[发明专利]AP质粒及其应用、PAP I酶的PACE定向进化系统及PAP I酶突变体在审
| 申请号： | 202210298710.1 | 申请日： | 2022-03-22 |
| 公开（公告）号： | CN114854781A | 公开（公告）日： | 2022-08-05 |
| 发明（设计）人： | 宋东亮;胡慧芳;刘想 | 申请（专利权）人： | 翌圣生物科技（上海）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N9/16;C12N15/55;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 苏州根号专利代理事务所(普通合伙) 32276 | 代理人： | 朱华庆 |
| 地址： | 200120 上海市浦*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供一种AP质粒，其特征为：所述质粒表达gIII‑neg蛋白，且在其核糖体结合位点后部插入了一个或多个SEQ ID No.1所示的RyhB结合序列。还公开了其在PAP I酶的PACE定向进化中的应用及PAP I酶的PACE定向进化系统。并公开了筛选得到的PAP I酶突变体、编码基因、原核表达载体及原核表达系统。本发明在PACE定向进化方法中引入了大肠杆菌非编码RNA RyhB sRNA，抑制gIII‑neg蛋白的翻译，解除gIII‑neg蛋白对子代噬菌体包装的不利影响。聚腺苷化活性越强的PAP I，越能延长RyhB的半衰期，促进后者对gIII‑neg蛋白的翻译抑制作用。噬菌体在多次传代后形成种群优势并被分离测序，最终获得活力显著提升的PAP I。 | ||
| 搜索关键词： | ap 质粒 及其 应用 pap pace 定向 进化 系统 突变体 | ||
【主权项】：
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