本发明涉及一种转苷底物特异性拓宽的β-半乳糖苷酶。本发明提供一种转苷底物特异性拓宽的β-半乳糖苷酶,氨基酸序列如SEQ ID No.1所示;本发明还提供了编码该转苷底物特异性拓宽的β-半乳糖苷酶的基因。本发明所述的转苷底物特异性拓宽的β-半乳糖苷酶出现了新的受体选择性,能对天然β-半乳糖苷酶难以糖基化或无法糖基化的酚类化合物进行转糖反应,可作为酚类化合物及相关药物分子修饰和改性的有力工具,应用前景广阔
本发明公开了一种α‑半乳糖苷酶基因及其应用,涉及生物技术领域。本发明公开的α‑半乳糖苷酶基因,其适于编码α‑半乳糖苷酶,其核苷酸序列如SEQ ID NO1所示。该人工设计的α‑半乳糖苷酶基因采用了毕赤酵母中的高频密码子替换原有的低频密码子,降低了mRNA的自由能及其mRNA二级结构的复杂性,并通过对次高频密码子的选用消除了基因中富含AT或GC的区域以及蛋白酶作用位点,显著地提高了该人工合成的α‑半乳糖苷酶基因在毕赤酵母细胞中的表达量。
本发明涉及基因工程领域,具体地,本发明涉及一种耐高温嗜酸α-半乳糖苷酶Agal L56及其基因和应用。本发明的耐高温嗜酸α-半乳糖苷酶Agal L56,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的耐高温嗜酸α-半乳糖苷酶基因agal L56,编码权利要求1所述的α-半乳糖苷酶Agal L56,其碱基序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的α-半乳糖苷酶最适pH为2.5,在pH1.0-7.0都有较高的酶活性;pH稳定性好;其耐高温特性,可使其在需求高温环境的工业生产上应用。
具体地,本发明涉及一种高温热稳定酸性α-半乳糖苷酶Gal27A及其基因和应用,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。本发明提供了一个新的α-半乳糖苷酶基因,其编码的α-半乳糖苷酶具有酸性、高温、热稳定能力,可作应用于饲料、食品、医药等工业。根据本发明的技术方案就可以实现利用基因工程手段生产性质优良适合工业应用的α-半乳糖苷酶。
所述mRNA包含编码如序列SEQ ID No.8所示氨基酸序列的α‑半乳糖苷酶A的mRNA序列,所述mRNA序列包括如SEQ ID No.1所示的ORF序列。本发明对编码α‑半乳糖苷酶A的mRNA序列进行了优化,以提高心脏中α‑半乳糖苷酶蛋白的表达量,并且同时保持在肾脏、肝脏等器官的α‑半乳糖苷酶蛋白的表达量,提高了对法布雷病疾病治疗的效果。