[发明专利]靶向ZFY基因的sgRNA和利用其整合外源基因的绵羊成纤维细胞系的建立在审
| 申请号： | 202310431998.X | 申请日： | 2023-04-21 |
| 公开（公告）号： | CN116478989A | 公开（公告）日： | 2023-07-25 |
| 发明（设计）人： | 韩红兵;汪林丽;艾越 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/85;C12N15/873;C12N15/65;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 董函竹 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了靶向ZFY基因的sgRNA和利用其整合外源基因的绵羊成纤维细胞系的建立。具体地公开了靶向ZFY基因的sgRNA，其靶序列为SEQ ID No.1。本发明还公开了一种构建定点整合外源基因的细胞系的方法，包括利用CRISPR/Cas9系统通过HMEJ方法介导的重组将外源基因定点整合到受体细胞的ZFY基因的靶点中的步骤。本发明在山羊成纤维细胞中筛选了ZFY基因第一内含子上的有效sgRNA，并在该位点采用HMEJ方法介导的重组定点整合了tdTomato基因，获得了标记Y染色体的绵羊成纤维细胞，该细胞能够结合体细胞核移植技术获得转基因绵羊，从而用于分离XY精子，最终用于性别控制。 | ||
| 搜索关键词： | 靶向 zfy 基因 sgrna 利用 整合 绵羊 纤维 细胞系 建立 | ||
【主权项】：
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