[发明专利]一种GS基因敲除CHO-K1细胞株的构建方法及悬浮细胞单克隆化在审
| 申请号： | 202110588787.8 | 申请日： | 2021-05-28 |
| 公开（公告）号： | CN113355360A | 公开（公告）日： | 2021-09-07 |
| 发明（设计）人： | 焦鹏;徐琦;陈少勇;林文龙;李睿;黄启龙 | 申请（专利权）人： | 上海碧博生物医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/87 | 分类号： | C12N15/87;C12N15/55;C12N15/52;C12N5/10 |
| 代理公司： | 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 | 代理人： | 戴广志 |
| 地址： | 201203 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种GS基因敲除的CHO‑K1细胞株的构建方法，包括贴壁培养CHO‑K1细胞，设计并选择sgRNA，将选择的sgRNA与EGFP mRNA、Cas9mRNA组成转染混合物对CHO‑K1共转染，得到GS基因敲除的CHO‑K1细胞株。本发明使用RNA转染混合物对CHO‑K1细胞进行共转染，是一种基于RNA的GS敲除方法，同时结合CRISPR/Cas9基因编辑手段以及结合GFP筛选，既避免了DNA层面的基因组重整，降低了基因组被污染的风险，又提高了GS基因敲除效率，还降低了细胞筛选的工作量；对本发明得到的GS基因敲除的CHO‑K1细胞株进行验证，表明，GS基因敲除效率符合预期。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 gs 基因 cho k1 细胞株 构建 方法 悬浮 细胞 单克隆 | ||
【主权项】：
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