一种产反式乌头酸的重组土曲霉及其制备方法与应用，属于基因工程技术领域。为了提高生物法合成反式乌头酸的产量，本发明提供了一种产反式乌头酸的重组土曲霉，是以土曲霉(Aspergillus terreus)为出发菌株，在出发菌株中敲除顺乌头酸脱羧酶CadA基因，并过表达乌头酸异构酶所述乌头酸异构酶CICC00358的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明在敲除CadA的基础上过表达CICC00358推动了顺乌头酸转化为反式乌头酸，从而获得更高的反式乌头酸产量，可用于反式乌头酸的生产。
一种产反式乌头酸的重组土曲霉菌株及其构建方法与应用，属于基因工程技术领域。为了提高生物法合成反式乌头酸的产量，本发明提供了一种产反式乌头酸的重组土曲霉菌株，是以土曲霉(Aspergillus terreus)为出发菌株，在出发菌株中敲除顺乌头酸脱羧酶CadA基因，并过表达乌头酸异构酶所述乌头酸异构酶Adi1的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明在敲除CadA的基础上过表达Adi1推动了顺乌头酸转化为反式乌头酸，从而获得更高的反式乌头酸产量，可用于反式乌头酸的生产。
一种产反式乌头酸的重组土曲霉菌株及其制备方法与应用，属于基因工程技术领域。为了提高生物法合成反式乌头酸的产量，本发明提供了一种产反式乌头酸的重组土曲霉，所述重组土曲霉以土曲霉(Aspergillus terreus)为出发菌株，是在出发菌株中敲除顺乌头酸脱羧酶CadA基因，并过表达乌头酸异构酶所述乌头酸异构酶TbrA的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明在敲除cadA的基础上，通过在不同基因组位点、使用不同启动子在土曲霉中异源表达tbrA基因，获得更高效的产反式乌头酸土曲霉工程菌株可用于反式乌头酸的生产。
本发明涉及微生物技术领域，具体涉及乌头酸水合酶突变体及其应用。本发明提供的乌头酸水合酶突变体具有如SEQ ID NO.1‑5任一所示的氨基酸序列。本发明提供的乌头酸水合酶突变体显著降低了乌头酸水合酶的酶活性，可使得草酰乙酸更多地流向天冬氨酸及其下游代谢产物的合成途径。利用该乌头酸水合酶突变体构建的重组微生物的赖氨酸合成能力显著提升，赖氨酸的产量和转化率得到明显提高，且重组微生物具有较好的生长性能。
