[发明专利]一种体外原核表达肠道沙门氏菌avrA蛋白的方法在审
| 申请号： | 202210263568.7 | 申请日： | 2022-03-17 |
| 公开（公告）号： | CN115093469A | 公开（公告）日： | 2022-09-23 |
| 发明（设计）人： | 徐云明;陈益;卜永谦;孙智远;杨剑波;卞蓉蓉 | 申请（专利权）人： | 江苏农林职业技术学院 |
| 主分类号： | C07K14/255 | 分类号： | C07K14/255;C07K1/26;C12N15/31;C12N15/70;C12N15/66;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 柏尚春 |
| 地址： | 212400 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种体外原核表达肠道沙门氏菌avrA蛋白的方法。本发明所述的方法包括以下步骤：(S1)设计沙门氏菌的avrA基因的引物，进行avrA基因体外扩增；(S2)重组载体的构建：将扩增后的avrA基因与通过BamH I酶切位点和XhoI酶切位点双酶切后的pGEX‑4T‑1质粒大片段进行重组，得到重组载体pGEX‑4T‑1‑avrA质粒；(S3)重组菌的构建：将步骤(S2)得到的重组载体转化进感受态细胞中；所述的感受态细胞分别为BL21和Rosetta 2表达菌种；(S4)avrA蛋白的诱导表达：将步骤(S3)得到的重组菌在培养基中培养，将适当浓度的IPTG加入培养基中，诱导avrA蛋白表达。本发明实现了avrA蛋白在细菌裂解上清液中表达，使avrA蛋白的活性及功能更接近原始状态。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 体外 表达 肠道 沙门氏菌 avra 蛋白 方法 | ||
【主权项】：
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