[发明专利]一种含rfp报告基因的细菌基因敲除质粒及其应用在审
| 申请号： | 202210589981.2 | 申请日： | 2022-05-26 |
| 公开（公告）号： | CN114836455A | 公开（公告）日： | 2022-08-02 |
| 发明（设计）人： | 刘惠忠;王颖思;谢小保;施庆珊 | 申请（专利权）人： | 广东省科学院微生物研究所（广东省微生物分析检测中心） |
| 主分类号： | C12N15/65 | 分类号： | C12N15/65;C12N15/78;C12N15/64;C12N1/21;C12R1/38 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 朱聪聪;刘明星 |
| 地址： | 510070 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种含rfp报告基因的细菌基因敲除质粒及其应用，属于分子生物学领域。具体地，本发明提供一种质粒pBRR50，其含有庆大霉素抗性基因、mob接合转移元件、R6K复制起始位点、多克隆位点区和由点突变lac启动子控制的红色荧光蛋白编码基因rfp；所述lac启动子的碱基序列优选如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供了上述质粒pBRR50的构建方法及应用，该质粒能高效表达红色荧光蛋白，使细菌在日光下呈现明显的红色。在基因敲除过程中，发生第一次同源重组的细菌具有庆大霉素抗性和红色菌落表型，发生第二次同源重组的细菌从红色恢复为原来的颜色，可根据菌落颜色对发生第二次同源重组的菌株实现直接的筛选。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 rfp 报告 基因 细菌 质粒 及其 应用 | ||
【主权项】：
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