[发明专利]一种碱性成纤维细胞生长因子制备方法及其应用在审
| 申请号： | 202210198933.0 | 申请日： | 2022-03-02 |
| 公开（公告）号： | CN114540392A | 公开（公告）日： | 2022-05-27 |
| 发明（设计）人： | 黄凯宗;林艳;王帅;韦栋平;樊宏伟 | 申请（专利权）人： | 南京市第一医院 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C07K14/50;C07K19/00;C12P21/06;C07K1/22;C07K1/14;C12N5/077;C12R1/19 |
| 代理公司： | 南京中擎科智知识产权代理事务所(普通合伙) 32549 | 代理人： | 黄智明 |
| 地址： | 210000*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种碱性成纤维细胞生长因子制备方法，包括以下步骤：融合质粒构建；工程菌构建；将上述工程菌培养于培养基，当大肠杆菌的OD值达到2值，温度调为32℃诱导16小时，收集菌体，破碎，离心取上清；将上清37℃下水浴加热，37℃离心，取沉淀部分；向沉淀部分加入预冷的PBS后负40度冷冻2小时，超声溶解，低温离心取溶解部分；溶解部分加入带自备的His‑Tag的EK酶，冰水中酶切12小时；酶切完成后，蛋白质溶液过Ni‑NTA层析柱，ELP‑IDP标签以及带His‑Tag的EK酶将结合至层析柱上，收集流穿部分。bFGF在促进细胞生长增殖方面应用。本发明所制备bFGF的可溶性得到显著提升；同时大幅度简化纯化步骤，具有良好的经济价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 碱性 纤维 细胞 生长因子 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
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