本发明公开了一种异源可溶性表达肝靶向干扰素的方法,具体步骤为S1.将肝靶向干扰素突变成SEQ ID NO:2所示的突变肝靶向干扰素;S2.将编码SEQ ID NO:2所示突变肝靶向干扰素基因的核苷酸序列中的大肠杆菌稀有密码子替换成大肠杆菌非稀有密码子,优化后的编码SEQ ID NO:2所示突变肝靶向干扰素基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示;S3构建表达突变肝靶向干扰素的重组表达载体,将重组表达载体导入大肠杆菌,获得可溶性表达突变肝靶向干扰素的重组大肠杆菌菌株,诱导重组大肠杆菌表达,获得可溶性表达的突变肝靶向干扰素。本发明首次实现了肝靶向干扰素的可溶性表达,表达产物无需变复性等复杂工艺即可获得高纯度目的蛋白,有助于减化制备工艺、降低生产成本;同时通过对肝靶向干扰素进行改造,获得生物学活性更强的突变肝靶向干扰素。
一种鹅干扰素-α多肽基因,它涉及一种鹅干扰素-α基因。它解决了目前天然的鹅干扰素-α基因在大肠杆菌内不能表达的问题。本发明鹅干扰素-α多肽基因序列如SEQ ID NO:1所示。本发明鹅干扰素-α多肽基因能够在大肠杆菌表达系统中高效表达鹅干扰素-α成熟多肽。本发明的鹅干扰素-α多肽基因转录后mRNA的二级结构明显优于天然鹅干扰素-α多肽基因,提高了鹅干扰素-α在大肠杆菌系统中的表达量,实现了高效表达。
一种牛干扰素-α多肽基因,它涉及一种牛干扰素-α基因。它解决了目前牛干扰素-α基因在原核表达体系内存在低表达和构建表达载体后转录的mRNA翻译活性低的问题。本发明牛干扰素-α多肽基因序列如SEQ ID NO:1所示。本发明木糖还原酶基因序全长516bp,7bp处有起始密码子ATG,508bp处有终止密码子TAA,有504bp完整的开放阅读框。本发明牛干扰素-α多肽基因可以在原核表达系统中高效表达牛干扰素-α成熟多肽。本发明的牛干扰素-α多肽基因转录后mRNA的二级结构明显优于天然牛干扰素-α多肽基因,提高牛干扰素-α的mRNA翻译活性。