本发明属于生物工程领域,特别是指一种合成单葡萄糖甘油二酯的突变体酶及其制备方法和应用。所述突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示、核苷酸所编辑的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本申请制备的海洋细菌甘油糖脂合成酶突变体T257S具有良好的转糖基催化活性,可以高效转化UDP‑葡萄糖和甘油二酯(sn‑甘油‑1‑硬脂酸酯‑2‑油酸酯),单葡萄糖甘油二酯转化率达到68.5%,制备的单葡萄糖甘油二酯纯度高,纯度达到93.8%以上,适用于糖脂化合物单葡萄糖甘油二酯生物酶法制备,具有较好的工业应用前景。