[发明专利]一种特定HBV序列插入到特定基因区域的细胞模型及其构建方法与应用有效
申请号: | 202111086025.4 | 申请日: | 2021-09-16 |
公开(公告)号: | CN114149975B | 公开(公告)日: | 2023-07-07 |
发明(设计)人: | 李伟阳 | 申请(专利权)人: | 济宁医学院 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/36;C12N15/113;C12N9/22;C12N15/85;C12N15/65;C12N15/90;C12Q1/02 |
代理公司: | 青岛锦佳专利代理事务所(普通合伙) 37283 | 代理人: | 邵朋程 |
地址: | 272067 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开一种特定HBV序列插入到特定基因区域的细胞模型及其构建方法与应用,该方法步骤如下:利用CRISPR/Cas9方法定点敲入HBV的P序列使其整合到HEPG2细胞的Chr5:1295920位置200bp区域,实现所述Chr5:1295920位置发生切割,形成DNA双链断裂;同时将含有Chr5:1295920目标位点上下游同源臂的DNA片段P载体导入所述HEPG2细胞中,实现HBV的P序列定点整合到HEPG2细胞的Chr5:1295920位置200bp范围内。本发明首先确定了病毒整合热点区域上的位点,进而进行了特定序列的病毒整合,建立了一株具有特殊性质及基因组特征的病毒整合细胞株,其可以广泛应用在肝癌与HBV病毒关系研究,抗病毒药物筛选,病毒整合研究等领域。 | ||
搜索关键词: | 一种 特定 hbv 序列 插入 基因 区域 细胞 模型 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
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