本发明公开了一种叶绿体表达的脑源性神经营养因子hBDNFb蛋白及其制备方法。本发明还公开了一种叶绿体表达的脑源性神经营养因子hBDNFb蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。上述蛋白的制备方法包括以下步骤:构建烟草叶绿体表达载体pWYP23402;hBDNFb基因的烟草叶绿体转化与同质化筛选,得到烟草叶绿体转hBDNFb基因的同质化植株;叶绿体转基因烟草植株中hBDNFb表达量分析;脑源性神经营养因子hBDNFb蛋白的纯化,得到叶绿体表达的脑源性神经营养因子hBDNFb蛋白。本发明在烟草叶绿体中高效表达了hBDNFb的GFP融合蛋白,具备了商业化生产的条件。
本发明公开了一种叶绿体表达的表皮生长因子hEGF蛋白及其制备方法,该蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了一种用于生产表皮生长因子hEGF蛋白的烟草叶绿体表达载体pWYP23404。上述蛋白的制备方法包括以下步骤:构建烟草叶绿体表达载体pWYP23404,EGF基因的烟草叶绿体转化与同质化筛选,得到烟草叶绿体转hEGF基因的同质化植株,叶绿体转基因烟草植株中hEGF表达量分析;表皮生长因子hEGF蛋白的纯化,得到叶绿体表达的表皮生长因子hEGF蛋白。本发明在烟草叶绿体中高效表达了hEGF的GFP融合蛋白具备了商业化生产的条件。