[发明专利]一种全能核酸酶的高密度发酵表达及分离纯化的方法在审
申请号: | 202210432924.3 | 申请日: | 2022-04-24 |
公开(公告)号: | CN115322978A | 公开(公告)日: | 2022-11-11 |
发明(设计)人: | 谭鑫;茅缪伟;张长清;王小曼;张立俊 | 申请(专利权)人: | 上海健启生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/22 | 分类号: | C12N9/22;C07K19/00;C12N15/70;C12R1/19 |
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地址: | 201400 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及核酸酶加工技术领域,且公开了一种全能核酸酶的高密度发酵表达及分离纯化的方法,所述纯化方法包括以下步骤:S1、菌体构建,构建含全能核酸酶目的基因的质粒;S2、发酵表达;S3、发酵菌体预处理;S4、层析纯化,将含目的蛋白的上清液通过亲和层析纯化。该全能核酸酶的高密度发酵表达及分离纯化的方法,通过表达全能核酸酶的大肠杆菌发酵得到高表达量的分泌核酸酶,并采用层析纯化方法得到高纯度的全能核酸酶,由于在表达核酸酶的基因序列上添加6×His‑tag及SUMO‑tag双标签,因此可以显著提高全能核酸酶的生产效率与蛋白纯度,缩短生产时间,降低成本,有利于全能核酸酶的工业化生产及应用。 | ||
搜索关键词: | 一种 全能 核酸酶 高密度 发酵 表达 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】:
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