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[发明专利]一种泛素链固相检测方法和应用-CN201910491358.1有效
发明人：李衍常;徐平;肖伟弟;高媛;常蕾;高慧英 -专利权人：北京蛋白质组研究中心
申请日： 2019-06-06 - 公布日： 2022-08-23 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明涉及生物样本中蛋白质泛素化修饰的高效、灵敏且无偏性的检测方法。以由两个不同的泛素结合结构域串联而成且N端含有标签蛋白(GST)的人工合成多肽(ThUBD)作为检测试剂。与通用的商业化泛素抗体相比，本发明提供的检测试剂以及固相检测方法能够高效、无偏性的识别泛素分子形成的8种不同泛素链，实现对生物样本内源泛素链的无偏性检测；可以显著提高泛素化蛋白质的检测灵敏度。
一种泛素链固相检测方法应用

[发明专利]非抗体依赖的泛素化修饰富集方法和检测方法-CN202210220908.8在审
发明人：张小飞;孙明伟;张青;邬文峰;黄秋玲 -专利权人：中国科学院广州生物医药与健康研究院;生物岛实验室
申请日： 2022-03-08 - 公布日： 2022-06-10 - 主分类号： G01N30/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种非抗体依赖的蛋白质泛素化修饰富集方法，包括全蛋白质提取、蛋白水平自由氨基完全封闭、底物蛋白上泛素链水解、含有可富集标签试剂标记泛素化修饰位点处的自由氨基、蛋白质的酶切、标记的泛素化修饰肽段的富集本发明还涉及检测方法，即对富集后的泛素化修饰肽段通过液相‑质谱检测。本发明不需要利用抗体识别酶切后产生的泛素残留基序，即可实现蛋白质泛素化修饰的无差别富集及鉴定。
抗体依赖泛素化修饰富集方法检测

[发明专利]一种K27泛素链特异性抗体及其用途-CN202111454256.6有效
发明人：赵博;李贞;叶琳;金博;王亚楠 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2021-12-01 - 公布日： 2023-03-21 - 主分类号： C07K16/18 文献下载
摘要：本发明涉及生物医药技术领域，公开了一种K27泛素链特异性抗体及其用途，所述的抗体包括重链可变区，所述的重链可变区具有如下技术特征中的一个或多个：1‑1)氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR‑H1本发明的K27泛素链特异性抗体可特异性识别和结合K27泛素链，与其他类型的泛素链均无交叉反应，可用于直接定性或定量检测K27泛素链、修饰蛋白底物的K27泛素链，也可富集包含K27泛素链修饰的底物蛋白，此外还可用于制备和
一种 k27 泛素链特异性抗体及其用途

[发明专利]三聚泛素链探针及其合成方法和应用-CN202210105494.4在审
发明人：郑勇;杨杰;周莉 -专利权人：合肥科生景肽生物科技有限公司
申请日： 2022-01-28 - 公布日： 2022-05-13 - 主分类号： G01N33/532 文献下载
摘要：本发明涉及三聚泛素链探针及其合成方法和应用，具体地，所述三聚泛素链探针具有式I‑a所示的结构或式I‑b所示的结构。本发明的三聚泛素链探针具有更高的拟真性，用其进行去泛素化酶相关功能的研究具有更高的可靠性，进一步可用于研究多聚泛素链水解的外切(exo‑cleavage)和内切(endo‑cleavage)选择性机制。
三聚泛素链探针及其合成方法应用

[发明专利]一种从蛋白乳中提取泛素及类泛素的方法-CN201610084696.X在审
发明人：赵金梁;赵发 -专利权人：天津替代医学科技股份有限公司
申请日： 2016-02-15 - 公布日： 2016-06-01 - 主分类号： C07K14/415 文献下载
摘要：一种从蛋白乳中提取泛素及类泛素的方法。本发明为生物技术领域，是一种从动物或植物的蛋白乳中提取泛素和类泛素的方法：将植物热磨制浆，或者将动物的组织、皮、肉清洗、绞碎后湿磨制浆，离心分离，得到的蛋白乳加热后过滤，得到粗提液和沉淀；将沉淀清洗后再次过滤，所得滤液与粗提液合并，加入活性炭搅拌后除去活性炭，得到的上清液经离心机分离，得到的固相进行喷雾干燥，得到泛素及类泛素，得到的液相与前述蛋白乳合并，再次提取。该方法工艺流程短，操作简单，不引入不安全物质，减少能源消耗，同时综合利用动物或植物，制得的泛素和类泛素可应用在医药、保健品等领域。
一种蛋白乳中提取类泛素方法

