本发明公开了α淀粉酶变体及其应用。所述的α淀粉酶变体通过在B.licheniformis的α淀粉酶N端增加两个额外的氨基酸A和N,并且在C端增加五个额外的氨基酸KTTVS得到,同时仍然保持了亲代水解α‑1,4糖苷键的能力;优选如SEQ ID NO.4所示的α淀粉酶变体。本发明提供的一系列α淀粉酶变体,在pH 5.0‑5.8酸性条件下和100℃以上高温条件下有较高的催化活度。这些α淀粉酶变体的耐酸和热稳定性,适用于淀粉液化。
一种温度敏感型α‑淀粉酶及其制备方法与应用,属于生物工程技术领域。所述温度敏感型α‑淀粉酶核苷酸序列如SEQ ID NO 1,氨基酸序列如SEQ ID NO 2。温度敏感型度敏感型α‑淀粉酶的制备方法:1)通过基因组分析得到一条目的基因序列AAO78808.1,去除信号肽并经过密码子优化后得到SEQ ID NO 1,SEQ ID NO 1交由公司合成α‑淀粉酶目的基因;2)含α‑淀粉酶目的基因重组菌株的构建;3)重组温度敏感型α‑淀粉酶的表达与纯化。所述温度敏感型α‑淀粉酶在30‑40℃活性较好,50℃时活性骤降且稳定性不佳。可用于纺织、造纸、洗涤剂、发酵和食品工业等。
本发明涉及一种突变α-淀粉酶,其获得方法是对具有SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的α-淀粉酶或与该氨基酸序列至少有70%同源性的α-淀粉酶中该氨基酸序列中的至少一种氨基酸残基如167位Gln、169位Tyr和178位Ala进行置换或缺失,并涉及编码该突变α-淀粉酶的基因、载体、转化细胞、包括培养转化细胞的产生突变α-淀粉酶的方法、以及含有该突变α-淀粉酶的洗涤剂组合物。本发明的突变α-淀粉酶具有对螯合剂的高抗性、碱性区的高比活和极佳热稳定性的极佳性质,因此可用于自动洗碟机用洗涤剂、洗衣洗涤剂等。