本发明属于生物工程领域,具体地,本发明涉及一种中性蛋白酶及其基因和应用。本发明的中性蛋白酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的中性蛋白酶基因,其碱基序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供了包含所述中性蛋白酶基因的重组载体,以及包含所述中性蛋白酶基因的重组菌株。本发明运用基因工程技术构建了含有中性蛋白酶基因的重组质粒,并在解淀粉芽孢杆菌中实现了中性蛋白酶的高效表达。构建的中性蛋白酶重组菌株具有较高的应用价值,具有很高的产中性蛋白酶的能力,发酵液中酶活可达到9000U/ml。
本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种中性蛋白酶基因、中性蛋白酶及其制备方法和应用。本发明中性蛋白酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明通过将中性蛋白酶Np的第422位氨基酸和第433位氨基酸突变为半胱氨酸,可以形成二硫键,使所得中性蛋白酶的热稳定性得到显著提升,具有更广泛的应用前景。
本发明涉及基因工程领域,具体地,本发明涉及一种具有耐高温中性蛋白酶HuPro及其基因和应用。本发明提供了一种来源于Humicola sp.P8的中性蛋白酶HuPro,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,且本发明提供了编码上述中性蛋白酶的编码基因hupro。本发明的中性蛋白酶具有以下性质:最适pH8.0,在中性和碱性范围内依然保持较高酶活,最适温度65℃,良好的pH和热稳定性,并且具有广泛的底物特异性。