[发明专利]一种用于M1线性泛素链亲和富集的串联杂合泛素结合结构域多肽-CN202211567050.9在审
发明人：李衍常;徐平;王永红;常蕾 -专利权人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
申请日： 2022-12-07 - 公布日： 2023-07-14 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明提供一种串联杂合泛素结合结构域多肽(M1‑ThUBD)及其应用，所述M1‑ThUBD可以实现M1线性泛素链修饰底物的高效富集和高灵敏检测，较商业化抗体法检测灵敏度提升超过10倍，且克服了抗体法无法用于亲和纯化的问题；较商业化亲和材料，富集效率提升近10倍；较其他7种泛素链，具有显著的M1线性链亲和特异性。该发明为M1线性泛素链修饰底物的筛选与功能研究提供了有效工具。
一种用于 m1 线性泛素链亲和富集串联杂合泛素结合结构多肽

[发明专利]天然小分子化合物在抑制泛素链合成反应中的应用-CN201711240534.1有效
发明人：夏总平;李海东;戴立思 -专利权人：浙江大学
申请日： 2017-11-30 - 公布日： 2021-08-31 - 主分类号： A61K31/352 文献下载
摘要：本发明公开了一种天然小分子化合物在抑制泛素链合成反应中的应用。本发明首次发现特定结构的天然小分子化合物能够抑制泛素链合成反应，该天然小分子化合物具有IC50值低，效能高，特异性好的特点；此外，本发明还通过体外分步解析泛素化反应以及胞内泛素化反应实验证明天然小分子化合物能够通过抑制泛素结合酶Ubc13的活性进而抑制结合酶Ubc13介导的泛素氨解反应。
天然分子化合物抑制泛素链合成反应中的应用

[发明专利]量化和/或分析键特异性多泛素链的方法-CN201110006354.3在审
发明人：沈玉先;方辉;王阳 -专利权人：合肥爱克森特生物技术有限公司
申请日： 2011-01-13 - 公布日： 2011-09-07 - 主分类号： C12Q1/34 文献下载
摘要：本发明提供了一种量化和/或分析键特异性多泛素链的方法，该方法为：将报告蛋白分为N末端片段和C末端片段，将两个片段分别与泛素结合结构域(UBD)融合表达，然后将上述融合两个报告蛋白片段的UBD同时与目的样品作用；当UBD结合于特异多泛素链，报告蛋白的两段会互补形成完整功能的蛋白，然后通过对互补形成的完整报告蛋白检测来量化和/或分析键特异性多泛素链。并通过实验得到了能够在体外或细胞内结合分析K48或K63特异性多泛素链的EPN1的UIM与报告蛋白制备的融合蛋白。
量化分析特异性多泛素链方法

[发明专利]一种用于二泛素合成的新型辅基连接臂及其合成方法和应用-CN201910025364.8有效
发明人：李宜明;陈俊佑;储国超 -专利权人：合肥工业大学
申请日： 2019-01-11 - 公布日： 2020-10-23 - 主分类号： C07C323/41 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于二泛素合成的新型辅基连接臂及其合成方法和应用，其中用于二泛素合成的新型辅基连接臂的结构式如下：一种用于二泛素合成新型连接及其方法应用

[发明专利]一种筛选鉴定与植物多亚基SCF E3连接酶协同工作E2的方法-CN202210697749.0在审
发明人：李家洋;王冰;刘会会;余泓;孟祥兵;刘贵富;陈明江;荆彦辉 -专利权人：中国科学院遗传与发育生物学研究所
申请日： 2022-06-20 - 公布日： 2022-08-16 - 主分类号： C12Q1/25 文献下载
摘要：本发明提供了一种鉴定待测泛素结合酶E2能否与植物多亚基SCF E3连接酶协同工作形成多聚泛素链，包括：配制反应体系，含有待测泛素结合酶E2、植物多亚基SCF E3连接酶、泛素活化酶E1和泛素蛋白Ubiquitin；将反应体系置于22‑37℃震荡反应1‑2h；检测，从而确定所述待测泛素结合酶E2是否能够与所述植物多亚基SCF E3连接酶协同工作形成多聚泛素链。
一种筛选鉴定植物多亚基 scf e3 连接酶协同工作 e2 方法

