[发明专利]一种3D体外培养中华乌塘鳢精原细胞产生功能精子的方法有效
申请号: | 202210232135.5 | 申请日: | 2022-03-10 |
公开(公告)号: | CN114480262B | 公开(公告)日: | 2022-07-05 |
发明(设计)人: | 刘威;易梅生;张洪;贾坤同 | 申请(专利权)人: | 中山大学 |
主分类号: | C12N5/076 | 分类号: | C12N5/076 |
代理公司: | 广州知友专利商标代理有限公司 44104 | 代理人: | 宣国华 |
地址: | 510275 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开一种3D体外培养中华乌塘鳢精原细胞产生功能精子的方法,包括以下步骤:(1)对分离的中华乌塘鳢精巢进行消毒、清洗、剪碎,加入精巢消化液进行消化,然后经过滤网过滤去除未消化的细胞碎片或者细胞团,制得精巢单细胞悬液;精巢单细胞悬液加入percoll梯度溶液中进行离心,分离得到精原细胞;percoll梯度溶液由22~30%和35~45%两种浓度组成percoll溶液;(2)精原细胞转移到3D培养皿中,用精子诱导培养基进行培养;精子诱导培养基包括基础精子培养基和性激素,进一步还包括褪黑素。该方法从精原细胞的分离、培养和诱导条件进行了优化和改良,提高体外培养精原细胞产生具有功能的精子的效率。 | ||
搜索关键词: | 一种 体外 培养 中华 乌塘鳢精原 细胞 产生 功能 精子 方法 | ||
【主权项】:
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