[发明专利]高效鉴定米曲霉CRISPR/Cas9突变体的方法在审
| 申请号： | 202110661531.5 | 申请日： | 2021-06-15 |
| 公开（公告）号： | CN113403208A | 公开（公告）日： | 2021-09-17 |
| 发明（设计）人： | 张哲;张焕欣;曾斌;李玉珍;陈梓铭;范俊侠 | 申请（专利权）人： | 江西科技师范大学;江西省农业科学院园艺研究所 |
| 主分类号： | C12N1/15 | 分类号： | C12N1/15;C12N15/80;C12N15/65;C12Q1/04;C12R1/69 |
| 代理公司： | 苏州中合知识产权代理事务所(普通合伙) 32266 | 代理人： | 刘召民 |
| 地址： | 330100 江西省南*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | 本发明提供了高效鉴定米曲霉CRISPR/Cas9突变体的方法，包括：1)构建基于AMA1自主复制质粒的米曲霉基因编辑系统；2)利用米曲霉曲酸合成基因评估步骤1)构建的米曲霉基因编辑系统，所述米曲霉曲酸合成基因选自kojA、kojR和kojT；3)将kojA的sgRNA和PAM序列置于DsRed的起始密码子后面，构建含有kojA的sgRNA和PAM序列的非功能性DsRed，以此评估非功能性DsRed作为报告基因用于筛选米曲霉CRISPR/Cas9突变体。本发明实现了从米曲霉CRISPR/Cas9突变株中批量的初步筛选突变体，避免了大量提取DNA的繁琐，无需进行批量的米曲霉转化子测序筛选。 | ||
| 搜索关键词： | 高效 鉴定 曲霉 crispr cas9 突变体 方法 | ||
【主权项】：
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