[发明专利]一种超微量全长RNA测序文库的构建方法在审
申请号: | 202110936057.2 | 申请日: | 2021-08-16 |
公开(公告)号: | CN113789364A | 公开(公告)日: | 2021-12-14 |
发明(设计)人: | 葛芹玉;施华娟;贾二腾;赵祥伟;刘芝余;白云飞 | 申请(专利权)人: | 东南大学 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C12Q1/6869;C40B50/06 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 王艳 |
地址: | 211102 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开超微量的全长总RNA测序文库的构建方法,包括以下步骤:1)对获得细胞或者亚细胞样本中的超微量的总RNA,进行cDNA文库的构建,获得包含rRNA序列信息的cDNA文库;2)对获得的cDNA文库进行无偏性扩增;3)根据相应物种的rRNA序列,设计sgRNA序列组合;4)将sgRNA序列组合配置的溶液与步骤扩增产生的cDNA文库进行混合,获得不包含rRNA信息的cDNA文库。本发明能够实现超微量的总RNA及全长建库,同时又能够在cDNA合成之后使用CRISPR/Cas9高效切割PCR扩增产生的含有rRNA的cDNA文库,从而避免RNA的降解;适用于超低起始量的转录组建库,且花费较低。 | ||
搜索关键词: | 一种 微量 全长 rna 序文 构建 方法 | ||
【主权项】:
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