本发明公开了一种水稻尿苷二磷酸乙酰葡糖胺焦磷酸化酶及其应用,所述水稻尿苷二磷酸乙酰葡糖胺焦磷酸化酶基因的编码区序列SEQ ID NO:3,序列长1482bp,编码493个氨基酸,相对分子量为54.45kD,等电点为6.24,具有UDPGP保守结构域,N‑端不含跨膜结构和信号肽;所述水稻尿苷二磷酸乙酰葡糖胺焦磷酸化酶基因的蛋白序列:SEQ ID NO:4。
本发明公开了一种低温耐盐耐产物抑制的β‑N‑乙酰葡糖胺酶,β‑N‑乙酰葡糖胺酶氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;制备方法包括:包含β‑N‑乙酰葡糖胺酶基因jb10nagA的重组载体,重组载体为pEasy‑E2‑jb10nagA,将乙酰葡糖胺酶基因插入到表达载体中,使核苷酸序列与表达调控序列相连接,用重组载体转化宿主细胞,得重组菌株;培养重组菌株,诱导重组β‑N‑乙酰葡糖胺酶JB10NagA表达;回收所表达的β‑N‑乙酰葡糖胺酶JB10NagA。本发明的β‑N‑乙酰葡糖胺酶可应用于海产品加工、生物燃料、医学、功能性食品等行业。
本发明公开了一种耐产物抑制的β‑N‑乙酰葡糖胺酶及其制备方法,所述β‑N‑乙酰葡糖胺酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述方法包括:首先用包含β‑N‑乙酰葡糖胺酶基因hJ5nag的重组载体,重组载体转化宿主细胞,得重组菌株;然后培养重组菌株,诱导重组β‑N‑乙酰葡糖胺酶HJ5nag表达;最后回收所表达的β‑N‑乙酰葡糖胺酶HJ5nag。本发明的β‑N‑乙酰葡糖胺酶,最适pH6;最适温度为45℃;可催化水解几丁寡糖;在反应体系加入终浓度20mM N‑乙酰‑D‑胺基葡萄糖时,该酶仍保留约69.5%活性;可与内切几丁质酶协同降解几丁质,可应用于海产品加工