[发明专利]纯化CR2-crry重组蛋白的制备方法

摘要

本发明公开了纯化CR2‑crry重组蛋白的制备方法，涉及重组蛋白制备纯化技术领域，该纯化CR2‑crry重组蛋白的制备方法，包括基因筛选→基因重组→基因克隆→克隆筛选→蛋白表达→蛋白纯化，CR2‑crry重组蛋白作为目的蛋白，纯化包括以下步骤：S1：发酵表达，通过过滤固液分离收集发酵液，浓缩，S2：加入蛋白酶抑制剂，采用PEI沉淀法分开目的蛋白和其他细胞成分，首先在低盐浓度下沉淀核酸以及含有目的蛋白的组分，经过低盐浓度缓冲液的洗杂步骤后，使用高盐缓冲液将目的蛋白从沉淀中复溶，再经过硫酸铵沉淀的方式沉淀目的蛋白，含有的PEI保持在上清液中，最后将沉淀用缓冲试剂复溶得到含有目的蛋白的粗纯样品。解决了CR2‑crry重组蛋白构建和高效纯化的问题。