本发明公开了一种鸭坦布苏病毒E蛋白截短体基因、重组鸭瘟病毒及构建方法和应用。所述鸭坦布苏病毒E蛋白截短体基因,其核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。一种重组鸭瘟病毒,所述重组鸭瘟病毒的基因组中插入有所述的鸭坦布苏病毒E蛋白截短体基因。本发明筛选获得了一种鸭坦布苏病毒E蛋白的截短体基因,通过将该E蛋白截短体基因插入到重组鸭瘟病毒的基因组中获得一种新的重组鸭瘟病毒,感染CEFs细胞后,该E蛋白截短体基因获得高效表达。该插入了E蛋白截短体基因的重组鸭瘟病毒能够用于鸭瘟病毒和鸭坦布苏病毒二联疫苗的制备。
本发明公开了一种Cas蛋白截短体、构建其的方法及其应用。所述Cas13蛋白截短体由以下(1)‑(3)中任一种组成:(1)相对如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列存在选自第623‑772位、第773‑922位、第923‑1072位、第623‑1072位、第位、第1127‑1272位、第994‑1107位、第726‑827位、第263‑315位、第82‑132位、第187‑243位、第610‑661位、第593‑658位和第810‑905位的任一种缺失的截短体序列;(2)同源或异源蛋白结构域,以及(1)中所述截短体序列;(3)同源或异源蛋白结构域,(1)中所述截短体序列,以及用于连接所述蛋白结构域与所述截短体序列的连接序列。本发明的Cas蛋白截短体在保持编辑活性的同时大大减小了蛋白尺寸,便于AAV递送,具有广泛的应用前景。
本发明提供了一种TRPM3截短体、包含其的细胞系及其用途。所述TRPM3截短体包含如SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列。本发明还提供了一种细胞系,其包含所述TRPM3截短体。本发明还提供了一种筛选与TRPM3相互作用的化合物的方法,其包括i)在细胞膜上表达所述TRPM3截短体,使所述化合物与所述TRPM3截短体接触,利用全细胞膜片钳记录通道电流;或ii)使所述化合物与所述细胞系接触本发明提供的TRPM3截短体,不改变保守功能区,相比野生型人源TRPM3而言,其稳定性和产量都有明显的提升,并且全细胞膜片钳可以记录到较大的持续稳定的特异性通道电流。