[发明专利]一种适用于小鼠肝脏单细胞测序的低温解离方法在审
| 申请号： | 202211209695.5 | 申请日： | 2022-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN115466714A | 公开（公告）日： | 2022-12-13 |
| 发明（设计）人： | 蒋建国;陈志锋;梁洪 | 申请（专利权）人： | 杭州联川生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 杭州信与义专利代理有限公司 33450 | 代理人： | 马育妙 |
| 地址： | 310018 浙江省杭州市杭*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种适用于小鼠肝脏单细胞测序的低温解离方法，包括收获新鲜的肝脏组织进行处理；后放入到加有地衣芽孢杆菌蛋白酶混合物的培养皿中解离；并在2‑6℃环境下孵育，得到组织匀浆；将组织匀浆过细胞筛，用DMEM或1640培养基冲洗过滤器并停止酶活性，得到细胞悬液；将细胞悬液进行离心，去上清液；并用含胎牛血清的DMEM或1640培养基重悬细胞，然后过细胞筛；收集细胞沉淀，使用DPBS重悬细胞，即可得到解离后的肝脏单细胞。本发明提供的一种适用于小鼠肝脏单细胞测序的低温解离方法，解决了传统的“热解离”实验方法造成的肝实质细胞死亡，留存的细胞中有大量的应激基因表达等问题。该方法具有较好的技术表现，方便有效，适于推广应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 适用于 小鼠 肝脏 单细胞 低温 解离 方法 | ||
【主权项】：
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