[发明专利]人工构建的杂种泛素结合结构域多肽及其应用-CN201410323921.1有效
发明人：徐平;高媛;李衍常;赵明治;王京伟;常蕾;武军驻;贺福初 -专利权人：中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所
申请日： 2014-07-08 - 公布日： 2018-04-27 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种人工构建的杂种泛素结合结构域多肽及其应用。本发明所提供的杂种泛素结合结构域多肽，由至少两个泛素结合结构域串联而成；且在组成所述杂种泛素结合结构域多肽的所有泛素结合结构域中，至少有两个泛素结合结构域是不同的。另外，所述杂种泛素结合结构域多肽还可含有标签蛋白。实验证明，本发明提供的杂种泛素结合结构域多肽能够高效、无偏性的结合泛素分子及其携带的不同的泛素链，可以提高大规模泛素化蛋白质的富集效率，用于开发高效的泛素化蛋白质分离介质和生化试剂，也可为体内蛋白质泛素化的调节提供技术手段本发明对于推动人类疾病样本泛素化蛋白质组学研究和健康医学的发展具有重要意义。
人工构建杂种结合结构多肽及其应用

[发明专利]植物体外泛素蛋白降解系统及其应用-CN201310007041.9有效
发明人：谢旗;赵庆臻 -专利权人：中国科学院遗传与发育生物学研究所
申请日： 2013-01-08 - 公布日： 2013-05-08 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种植物体外泛素蛋白降解系统及其应用。本发明所提供的植物体外泛素蛋白降解系统为由来自于拟南芥的1种泛素激活酶、14种泛素结合酶、野生型及K48R和K63R点突变的泛素蛋白组成的组合物。与目前常用的体外泛素化反应成分相比，本发明组合物的全部组分均来源于模式植物拟南芥，当用于检测植物来源的待测蛋白是否具有泛素化活性时，分析结果更真实可信；另外本发明组合物中包含了能代表拟南芥泛素结合酶绝大部分亚家族特征的组分，覆盖面广，利用这些组分能更全面的检测泛素连接酶的活性并分析E2-E3的特异性结合情况，可为基因功能的研究提供更多的线索；再则，利用点突变泛素蛋白还可分析泛素化反应所形成的多聚泛素链的类型。
植物体外蛋白降解系统及其应用

[发明专利]一种检测样品中多聚泛素化信号的检测方法-CN202111644251.X在审
发明人：李衍常;徐平;黄帅;高媛;肖伟弟;常蕾 -专利权人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
申请日： 2021-12-29 - 公布日： 2022-08-19 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明涉及生物样本中蛋白质泛素化修饰的高效、灵敏且特异的检测方法。本发明方法的泛素化修饰检测试剂，是由两个不同的泛素结合结构域串联而成的人工合成多肽(ThUBD)，且N端含有标签蛋白GST，通过GST标签与辣根过氧化物酶(HRP)或荧光素(Fluorescein)连接该检测试剂与方法可以真实有效地检测甲醛固定石蜡包埋的组织样本(FFPE)中的泛素化信号，并实现对生物样本内源多聚泛素链信号的荧光成像分析。与商业化抗体法以及公布的泛素化信号检测方法，该发明方法具有高效、简洁、灵敏、特异的检测性能，可为细胞和组织内的泛素化蛋白调节的检测提供技术手段。
一种检测样品中多聚泛素化信号方法

[发明专利]一种用于二泛素合成的新型辅基连接臂及其合成方法-CN201710422071.4在审
发明人：李宜明;孔一夫;储国超;黄轶超 -专利权人：合肥工业大学
申请日： 2017-06-07 - 公布日： 2017-09-26 - 主分类号： C07D277/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于二泛素合成的新型辅基连接臂及其合成方法，该辅基连接臂通过TEC反应装载到蛋白上后再通过NCL与第一段泛素偶联，最后脱除辅基即可获得基于表达泛素单元的泛素链。
一种用于二泛素合成新型连接及其方法

[发明专利]一种检测泛素结合酶抗体的试剂盒及使用方法-CN202110529869.5在审
发明人：刘煜;钱莉;朱昱晓 -专利权人：南京医科大学附属逸夫医院
申请日： 2021-05-14 - 公布日： 2021-07-20 - 主分类号： G01N33/573 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测泛素结合酶抗体的试剂盒及使用方法，属于生物医学领域。一种检测泛素结合酶抗体的试剂盒，包括：用于检测泛素结合酶抗体的溶液；所述溶液包含用于标记泛素结合酶抗体的活性酯和非放射性溶液。所述试剂盒还包括96孔平板、链霉亲和素石墨烯平板、0.01mol/L的PBS溶液、5％的BSA溶液和PBST溶液。所述链霉亲和素石墨烯平板为链霉素标记的MSD96孔板。
一种检测结合抗体试剂盒使用方法

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