本发明公开了一种中国猪丹毒弱毒疫苗株的特异性序列及应用，申请人将猪丹毒疫苗株G4T10和GC42的DNA聚合酶IV的基因序列与猪丹毒野毒株的进行比对，发现其存在区别。中国猪丹毒弱毒疫苗株的特异性序列为SEQ ID NO.1所示。设计针对猪丹毒弱毒疫苗株的特异性引物，并结合猪丹毒种特异性引物可快速鉴定中国猪丹毒弱毒疫苗株和野毒株，适合各种样品的大批量检测，为快速检测猪丹毒临床分离株并鉴别诊断野毒株和疫苗株提供了新的技术手段。
本发明公开了一种猪丹毒保护性抗原蛋白，所述猪丹毒保护性抗原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述密码子优化后的编码猪丹毒保护性抗原蛋白的核苷酸序列如SER ID NO.2所示。所述猪丹毒保护性抗原蛋白由SpaA重组蛋白作为主体骨架、通过连接子在SpaA重组蛋白N端连接RspA抗原多肽、在SpaA重组蛋白C端连接CbpB抗原多肽和6His标签组成。本发明还公开了一种猪丹毒亚单位疫苗，所述疫苗含有有效量的猪丹毒保护性抗原蛋白和药学上可接受的佐剂。本发明制备的猪丹毒保护性抗原蛋白具有良好的免疫原性，免疫效果较3个单独的蛋白和市场疫苗要好，且与三个蛋白混合后的免疫效果相当；但是，本发明制备的猪丹毒保护性抗原蛋白的免疫剂量较三个蛋白混合的要低。
本发明提供一种猪丹毒SpaA蛋白，其氨基酸序列为SEQ ID NO:1。本发明的猪丹毒杆菌SpaA蛋白用于制备疫苗或诊断试剂。本发明的猪丹毒杆菌SpaA蛋白制备的亚单位疫苗具有抗原稳定性高，纯度高，特异性强，不产生其他不相关抗体，检测方法方便准确的特点，为工业化生产猪丹毒亚单位疫苗和诊断试剂奠定了坚实的基础。
本发明公开了一种荧光定量PCR检测猪丹毒杆菌的引物、探针、试剂盒及方法，所述引物如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示，所述探针如SEQ ID NO:3所示，所述方法为以待检测样品的DNA本发明的检测猪丹毒杆菌的引物和探针具有很高的特异性和灵敏度，能够检测出猪丹毒杆菌，可以对各种临床样品进行检测，从而可以快捷的对临床中猪丹毒杆菌感染情况进行监测，操作简单、实用。
本发明一方面公开了一种单克隆抗体，所述的单克隆抗体能特异性结合猪丹毒SpaA蛋白，所述的编码单克隆抗体的重链可变区序列如SEQ ID NO.1所示，所述的编码单克隆抗体的轻链可变区序列如SEQ ID NO本发明还公开了一种猪丹毒SpaA蛋白抗体检测试剂盒，所述的试剂盒包括所述的单克隆抗体和猪丹毒SpaA蛋白。该单克隆抗体具有特异性好、亲和力好的优点，可以用于猪丹毒SpaA蛋白抗体的检测以及相关检测产品的开发。
