[发明专利]评价酒体中不同微量成分对细胞自噬水平影响程度的方法在审

专利信息
申请号: 202310098248.5 申请日: 2023-02-10
公开(公告)号: CN116203002A 公开(公告)日: 2023-06-02
发明(设计)人: 黄和强;陈杉彬;李善文;韩兴林;王德良;冯声宝;赵文梅 申请(专利权)人: 青海互助天佑德青稞酒股份有限公司;中国食品发酵工业研究院有限公司
主分类号: G01N21/64 分类号: G01N21/64;C12Q1/02;C12N5/10;C12N15/867;C12N15/62
代理公司: 北京瀚群律师事务所 11581 代理人: 毛军
地址: 810500 青海*** 国省代码: 青海;63
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摘要: 本申请用于食品领域,公开了一种评价酒体微量成分对细胞自噬水平影响程度的方法,包括以下步骤:步骤一、配制稳定表达GFP‑RFP‑LC3蛋白的人肝细胞(LO2)单细胞悬液;步骤二、将1.5×104cell/mL的该LO2细胞接种于6孔板中盖玻片培养24h至贴壁;步骤三、加入2mL含80μL纯酒精或含不同酒体微量成分酒样的细胞培养,37℃,5%CO2条件培养24h。步骤四、4%多聚甲醛中固定15min。步骤五、PBS清洗玻片晾干后滴加含DAPI的防淬灭剂,爬满细胞的一面置于防淬灭剂上。步骤六、激光共聚焦显微镜观察红绿荧光,根据不同荧光判断酒体微量成分对细胞自噬的影响。本申请通过上述观察不同荧光能够快速评价酒体中微量成分对细胞自噬水平的影响程度。
搜索关键词: 评价 酒体中 不同 微量 成分 细胞 水平 影响 程度 方法
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