[发明专利]一种猪成纤维细胞培养方法在审
申请号: | 202211254708.0 | 申请日: | 2022-10-13 |
公开(公告)号: | CN115418345A | 公开(公告)日: | 2022-12-02 |
发明(设计)人: | 胡诚军;彭维祺;冀凤杰;吕仁龙;荣光;周汉林 | 申请(专利权)人: | 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077 |
代理公司: | 成都宏田知识产权代理事务所(普通合伙) 51337 | 代理人: | 徐鹏 |
地址: | 571700 *** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | 本发明公开了一种猪成纤维细胞培养方法,包括以下步骤:剪取猪耳组织,加入0.1%胶原蛋白酶消化液将耳组织充分剪碎至匀浆,后将其转移至已加0.1%的胶原蛋白酶消化液的离心管中消化;加入DMEM终止消化,并反复吹打数次至组织块充分散开为单细胞,过滤,离心,弃去上清液,收集细胞沉淀;在细胞沉淀中加入培养基重悬细胞,接种至培养皿中,将培养皿放入培养箱中培养,去除培养基,清洗,再加入培养基,继续培养,获得猪成纤维细胞。本发明利用胶原蛋白酶分离猪耳组织,避免了现有技术中37℃条件下胰蛋白酶水解对细胞表面蛋白质的破坏,避免了细胞损伤。收获的成纤维细胞成活率高,贴壁率高,繁殖力增强,有利于猪种质资源的保存。 | ||
搜索关键词: | 种猪 纤维 细胞培养 方法 | ||
【主权项】:
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