗炎活性的方法。发明点在于，不通过RNA提取，直接将HMEC‑1细胞表面ICAM‑1蛋白用荧光抗体标记后，通过流式细胞仪检测其表达量，具体为：将HMEC‑1细胞接种在细胞培养板中，待细胞长至单层，用凉茶检测液与细胞孵育，再用LPS处理细胞，诱导发生炎症，发生炎症细胞表面ICAM‑1蛋白表达量显著增加，将凉茶检测液孵育细胞后，ICAM‑1蛋白的表达量受到抑制。利用荧光标记ICAM‑1抗体标记细胞表面ICAM‑1蛋白，用流式细胞仪定量检测凉茶检测液对发炎细胞表面ICAM‑1蛋白的表达量，以蛋白的表达量作为衡量凉茶检测液抗炎效果的指标。
一种用人微血管表皮细胞 icam 蛋白表达检测凉茶活性方法

[发明专利]利用炭疽杆菌芽孢外壁在细胞表面展示目的蛋白的方法-CN200680050288.7有效
发明人：李相烨;朴泰正;许男守 -专利权人：韩国科学技术院
申请日： 2006-12-29 - 公布日： 2009-05-06 - 主分类号： C12N15/64 文献下载
摘要：本发明涉及利用炭疽杆菌(Bacillus anthracis)芽孢外壁蛋白在微生物表面表达目的蛋白。更特殊地涉及一种如此构建的载体：其包含用作细胞表面骨架的编码炭疽杆菌(Bacillus anthracis)芽孢外壁蛋白的bclA基因或其片段，并且当目的蛋白表达基因在宿主细胞中进行表达时，所述目的蛋白能够以和BaclA或其片段融合的形式在细胞表面进行表达，以及利用该载体在微生物表面表达目的蛋白的方法。根据本发明的表达载体能够利用BaclA，作为细胞表面骨架的炭疽杆菌(Bacillus anthracis)芽孢外壁蛋白，在细胞表面有效地表达目的蛋白或肽，而且既然通过对转化有表达载体的微生物进行培养的方法目的蛋白能够在细胞表面大规模稳定表达，由此可能将其有效地用于重组活疫苗、整细胞吸收剂、整细胞生物转化等各种目的。
利用炭疽杆菌芽孢外壁细胞表面展示目的蛋白方法

[发明专利]分离提取肿瘤细胞膜蛋白和细胞表面蛋白的方法及其应用-CN202210446798.7在审
发明人：高俊莉;高俊顺;王洪;宋林珍;凌欢君;江南 -专利权人：杭州广科安德生物科技有限公司
申请日： 2022-04-26 - 公布日： 2022-09-20 - 主分类号： C07K14/30 文献下载
摘要：本发明公开了一种分离提取肿瘤细胞膜蛋白和细胞表面蛋白的方法，包括以下步骤：在2‑8℃的条件下：用PBS悬洗活体肿瘤细胞，离心分离，然后对所得活体肿瘤细胞进行生物素标记，并采用裂解液裂解肿瘤细胞，超声破碎细胞经离心分离，将所得混合物加入链霉亲和素分离柱中，并采用清洗液清洗除去非生物素标记的蛋白；向链霉亲和素分离柱中加入洗脱液，静置孵育，离心分离得生物素标记的细胞表面蛋白和细胞膜蛋白。本发明的有益效果为：本发明所述的方法避免了现有方法无法分离提取细胞表面蛋白和来自其它细胞器蛋白对细胞膜蛋白的污染问题，为寻找发现全新的免疫治疗靶向蛋白和肿瘤标志物提供了一种简便有效的细胞表面蛋白和细胞膜蛋白的富集分离方法
分离提取肿瘤细胞膜蛋白表面蛋白方法及其应用

[发明专利]用于修饰靶核酸的组合物和方法-CN202180034066.0在审
发明人：维瓦斯万·维昆塔;亚历山大·马森;贾斯汀·埃克姆;布莱恩·夏伊 -专利权人：加利福尼亚大学董事会;J·大卫格莱斯顿研究所-根据J·大卫格莱斯顿遗嘱的遗嘱信托
申请日： 2021-03-12 - 公布日： 2023-03-07 - 主分类号： A61K35/17 文献下载
摘要：本公开内容提供了用CAR或外源性蛋白(例如外源性细胞内或细胞表面蛋白(例如外源性TCR))修饰细胞(例如T细胞)中的内源性细胞表面蛋白(例如内源性TCR)的组合物和方法。
用于修饰核酸组合方法

[发明专利]产生抗T细胞受体的抗体的方法-CN201680045217.1在审
发明人：德洛利斯·申德尔;斯拉沃柳布·米洛舍维奇;塔尼亚·赫曼;米凯拉·库格勒 -专利权人：基因医疗免疫疗法有限责任公司
申请日： 2016-06-01 - 公布日： 2018-06-08 - 主分类号： C07K16/28 文献下载
摘要：本发明涉及用于产生与感兴趣的细胞表面蛋白结合的抗体的方法，该方法包括以下步骤：(a)提供非人类细胞，其不表达内源性感兴趣的细胞表面蛋白但表达包含至少一段人类片段的外源性感兴趣的细胞表面蛋白；(b)用步骤(a)提供的细胞系免疫非人类动物；(c)由步骤(b)的经过免疫的非人类动物产生杂交瘤；(d)通过使步骤(c)的杂交瘤分泌的抗体与不表达内源性感兴趣的细胞表面蛋白但表达包含至少一段人类片段的外源性感兴趣的细胞表面蛋白的人类细胞接触来筛选与感兴趣的细胞表面蛋白结合的抗体
细胞表面蛋白抗体非人类动物杂交瘤内源外源非人类细胞人类细胞抗T细胞分泌筛选

