本发明公开了一种制备木二糖的方法及其专用固定化酶。本发明的固定化木聚糖酶按照包括如下步骤的方法制备：1)用金属螯合环氧载体Eupergit C 250L固定重组木聚糖酶XynB，得到固定化酶；2)将步骤1)得到的固定化酶悬浮于0.5－1.25M、pH为5.5－8.0磷酸盐缓冲液中，20－35℃反应12－60小时，得到固定化木聚糖酶；所述重组木聚糖酶XynB是将核苷酸序列是序列表中序列1的DNA序列的木聚糖酶基因经大肠杆菌表达得到的木聚糖酶。该固定化木聚糖酶的酶活力回收较高，稳定性和装柱后连续操作性能优良，便于连续化生产，且产物组成稳定易于控制；利用该固定化木聚糖酶生产木二糖，水解操作简单，可节约酶的用量，还可实现酶与水解液的分离，大幅度降低生产成本并提高生产效率因此，该方法是一种适宜工业化生产木二糖的方法。
本发明提供了一种密码子优化的内切葡聚糖酶，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还提供了密码子优化的内切葡聚糖酶的制备方法和应用。本发明里氏木霉的密码子偏好优化了来源于黑曲霉中的eng1基因，改造后的基因序列与野生型黑曲霉的eng1基因序列（Genebank收录号为AF331518）同源性为95.5%。密码子偏好优化后的eng1表现出较高酶活，本发明核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示密码子优化的内切葡聚糖酶由全基因合成，并连接到里氏木霉纤维二糖水解酶1启动子下。采用原生质体转化法将合成的内切葡聚糖酶基因转化到里氏木霉中，获得重组菌。
本发明公开一种中性内切木聚糖酶及其编码基因与应用。该XYN‑H31基因序列为一个完整的开放阅读框(ORF)，该开放阅读框以起始密码子ATG开始而以终止密码子TGA结束，共包括1380个核苷酸，其核苷酸序列如SEQ ID No：1所示。上述中性内切木聚糖酶XYN‑H31基因编码的蛋白质，其氨基酸序列如SEQ ID No：2所示。本发明还公开了上述中性内切木聚糖酶XYN‑H31在造纸等工业中的应用。
本发明公开一种碱性木聚糖酶及其编码基因与应用。该S1基因序列为一个完整的开放阅读框(ORF)，该开放阅读框以起始密码子ATG开始而以终止密码子TAA结束，共包括609个核苷酸，其核苷酸序列如SEQ ID No1所示。上述碱性木聚糖酶S1基因编码的蛋白质，其氨基酸序列如SEQ ID No2所示。本发明还公开了上述碱性木聚糖酶S1在造纸等工业中的应用。
本发明公开一种碱性木聚糖酶及其编码基因与应用，属于生物技术领域。该WMN‑3基因序列为一个完整的开放阅读框(ORF)，该开放阅读框以起始密码子ATG开始而以终止密码子TAA结束，共包括1476个核苷酸，其核苷酸序列如SEQ ID No：1所示。上述碱性木聚糖酶WMN‑3基因编码的蛋白质，其氨基酸序列如SEQ ID No：2所示。本发明还公开了上述碱性木聚糖酶WMN‑3在造纸等工业中的应用。
本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种新型木聚糖酶Xyn‑dx及其应用。本发明的新型木聚糖酶Xyn‑dx，其具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，上述木聚糖酶，其具有如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。本发明的木聚糖酶具有以下性质：最适pH8.5，最适温度70℃，良好的pH稳定性和热稳定性。其做为一种新型的酶制剂，可广泛用于造纸以及饲料添加剂等。
本发明提出了一种源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001菌株的新型β-1，4-内切木聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆和分析方法，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO：1和SEQ生物信息学分析表明该β-1，4-内切木聚糖酶是在A.usamii E001中发现的第三种11家族的木聚糖酶，所以命名为Aus Xyn11C，其氨基酸序列为SEQ ID NO：3，相应的基因命名为Aus 这为该基因的异源表达和工业化生产奠定了理论基础，有较大的工业化生产和应用潜力及经济价值，也为其它β-1，4-内切木聚糖酶的研究奠定了理论基础。
