[发明专利]一种螺旋霉素的微生物转化方法

摘要

一种螺旋霉素的微生物转化方法，其酰化酶的微生物变株具有专一性和较强酰化4″-羟基的酶活性，将底物螺旋霉素加入对数生长期的上述变株培养物中，酰化过程不加任何前体和辅酶。这种微生物转化方法定向性好，反应条件较温和，可避免化学转化带来的劳动保护与环境污染问题。由于用螺旋霉素粗品即可转化，转化率可达75％以上，酶源丰富，故适于工业化生产。

主权项

1、一种螺旋霉素微生物转化的方法，该方法包括的步骤是：(1)、酰化反应所用底物为螺旋霉素，产生酰化酶的无活性变株68T100(即Streptomycesmyarofaciensvarys-col)(该菌株的保藏号为CGMCCNo.0128)作酶源；(2)培养条件和方法：培养基组份为淀粉、葡萄糖、黄豆饼粉、(NH4)2So4、酵母粉、CaCo2、磷酸盐和MgSo4等作为培养种子和发酵菌株，温度27-29℃，PH自然PH，其过程是：斜面→种子→发酵，到对数生长期加入螺旋霉素进行酰化反应；(3)、酰化反应到一定时期分离酰化产物作薄层定性和定量和鉴别；其特征是：(a)、产生酰化酶较强的无活性变株，此菌株能定向酰化螺旋霉素4″-位羟基，而不涉及其它羟基；(b)、采用一般发酵方法进行培养，不需要加任何前体和辅酶，只加底物螺旋霉素，即可定向转化成4″-位丙酰螺旋霉素单一组份；(c)、发酵培养基：淀粉1～3％、葡萄糖1～3％、(NH4)2SO40.1～0.5％、酵母粉0.3～0.8％、黄豆饼粉0.5～2.0％、K2HPO40.05％、MgSO40.02％、CaCO20.3～0.8％组成自然PH；(d)、酰化条件：在发酵过程中，俟菌种生长到对数生长期将螺旋霉素溶后加入发酵液进行动态酰化，条件是温度为27-29℃，PH6～6.5时间48～72小时；(e)、产物分离：用一般溶媒法分离丙酰螺旋霉素，通过硅酸柱层析进行纯化，得到纯4″-0-螺旋霉素。