[发明专利]一种有核细胞表面连接蛋白的方法及其应用-CN202210634986.2在审
发明人：吴耀炯;董艳凯 -专利权人：清华大学深圳国际研究生院
申请日： 2022-06-07 - 公布日： 2022-09-06 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明属于细胞工程领域，公开了一种有核细胞表面连接蛋白的方法及其应用。这种方法包括：对有核细胞进行巯基化修饰，得到活化的有核细胞；对蛋白进行马来酰亚胺化修饰，得到活化蛋白；将活化的有核细胞和活化蛋白混合孵育，使活化蛋白与活化的有核细胞偶联。该方法能高效地将蛋白连接在有核细胞表面，但不影响细胞活力，可用于提高有核细胞靶向迁徙能力，及特异性结合损伤组织的能力。
一种细胞表面连接蛋白方法及其应用

[发明专利]一种提高酿酒酵母中异源蛋白分泌或表面展示表达的方法-CN202010261091.X有效
发明人：汤红婷;罗小舟;陈南柱 -专利权人：中国科学院深圳先进技术研究院
申请日： 2020-04-03 - 公布日： 2023-06-13 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及一种提高酿酒酵母中异源蛋白分泌或表面展示表达的方法，具体公开了一种同时提高酿酒酵母中异源蛋白的细胞外分泌和表面展示表达的方法，该方法包括将一个或多个细胞壁相关蛋白失活的酿酒酵母细胞或敲除一个或多个编码细胞壁相关蛋白基因的酿酒酵母细胞作为宿主细胞，进行异源蛋白表面展示或分泌表达；异源蛋白为β‑葡萄糖苷酶异源蛋白表面展示或分泌表达的方法为：1)制备细胞外分泌型重组质粒；2)将重组质粒转化至本发明所述的酿酒酵母细胞内，进行培养及酶活测试。
一种提高酿酒酵母中异源蛋白分泌表面展示表达方法

[发明专利]一种JO蛋白锚定的载药免疫细胞及其制备方法和应用-CN202111159554.2在审
发明人：黄来强;吴佳敏;陈华清;冯春燕;代小勇;李婧 -专利权人：清华大学深圳国际研究生院
申请日： 2021-09-30 - 公布日： 2022-01-07 - 主分类号： A61K47/46 文献下载
摘要：本发明涉及一种JO蛋白锚定的载药免疫细胞及其制备方法和应用，具体公开了一种JO蛋白锚定的免疫细胞，所述免疫细胞表面上通过化学键偶联JO蛋白，和或者在免疫细胞表面引入偶联JO蛋白的连接剂，将JO蛋白插嵌在免疫细胞上；其中所述的连接剂为具有磷脂或磷脂类似物、聚乙二醇和活性基团的缀合物；所述免疫细胞中包含活性药物，所述的免疫细胞选自T细胞、B细胞或巨噬细胞。本发明证明JO蛋白对免疫细胞的促渗效果，将JO蛋白连接到免疫细胞，在实现JO促渗效果的同时，减少化药与JO蛋白连用时的给药次数。
一种 jo 蛋白锚定免疫细胞及其制备方法应用

[发明专利]Reg－结合蛋白-CN00810465.4无效
发明人：冈本宏 -专利权人：冈本宏
申请日： 2000-06-09 - 公布日： 2002-07-31 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明从大鼠胰岛－衍生的cDNA中成功克隆出与Reg蛋白结合的蛋白质。经证实,COS细胞表面表达的这种蛋白质特异性地与Reg蛋白结合。当在RINm5Fβ细胞中表达Reg－结合蛋白时,DNA合成和细胞增殖受到刺激,受刺激的程度依赖于培养基中所加入Reg蛋白的剂量,在较高浓度时,会诱导细胞凋亡。据认为该蛋白质作为细胞(如β细胞)表面表达的Reg受体起作用,并能调节这些细胞的增殖。该蛋白质及其基因可用于开发新的糖尿病治疗剂。
reg 结合蛋白

[发明专利]一种细胞膜蛋白质富集纯化方法-CN201310557138.7有效
发明人：张丽华;方菲;赵群;随志刚;杨开广;张玉奎 -专利权人：中国科学院大连化学物理研究所
申请日： 2013-11-08 - 公布日： 2018-11-02 - 主分类号： C07K1/14 文献下载
摘要：本发明涉及一种细胞膜蛋白质富集纯化方法，该方法利用细胞膜表面整合膜蛋白质贯穿于膜双分子层且细胞膜表面膜蛋白质多发生糖基化修饰的自然特征，通过功能化磁性微球捕获作为诱饵的细胞膜表面糖基化修饰蛋白质，实现细胞膜与细胞器的分离及细胞膜整合膜蛋白质的高效富集该方法具有细胞膜与细胞器分离效率高的优点，可对细胞膜蛋白质进行高效分析及表征。此外功能化磁性微球的引入，使该方法具有操作简便，分离快速且样品损失低的优点。
一种细胞膜蛋白质富集纯化方法

[发明专利]肝星状细胞前体及其分离方法-CN200780026863.4有效
发明人： H·库伯塔;洛拉·M·里德 -专利权人：北卡罗来纳大学教堂山分校
申请日： 2007-05-24 - 公布日： 2009-10-07 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明涉及肝星状细胞的前体细胞、包含所述前体细胞的组合物以及分离所述前体细胞的方法。所述前体的表面抗原特征是Ia类MHC阴性、ICAM-1⁺、VCAM-1⁺、β3-整联蛋白⁺。除了这些表面标志物的表达外，细胞还表达细胞内标志物结蛋白、波形蛋白、平滑肌α-肌动蛋白、巢蛋白、肝细胞生长因子、间质衍生因子-1α和Hlx同源异形框转录因子。
星状细胞及其分离方法

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