[发明专利]一种快速检测鉴定巨菌草酵母双杂交筛库阳性克隆的PCR方法在审
| 申请号： | 202310880620.8 | 申请日： | 2023-07-18 |
| 公开（公告）号： | CN116855628A | 公开（公告）日： | 2023-10-10 |
| 发明（设计）人： | 周晶;阳伏林;刘一佳 | 申请（专利权）人： | 福建农林大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 林文弘;蔡学俊 |
| 地址： | 350002 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明提供了一种快速检测鉴定巨菌草酵母双杂交筛库阳性克隆的PCR方法。所述方法需提前对酵母菌落进行破壁，使用无菌枪头挑取单克隆菌落于20μL NAOH溶液（0.2M）中吹打混匀，99℃均质破壁10min，以破壁后的上清液为模板，采用上游引物F：5'‑CTATTCGATGATGAAGATACCCC‑3'和下游引物R：5'‑GTGAACTTGCGGGGTTTTTCAG‑3'，进行PCR反应；PCR反应循环设置为：95℃预变性3min；95℃变性30s，57℃退火30s，72℃延伸30s，35个循环；72℃延伸10min，反应结束。本发明具有快速、成功率高、价格低廉等特点，为巨菌草酵母双杂交筛库阳性克隆的检测和鉴定提供了方法依据，同时也为其他物种酵母克隆的鉴定提供了参考，对解决小众植物、多倍体植物的酵母克隆鉴定问题具有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 快速 检测 鉴定 巨菌草 酵母 双杂交 阳性 克隆 pcr 方法 | ||
【主权项】：
暂无信息
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